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【摘要】 目的 观察补肾祛斑颗粒对小鼠的急性毒性实验。方法 以最大浓度药液灌胃给药，24 h内给药3次，连续观察7天。详细观察记录小鼠行为活动、状态、饮食、大便、小便、毛色、分泌物及死亡等情况。结果 全部动物健存，也无明显中毒反应，测得补肾祛斑颗粒最大受试药物量为71.16 g/kg，折合生药为105.554 g/kg，为临床患者拟用量的237倍。结论 补肾祛斑颗粒无明显急性毒理反应。
【关键词】 补肾祛斑颗粒；急性毒性；灌胃给药；小鼠
Acute toxicity test of Bushen Quban granule on mouse
LI Shi-mei,TANG Ying-shuang,GUO Hong-lin.Department of Gynaecology and Obstetrics,People’s Liberation Army 323 Hospital,Xi’an 710054,China
［Abstract］ Objective To observe the acute toxicity test of Bushen Quban granule. Methods We fed the mice with the maximum administration concentration drug for 7 days, and gavage administration was done for three times within 24 h. Then, we observed the action, state, diet, stool, piss, hair color, secretion and death amount of the mice. Results All the mice were healthy and had no markedly poisoning reaction. The maximum administration dosage of Bushen Quban granule was 71.16 g/kg, converting into the crude drug was 105.554 g/kg, equivalent to patient’s daily administration dosage by 237 times. Conclusion Bushen Quban granule has no markedly acute reaction.
［Key words］ Bushen Quban granule;acute toxicity;gavage administration; mouse
黄褐斑是一种颜面部色素沉着的色素代谢障碍性损容性皮肤病，好发于中青年女性, 26～35岁的妇女发病率达35%左右［1］。其病因较为复杂,中医认为主要在于肝、脾、肾功能失调,肝郁、脾虚、肾亏从而导致气机不畅,气血瘀滞于脉络,颜面失于濡养所致［2］。补肾祛斑颗粒系解放军第323医院科研用药，临床用于治疗肾虚血瘀型黄褐斑，具有补肾养血，化瘀祛斑功效。本实验通过用补肾祛斑颗粒给小鼠灌胃,观察最大用药量,从而探讨补肾祛斑颗粒对小鼠的急性毒性作用。
1 材料与方法
1.1 受试药物及配置 补肾祛斑颗粒由解放军第323医院提供（科研用药），6 g/袋（含生药8.9 g/袋）。临床患者拟用量：每日服3次，每次1袋。人体重按60 kg计算，每公斤体重服药量为26.7 g生药/（人·d），即0.445 g生药/kg。实验时将药粉用自来水作溶剂，配成59.4%浓度。
1.2 实验动物 ICR品系小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，由西安交通大学医学实验动物中心提供，合格证：陕医动字第08-004号，实验前饲养1周，选择行为活动、饮食、精神状况正常的小鼠进行实验。小鼠分性别饲养于实验室内。室温20 ℃～26 ℃，相对湿度40%～70%，自然光源，排风扇通风2次/d，每次0.5 h，雌雄分笼饲养，水（自来水）自由摄取，饲料为实验动物全价营养饲料，由西安交通大学医学实验动物中心提供。
1.3 实验方法
1.3.1 预实验 取ICR小鼠10只，体重18～22 g，给药前禁食12 h，以59.4%浓度按0.4 ml/10 g体重24 h内灌胃给药1次，给药后观察小鼠一般情况。见小鼠活动自如，进食、饮水正常，大便呈湿润颗粒状，10只小鼠72 h内无一只死亡，也无明显中毒反应，提示本品难以测出LD50，故选择最大给药量实验。
1.3.2 最大给药量实验［3］ 取小鼠40只，雌雄各半，体重18～22 g，随机分为空白对照组和给药组。两组小鼠在灌胃给药前均先禁食12 h，空白对照组以0.4 ml/10 g体重灌胃给予自来水，给药组按照0.4 ml/10 g体重以59.4%浓度的补肾祛斑颗粒混悬液24 h内灌胃给药3次，连续观察1周。详细观察记录两组小鼠行为活动、状态、饮食、大便、小便、毛色、分泌物及死亡等情况。
1.4 统计学方法 数据用SPSS 11.0统计软件进行单因素方差分析。
2 结果
2.1 一般情况 灌胃给药后两组小鼠的外观体征未见异常，活动自如，进食、饮水、粪便均正常，皮毛光洁，口、鼻、眼及肛门清洁无分泌物，见表1。表1 补肾祛斑颗粒最大给药量实验小鼠反应情况注：-代表正常
2.2 体重变化情况 灌胃给药7天，体重增加，给药组给药前体重为（20.37±0.51）g，空白对照组体重为（20.35±0.62）g，第7天体重，给药组为（24.73±1.31）g，空白对照组为（24.36±1.19）g,见表2。表2 补肾祛斑颗粒最大给药量对小鼠体重影响统计由表2可见，空白组和给药组两组体重进行比较，P>0.05，差异均无统计学意义。
2.3 主要脏器解剖肉眼观察 进行实验的40只小鼠全部存活，无明显中毒反应。解剖所见：胸腔、腹腔未见异常液体，肠管未见胀气，心、肝、脾、肺、肾、脑等重要脏器未见颜色、形态异常，没有出血点或其他病理改变，胃黏膜颜色红润，无出血点或溃疡，尸检无异常。
3 讨论
补肾祛斑颗粒由枸杞子、菟丝子、覆盆子、补骨脂、当归、白芍、川芎、蒲黄、地鳖虫等药物组成，方中枸杞子、菟丝子补肾气益精血，补而不腻为君药，《本草纲目》曰:“枸杞,补肾生精,养肝,去疲劳,易颜色。变白,明目安神,令人长寿。”长期临床实践证实枸杞子有滋补肝肾,益面色,长肌肉,坚筋骨之功效［4］。《本经》云:“菟丝子气味辛平,无毒,主续绝伤,补不足,益气力、肥健人,汁去面黑干……”经临床验证,菟丝子除具有补肝肾,益精髓功效外,尚有宣通百脉,柔润肌肤消斑之功［5］。当归、白芍、川芎补血活血，补而不滞为臣药，佐以覆盆子、补骨脂、生蒲黄、地鳖虫益肾、通瘀、行血消斑。诸药合用，共奏补肾益精，养血活血，化瘀祛斑功效，达到改善面部微循环、促进新陈代谢、消褪色斑的作用。临床观察表明，补肾祛斑颗粒治疗肾虚血瘀型黄褐斑疗效良好，且在治疗过程中未见不良反应。本研究显示：补肾祛斑颗粒给ICR品系小鼠灌胃未测出LD50，其最大给药量为105.554 g生药/kg体重，约为临床患者拟用剂量的237倍。说明该药无明显毒理反应,是安全可靠的。
【参考文献】
1 黄冠宇,王旭.黄褐斑中医药临床研究述评.中医药学刊,2006,24（7）：1289-1290.
2 张海燕,张理平.复方中药治疗黄褐斑作用机制研究.中医研究,2005,18（11）:60-62.
3 中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南.北京：人民卫生出版社，1994，203.
4 迟雁.枸杞子的美容保健作用研究.长春中医药大学学报,2006,22（3）:58.
5 邓永健.菟丝子治疗黄褐斑.中医杂志, 2000, 41（10）: 587.
作者单位：710054 陕西西安，解放军第323医院妇产科