中药外敷对家鸡骨折愈合的影响

【摘要】  目的 探讨中药外敷对动物骨干骨折愈合的作用，为临床提高骨折康复质量提供理论依据。方法 普通家鸡60只，6个月龄，重约2kg，随机分为三组，分别为实验组1、实验组2和对照组, 每组20只。同等条件下制造双侧肱骨中段骨折动物模型，造模后实验组1和实验组2分别外敷不同的中药，对照组则不敷中药，三组术后均常规喂养，分别于造模后7d、14d、21d、28d和35d取双侧肱骨中段骨组织，脱钙后行组织切片常规HE染色法观察软骨细胞、成骨细胞及骨小梁的生长情况，以评价中药外敷对家鸡骨折愈合的影响。结果 实验组1和实验组2在5个时间点的组织切片下观察，成骨细胞及骨小梁的生长均明显优于对照组。结论 中药外敷可以促进家鸡的骨折愈合。

【关键词】  家鸡;软骨细胞;成骨细胞;骨小梁;骨折愈合;中药外敷

　 Objective To investigate the effects of traditional Chinese drugs on the shaft fracture healing in animals, and provide the theory supports for improving the clinical quality of rehabilitation after surgery. Methods Sixty 6-month-old normal gallus (body weight: 2kg) divided into three groups: Group one,Group two and control group for 20 gallus per group randomly. The middle shaft of humerus was osteotomized bilaterally in same conditions. Group one and Group two were applied with different traditional Chinese drugs on the surface of skin outside the fracture site, while no traditional Chinese drugs on control group. All the animals were feeded normally after surgery. The animals were sacrificed at 7, 14, 21, 28 and 35 days postoperatively. The middle shafts of humerus were harvested for sections and stained with hematoxylin-eosin. The situation of growth of chondrocytes, osteoblasts and bone small beam were observed to evaluate the effects of traditional Chinese drugs on fracture healing. Results At all the time point after surgery, the number of chondrocyte and osteoblast and bone small beam area at the fracture site was significantly higher in the Group one and Group two than in the control group. Conclusion The applyment of traditional Chinese drugs can promote the fracture healing in gallus.

　　[Key words] Gallus gallus domestica; chondrocyte; osteoblast; bone trabecula; union of fracture; traditional Chinese drug applyment

　　骨折愈合是一个复杂而高度有序的生物学修复过程[1]，许多因素如血液循环状态、组织细胞代谢等多种因素均可影响骨折愈合[2]。西方医学认为骨折愈合缓慢，只有延长固定时间，方可达到良好的愈合效果，而否认药物有促骨折愈合的作用。中医学则很早就认为骨折的治疗必须从整体出发，通过辨证施治，可以促进骨折愈合[3]。中医理论认为骨折初期，瘀血留滞，瘀血不去，新血不生。清·陈士铎在《辨证录》中指出：“血不活则瘀不能去，瘀不去则骨不连接”。所以中医理论治疗骨折的首选方法是活血化瘀，使瘀血祛除，才能加速骨折愈合。中药用于骨折治疗在我国有着悠久的历史，并且积累了丰富的临床经验，总结出了很多有效的方药。本文采用的临床沿用多年的经验方以活血化瘀，改善局部血液循环为其主要药理特征，具有加快骨折愈合的作用。本项研究旨在为中药促进骨折愈合提供动物实验依据，通过组织切片观察软骨细胞、成骨细胞及骨小梁的生长情况，以探讨中药外敷对家鸡骨折愈合的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物

　　出生6个月的家鸡，均选自养鸡场，体重约2kg左右，雌雄不限。

　　1.2 实验的接骨中药

　　实验组1(红花、乳香、没药、马钱子、自然铜、血竭、苏木、生川乌、 三七等量粉碎待用)。实验组2(骨碎补、血竭、当归、硼砂、生大黄、芙蓉叶、乳香、没药、川断、自然铜、地鳖虫等量粉碎待用)。

