梅毒检测方法在疾病预防工作中的运用

【摘要】  目的 探讨梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)三种检测方法在梅毒预防工作中的有效运用。方法 使用TP-ELISA、TRUST对调查对象男-男同性(MSM)特殊人群共259人进行初筛，再用TPPA法对89份梅毒检测呈阳性的血清标本进行确认试验。选用两家的TRUST试剂进行比较，进行结果差异性比较。结果 TP-ELISA、TRUST和TPPA法的阳性率分别是100%、25.48%(另一厂家28.6%)、100%，TP-ELISA、TRUST和确诊试验的符合率分别是100%、74.2%(另一厂家83.1%)。结论 最佳方案是先用梅毒酶联免疫吸附试验和甲苯胺红不加热血清试验进行筛选，再做确认试验，具体情况可结合调查目的和检测条件进行选择。

【关键词】  梅毒血清学诊断;梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA);甲苯胺红不加热血清试验(TRUST);螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)

　　梅毒是一种性接触传染病，现在蔓延程度已非常严峻，对疾控机构来说，了解梅毒的流行状况和对重点人群的干预，是性病防控的一项重要工作。2010年5—6月，本区疾控中心参与了中国全球基金艾滋病项目，对男-男同性(MSM)这一人群进行HIV、梅毒、丙肝项目的调查检测。为了探索在人群调查中梅毒检测方法的运用上如何做到有效可行，为性病的防控工作提供科学的依据，笔者结合该项目对梅毒的检测方法做进一步的研究分析，现报告如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　这次自愿来进行的MSM人员共有259人，年龄20～70岁，以30～50岁青壮年为主。由本疾病预防控制中心组织对这些人员采血，按该基金项目统一工作要求进行。

　　1.2 试剂与仪器

　　该基金项目要求用规定的试剂TRUST(北京万泰试剂有限公司)、TP-ELISA试剂盒(珠海丽珠试剂有限公司)同时进行筛查。结果同时上报。为了进一步了解，笔者增加了另一厂家的TRUST试剂和确认试剂。另一厂家TRUST试剂为上海荣盛生物药业有限公司、TPPA试剂盒是日本富士瑞必欧株式会社提供。TP-ELISA使用仪器：Thermo MULTISKAN ASCENT全自动酶联免疫分析仪。TRUST使用仪器：江苏省姜堰市天力医疗器械厂TL2000B型梅毒自动旋转仪。

　　1.3 方法

　　按照试剂盒的说明书操作方法。按以下步骤进行。(1)采用TP-ELISA、TRUST(北京万泰)对259份样本进行筛查(基金项目统一要求)。(2)对筛查阳性标本再TPPA种方法进行确认试验。(3)用另一厂家TRUST试剂(上海荣盛)对进行TP-ELISA结果阳性标本进行试验。

　　2 结果

　　按试剂盒说明书操作和判断，结果汇总如下。(1)对259份血清标本，TRUST(北京万泰)筛查结果:阳性66份，阳性率为25.5%; 采用TP-ELISA方法，阳性89份，阳性率为34.4%。66份TRUST阳性标本TP-ELISA方法结果全部阳性。(2)对89份初筛阳性的标本TPPP法做确认试验为最后结果，检测结果89份阳性。(3)上海荣盛生物药业有限公司的TRUST试剂检测结果，标本259份，阳性结果74份，阳性率为28.6%。74份标本TP-ELISA方法结果全部阳性。TPPP法确证试验结果全部阳性。(4)比较两个厂家试剂检测结果，χ2 =2.1412，按α=0.05水准，两个厂家试剂差异无显著性。(表1、表2、表3)表1 不同方法检测结果表2 不同厂家TRUST试剂的检测结果表3 不同方法和确诊试验结果符合性比较

　　3 讨论

　　目前用于梅毒血清学的检验方法主要有：非梅毒螺旋体血清试验即甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)，TP-ELISA检测梅毒特异性抗体，TPPA用于梅毒的确认实验，不同的检测方法都有其特殊的应用价值，在临床上TRUST方法常用筛选及判断治疗的效果，在疾控方面，由于TRUST方法硬件要求低、操作简单，较适用于流行病学调查的梅毒筛查方法，也更适合广泛的基层医疗和保健单位使用。但TRUST方法阳性率明显偏低，尤其是对早期和治疗期梅毒可呈阴性反应。结果观察易受到室温和操作技术等影响，结果的判断主观性较强，肉眼观察很细颗粒时，弱阳性和阴性较难界定，虽然不同厂家的试剂结果有差异，但总的来说阳性率还是明显偏低。这次TP-ELISA和TPPAT符合率100%，但限于样本量较小，大多资料表明TP-ELISA和TPPAT符合率较高[1]。该方法试剂成本低，原始数据易于保存;TP-ELISA阳性只能说明正处于感染期或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，确定传染性的大小。TPPA是一种高特异性、敏感性较好的梅毒血清学诊断检测方法。TPPA的灵敏度和特异性比前两种方法都高，是临床常用的梅毒确认试验，也可以进行效果测定，但试剂成本高，操作繁琐，耗时较长，不适合大量标本的筛查，适合于前两种方法测定阳性后的确认试验。综上所述，在疾病预防控制机构，可以根据工作目的选择梅毒的检测方法，有条件的检测机构，选择TRUST和TP-ELISA方法初筛，再用TPPA方法确认。TRUS(+)、TP-ELISA(+)、TPPA(+)并且TRUS滴度高的对象是传染性比较强的病人，是重点防控对象。为了掌握人群中梅毒螺旋体感染状况，可选用TP-ELISA;如果基础医疗机构进行基层的人群普查，限于仪器设备的缺乏，可进行TRUST方法的筛选，所检阳性结果可作为梅毒的重点管理对象。

【参考文献】
  　1 邹黎. 梅毒血清学试验几种检测方法比较.实用医技杂志，2006,13(21)：3788.