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【摘要】 目的 探讨尿液检测的最佳模式。方法 通过对2 096例尿液样本分别采用尿干化学、UF-100、Diasys联合检测。结果 Diasys镜检站、UF-100尿流式细胞分析法及Dirui H-500干化学分析法阳性率分别为:红细胞阳性率11.12%(233/2 096)、19.66%(412/2 096)、17.75%(372/2 096);白细胞阳性率分别为14.59%(306/2 096)、17.89%(375/2 096)、12.83%(269/2 096);同Diasys结果比较,红细胞检测:UF-100尿细胞分析法符合率91.36%(1 915/2 096)、假阳性率8.59%(180/2 096)、假阴性率0.05%(1/2 096);Dirui H-500干化学分析法符合率91.17%(1 911/2 096)、假阳性率7.73%(162/2 096)、假阴性率1.09%(23/2 096)。白细胞检测:UF-100尿细胞分析法符合率96.61%(2 025/2 096)、假阳性率3.34%(70/2 096)、假阴性率0.05%(1/2 096);Dirui H-500干化学分析法符合率93.65%(1 963/2 096)、假阳性率2.29%(48/2 096)、假阴性率4.06%(48/2 096)。UF-100假阳性率较高,假阴性较低,干化学法假阳性、假阴性均较高。结论 可将干化学和尿流式细胞两者分析均未显示异常发现作为镜检的筛选条件,有异常发现者进一步通过Diasys进行确认和纠正。尿干化学、尿流式细胞分析、尿液显微镜检查联合检测是尿液分析的最佳分析模式,在提高尿液检测速度的同时也保证了尿液检测的质量。
【关键词】 尿液干化学分析;尿流式细胞分析;尿液显微镜检查
Analysis and exploration of RBC and WBC determined by urine dry-chemical method,UF-100 urine flow cytometer and Diasys urinary sediment workstation
LI Hong-yan,WANG Xiao-wei,WU Bai-ping.Hunan Province Tumour Hospital,Changsha 410006,China
[Abstract] Objective To explore the best model in urine testing.Methods 2 096 urine samples were examined with urine dry-chemical method,UF-100 urine flow cytometer and Diasys urinary sediment workstation.Results The positive rates of Diasys microscopic examination,UF-100 urine flow cytometer method and Dirui H-500 dry-chemical method were:the positive rate of RBC in urine was 11.12%(233/2 096),19.66%(412/2 096),17.75%(372/2 096);the positive rate of leukocyte was 14.59%(306/2 096),17.89%(375/2 096),12.83%(269/2 096).Compared with the result of Diasys,the coincidence rate of UF-100 urine flow cytometer method was 91.36%(1 915/2 096),the false-positive rate was 8.59%(180/2 096),the false-negative rate was 0.05%(1/2 096);the coincidence rate of Dirui H-500 dry-chemical method was 91.17%(1 911/2 096),the false-positive rate was 7.73%(162/2 096),the false -negative rate was 1.09%(23/2 096)in RBC detection.Compared with the result of Diasys,the coincidence rate of UF-100 urine flow cytometer method was 96.61%(2 025/2 096),the false-positive rate was 3.34%(70/2 096),the false-negative rate was 0.05%(1/2 096);the coincidence rate of Dirui H-500 dry-chemical method was 93.65%(1 963/2 096),the false-positive rate was 2.29%(48/2 096),the false-negative rate was 4.06%(48/2 096)in leukocyte detection.The false-positive rate of UF-100 was higher and the false-negative rate was lower,when the false-positive rate and the false-negative rate of dry-chemistry method were both higher.Conclusion We can select dry-chemical method and flow cytometer analysis as the screening conditions of microscopy.The abnormal will be confirmed and corrected by Diasys urinary sediment workstation further.The combined detection of Urine dry-chemical method,urine flow cytometer analysis and urine microscopy is the best model in urine analysis which ensures the quality as well as improves the speed in urine testing.