　　1.3 实验方法

　　先将每只鸡左右翅膀上的鸡毛剃净，随后用同样的暴力造成家鸡双肱骨中部骨折，每组20只，分为三组，分别在实验组1和实验组2的鸡肱骨处外敷中药，然后用小夹板固定骨折端以制动，其中对照组的鸡肱骨打断后不敷中药，仅以小夹板固定制动。随后，每天更换1次中药，三组均常规喂饲料。

　　1.4 骨折愈合各期病理组织取材

　　骨折后7d、14d、21d、28d、35d从每组各取4只鸡，宰杀后取双侧肱骨送做病理组织切片。先用甲酸和福尔马林溶液整体脱钙3天，然后取骨折断端最大片用石蜡切片制作，常规的HE染色，随后在400倍及200倍的显微镜下观察软骨细胞、成骨细胞及骨小梁的生长情况。

　　2 结果

　　7d：见图1。镜下见到的基本上还都有血肿组织，软骨细胞出现，某些组骨小梁开始分化生长。实验组1：软骨细胞增生活跃，可见间充质样成分形成，骨小梁生长较好，可见成骨细胞和破骨细胞。实验组2：软骨细胞部分退化,成骨细胞增生,可见少量破骨细胞,分化中等成熟骨小梁。对照组：见陈旧性的血肿，纤维组织增生,间充质样成分形成，软骨细胞增生，见少量骨小梁形成，成骨细胞较少见。比较血肿的多少，软骨细胞的分化和骨小梁的生长情况：实验组2>实验组1>对照组。

　　14d：见图2。镜下见到的血肿组织开始减少，软骨细胞越来越多，转化为骨样基质，随后形成骨小梁。实验组1：可见到小片的血肿，骨小梁分化相对成熟,成骨细胞生长明显,软骨细胞小部分退化,破骨细胞可见。实验组2：骨髓腔内可见血肿，软骨细胞退变不明显，骨小梁分化中等成熟，成骨细胞增生，可见破骨细胞。对照组：骨髓腔内可见片状血肿，中等量软骨细胞生长，中间可见纤维组织，有骨样基质形成，局部地区尚无骨小梁形成。比较软骨细胞和成骨细胞数量及骨小梁的生长情况: 实验组1>实验组2>对照组。

　　21d：见图3。镜下见到切片血肿已吸收,软骨细胞开始减少，成骨细胞生长越来越明显，骨小梁分化逐渐成熟。实验组1：未见到血肿组织，可见少量退化的软骨细胞，骨小梁分化成熟，成骨细胞明显。实验组2：未见血肿组织，软骨细胞退变较明显，骨小梁形成较成熟，仍有残留钙化灶，成骨细胞生长明显，破骨细胞可见。对照组：未见到血肿组织，多呈骨样基质和骨小梁形成，软骨细胞退变，成骨细胞生长明显，有部分骨小梁生长。比较软骨细胞、成骨细胞数量、骨小梁的生长情况：实验组1>实验组2>对照组。

　　28d：见图4。镜下见到软骨细胞越来越少，成骨细胞从增多到减少，骨小梁分化成熟，部分切片有骨髓形成。实验组1：软骨细胞退化较明显，有成熟的骨小梁和骨髓组织，成骨细胞不明显，破骨细胞少见。实验组2：软骨细胞基本退化，骨小梁分化较成熟，成骨细胞增生尚明显，可见骨髓形成。对照组：局部仍可见增生的软骨细胞和骨样基质，其余骨小梁分化成熟，成骨细胞生长明显，骨小梁内软骨细胞退变，局部可见骨髓形成。比较软骨细胞、成骨细胞数量、骨小梁生长排列情况：实验组1>实验组2>对照组。

