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酶免法检测HBsAg假阳性的原因分析

来源:INTERNET
摘要:但是,在实际操作中经常有一些因素干扰检测,而导致测定结果出现假阳性。为慎重起见再将阳性标本离心复检,HBsAg结果全为阴性,现报告如下。1仪器与试剂TECANSPECTRR全自动酶联免疫检测仪,TECAN自动酶标洗板机。北京万泰生物药业有限公司生产的乙肝表面抗原(HBsAg)酶联免疫试剂盒。...

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  ELISA即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。此试验以灵敏度较高,特异性较好的特点在临床上得到了广泛应用。但是,在实际操作中经常有一些因素干扰检测,而导致测定结果出现假阳性。为慎重起见再将阳性标本离心复检,HBsAg结果全为阴性,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 TECAN SPECTRR全自动酶联免疫检测仪,TECAN自动酶标洗板机。北京万泰生物药业有限公司生产的乙肝表面抗原(HBsAg)酶联免疫试剂盒。

1.2 检测对象 来自门诊健康查体人群79例,年龄25~68岁,男50例,女29例。

1.3 检测方法 受检者早晨空腹,从肘静脉抽血2ml加入一次性塑料试管,室温放置,于采血后0.5h将标本3000rpm离心10min后分离血清。操作前将试剂在室温下平衡30~60min,然后严格按照试剂盒使用说明书操作。

2 结果

79例标本示HBsAg阳性10例,为慎重起见对10例阳性标本进行复检。复检之前,我们先对10例标本进行检查,它们中有溶血的3例,有离心不彻底引起血清浑浊的3例,有肉眼可见纤维蛋白块的4例。我们将3例溶血标本重新抽血放37℃水浴箱2h,其余7例标本也放37℃水浴箱2h,然后3000rpm离心10min,重新检测,经过复检HBsAg结果全为阴性。

3 讨论

我们充分认识到HBsAg假阳性率高,重复性不好,除了要检查仪器性能及试剂质量问题外,血液标本采集与处理也是一个不可忽视的因素。临床检验工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固即强行离心分离血清,此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果。为避免干扰作用,解决的办法最好是血液标本采集后放水浴箱,使其充分凝固再分离血清。另外由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白,以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,并干扰测定结果。为克服上述干扰作用,标本采集时必须注意避免溶血,对溶血标本应重新抽血。在实际工作中,除了检查仪器性能及选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,以严谨的工作作风检测每一份标本,并应采取相应措施排除干扰因素,从而为临床提供准确可靠的检测结果。

作者单位:250013山东省军区门诊部 

作者: 迟英欣 孙亚晶 王胜 2005-5-13
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