[Key words] urine dry-chemical analysis;urine flow cytometer analysis;urine microscopic examination
尿液分析是评估健康、疾病状态的一种最常用的检测项目,目前临床上主要采用干化学法、尿流式细胞分析法及尿显微镜检分析法,三种方法各有优缺点;我们采用Dirui H-500、UF-100、Diasys三者联合模式检测尿液红、白细胞,并对此进行分析。
1 材料与方法
1.1 样本来源 2 096份住院患者的当天清洁中段晨尿。
1.2 仪器和试剂 长春迪瑞Dirui H-500尿液干化学分析仪及Uristik H10-Ⅱ尿液分析试纸条和质控物,日本Sysmex公司UF-100尿流式细胞分析仪及配套试剂和质控物,美国Diasys尿液镜检工作站。
1.3 方法 UF-100尿流式细胞分析仪和Dirui H-500尿液干化学分析仪每天用质控物进行质控,所有患者的尿液检测均分别采用尿干化学、尿流式细胞分析(UF-100)、尿液显微镜检查(Diasys)3种方法检测,尿液均不离心[1]。本研究所有操作均限于同一熟练技术人员操作,UF-100其部分参考值范围参照马俊龙等[2]研究设置,男:RBC 0~12/μl,WBC 0~12/μl;女:RBC 0~24/μl,WBC 0~24/μl;Diasys其部分参考值范围参照丛玉隆等[3]研究设置,男:RBC 0~4.5/μl,WBC 0~6/μl;女: RBC 0~7/μl,WBC 0~14/μl。
2 结果
2.1 对2 096份尿液样本同时用Dirui H-500、UF-100、Diasys三种方法平行检测结果 见表1。表1 2 096份尿液样本用Dirui H-500﹑UF-100﹑Diasys三种方法平行检测结果比较
2.2 三法阳性率比较 Diasys镜检站、UF-100尿细胞分析法及Dirui H-500干化学分析法阳性率分别为:红细胞阳性率为11.12%(233/2 096)、19.66%(412/2 096)、17.75%(372/2 096),三种方法红细胞总的阳性率为27.43%(575/2 096);白细胞阳性率为14.59%(306/2 096)、17.89%(375/2 096)、12.83%(269/2 096),三种方法白细胞总的阳性率为20.23%(424/2 096)。阳性率:指阳性样本占总样本的比率。
2.3 同Diasys结果比较 红细胞检测:UF-100尿细胞分析法符合率91.36%(1 915/2 096)、假阳性率8.59%(180/2 096)、假阴性率0.05%(1/2 096);Dirui H-500干化学分析法符合率91.17%(1 911/2 096)、假阳性率7.73%(162/2 096)、假阴性率1.09%(23/2 096)。白细胞检测:UF-100尿细胞分析法符合率96.61%(2 025/2 096)、假阳性率3.34%(70/2 096)、假阴性率0.05%(1/2 096);Dirui H-500干化学分析法符合率93.65%(1 963/2 096)、假阳性率2.29%(48/2 096)、假阴性率4.06%(48/2 096)。符合率:指相同项目不同方法均为异常或均为正常的样本比率之和。
2.4 干化学及尿流式细胞分析对红、白细胞检测的假阳性、假阴性的Diasys镜检影响因素的情况 表2、表3。 表2 干化学及尿流式细胞分析对红细胞检测的差异及Diasys镜检影响因素情况 表3 干化学及尿流式细胞分析对白细胞检测的差异及Diasys镜检因素情况
3 讨论