　　35d：见图5。软骨细胞极少见，骨小梁开始排列规则，同时开始有骨髓形成。实验组1：成熟的骨组织。实验组2：骨小梁开始塑形，可见骨髓。对照组：分化比较成熟的骨小梁，可见血窦(骨髓形成前期)，仍可见内残留退变的软骨细胞。比较骨小梁生长排列及骨髓的生长情况：实验组1>实验组2>对照组。

　　从上面5个阶段的病理切片中可以看出，应用中药外敷的家鸡在骨折之后，对于骨折之后的血肿吸收、软骨细胞的产生、成骨细胞及破骨细胞的产生、骨小梁的生长排列明显要优于对照组。

　　3 讨论

　　祖国医学认为骨折后脉络必受损伤,而致血淤积不散,形成局部肿痛。采用活血化瘀理论,行气活血,通脉散瘀,消肿止痛,以利于骨折治疗[4] 。活血化瘀、消肿止痛对损伤组织的作用机理:早期可控制和减缓炎症反应,增加吸收,从而减少充血水肿,并修复组织及血管壁,降低致痛物质浓度;在晚期,可使毛细血管扩张,减轻毛细血管静脉段的压力,减少白细胞及其他有形成分的渗出[5]。因此,本研究按活血化瘀(乳香、没药、红花、血竭、三七、当归),清热消肿(芙蓉叶、硼砂、生大黄)，止痛(苏木、马钱子、生川乌) 和接骨续筋(川断、骨碎补、自然铜、地鳖虫) 之原则组方,进行骨折后外敷用药,观察到中药对骨折之后的血肿吸收、软骨细胞的产生、成骨细胞及破骨细胞的产生、骨小梁的生长排列。中药复方接骨方在古方的基础上根据多年的临床经验组合而成。现代药理研究证实，自然铜含骨折愈合所需的钙、磷、铜、铁等无机盐离子，可诱导成纤维细胞转变成为成骨细胞，促进骨痂生长，还能促进骨髓本身及周围血液中红细胞和血色素的增生，加快骨痂胶原合成，促进钙、磷沉积，而加速骨折愈合[6]。当归等能改善组织微循环，促进损伤血管修复，增加血容量;骨碎补不但能促进胶原基因的生成，而且能明显地促进钙、磷的沉积，有助于成骨作用[7]。

　　影响骨折愈合最根本的因素是局部的血液供应。一切影响血液供应的因素都会影响骨折愈合[8]。本项研究所用的中药组方以活血化瘀，消肿止痛，接骨续筋为其主要药理特征。良好的血液供应可以在骨折早期为骨折局部带来较多的与骨折愈合有关的物质，调动全身因素，完成骨折修复。

　　(本文图片见附页)

【参考文献】
  　1 宋亚问，谢利明，崔全起，等.针次取穴与骨折愈合疗效关系粗探.中国中医骨伤科杂志，2005,13(1)：12-15.

　　2 王亦璁，孟继懋，郭子恒.骨与关节损伤.北京：人民卫生出版社，1990：1441-1443.

　　3 黎君若，段庚辰，罗运通，等.中药促进骨折愈合的临床研究.中国中西医结合杂志，1985,(5)：402-404.

　　4 顾云伍,韩慧,尚天裕,等.中西医结合治疗骨折研究进展.中国骨伤,1993,6(1):51.

　　5 侯伟,马斌,胡兴山. 损伤液化膜的研制及动物实验研究.中国中医骨伤科,1995,3(5):11.

　　6 王智兴，过棒辅.自然铜在骨折愈合过程中对总胶原、不溶性胶原、钙、磷和生物力学影响.中华骨科杂志,1986,6(4)：305.

　　7 王炳南，魏玉玲，梁克玉.接骨方对骨折愈合过程中I型胶原mRNA表达的影响的实验研究.湖北中医学院学报,1999,1(2)：3.

　　8 朱锦宇，黄耀添.神经系统对骨折愈合影响研究进展.中华骨科杂志，1998，18(9)：565-567.