目前应用于临床尿液分析的方式主要有干化学法、尿流式细胞分析法及尿显微镜检法,由于各实验室之间的各种原因,尿液分析模式多种多样。为此,不合理的分析模式影响了尿液分析的质量,这样将影响临床医生对尿液检测报告的分析和判断。事实上,目前所采用的三种检测方法各有优缺点。尿液干化学分析法尽管简便、快速,便于自动化分析,但由于方法学上的局限,其主要用于筛选,假阳性和假阴性率均较高。尿流式细胞分析是根据被测物的电阻、对光散射率的变化,结合荧光染色等技术,间接分析尿中的有形成分。具有快速、高效的特点,能较为准确地提供有形成分的定量数据,但由于尿液中有形成分的大小、内容物并非一致,各种病理情况、渗透压改变均可导致有形成分产生变化,因此,尿流式细胞分析仪在临床上可作为一种技术一致、可比性强的筛选方法。尿显微镜检是一种普及并已得到公认的检测方法,由于方法学的检测局限,其检测速度慢,况且显微镜检查的质量控制难以进行。
UF-100尿流式细胞分析仪检测尿液红、白细胞中最突出的问题是假阳性,结晶、酵母样菌、细菌、上皮细胞、杂质等有形成分是影响红细胞检测的主要因素,所占比例分别为38.89%、7.78%、8.33%、9.44%、12.22%;所占总比例为77.78%,剩下的22.22%不排除红细胞及红细胞碎片的存在而镜检未发现。结晶、细菌、上皮细胞、杂质等有形成分是影响白细胞检测的主要因素,所占比例分别为34.29%、15.71%、32.86%、14.29%;所占总比例为97.04%。UF-100检测尿液红、白细胞中的假阴性率很低,基本上可以忽略不考虑。因结晶、细菌、上皮细胞等有形成分所引起的UF-100的假阳性,Diasys尿液镜检工作站能给予纠正。
干化学法检测尿液红、白细胞原理是化学反应,分别检测血红蛋白和中性粒细胞中的酯酶,有些物质和药物均可引起假阳性、假阴性;淋巴细胞、单核细胞因不存在中性粒细胞酯酶而反应,出现假阴性,Dirui H-500干化学法检测尿液红、白细胞假阳性(7.73%、2.29%)、假阴性(1.09%、4.06%)均较高。通过分析我们发现尿液中的有形成分对干化学检测尿液红、白细胞的假阳性(22.22%、33.33%)、假阴性(21.74%、2.36%)影响比UF-100小得多,通过Diasys尿液镜检工作站对尿液细胞成分的直接观察和计数,对干化学法检测假阳性和假阴性进行纠正。
干化学和尿流式细胞两者分析均未显示异常:红细胞检测为74.81%(1 568/2 096),白细胞检测为79.10%(1 658/2 096),进一步Diasys镜检分析发现尿液红、白细胞无异常;因此,我们可将干化学和尿流式细胞两者分析均未显示异常发现作为镜检的筛选条件,减少工作量。
干化学分析法和尿流式细胞分析法具有快速、高效、自动化的特点,尿液分析样本先通过两者的筛选,两者均未显示异常发现的样本免除镜检,有异常发现者进一步通过Diasys尿液镜检工作站对尿液细胞成分进行直接观察和计数,对干化学分析法和尿流式细胞分析法的异常发现进行确认和纠正,这样,在提高尿液检测速度的同时也保证了尿液检测的质量;因此,尿干化学分析、尿流式细胞分析和尿显微镜检三种方法的结合是目前尿液检测的最佳分析模式[4]。
【参考文献】
1 马俊龙,陆玉静,黎晓晖,等.尿液红、白细胞定量不同方法的探讨.临床检验杂志,2006,24(5):348-350.
2 马俊龙,丛玉隆.菌尿对尿液分析仪测定红细胞的影响.中华检验医学杂志,1999,22(1):12-14.
3 丛玉隆,马俊龙,岳秀玲,等.中国健康人尿液显微镜检测法有形成分结果调查.临床检验杂志,2006,24(2):81-84.
4 姜傥,张式鸿,胡伟,等.一种新型尿液检测模式的探讨及其软件研究.中华检验医学杂志,2006,29(7):608-611.
作者单位:湖南长沙,湖南省肿瘤医院检验科