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【摘要】 目的 对抗-HIV（1/2）双抗原夹心法ELISA一步法与二步法试剂盒的检测情况进行比较分析，了解二种方法各自的优缺点，利于更合理的选择试剂。方法 对2组无偿献血者标本共32340份分别用2种不同厂家的抗HIV-（1/2）双抗原夹心法ELISA试剂盒进行检测，将检测可疑的标本120份统一用进口试剂进行检测，同时上送市疾控中心用蛋白印迹法进行确认;对确认阳性的2份强阳性及1份弱阳性标本进行倍比稀释后用5种试剂盒重复检测。结果5种厂家试剂中2种国产的一步法试剂盒特异性低于另2种国产的二步法试剂盒;2种国产一步法试剂盒在检测强阳性标本的原倍标本与稀释后标本时其OD值差异有显著性;2种国产的二步法试剂盒在检测弱阳性标本的原倍标本时其OD值明显低于一步法试剂盒，而且其检测结果OD值仅在临界值附近，在检测弱阳性标本的稀释后标本时其检出滴度明显低于一步法试剂盒。结论 国产一步法与二步法试剂盒在灵敏度和特异性上各有优势，进口试剂盒综合质量较好，血站在选择抗-HIV（1/2）试剂盒时应综合考虑以上因素，更好地保证血液质量。
关键词 抗-HIV 双抗原夹心 ELISA 一步法 二步法
为控制经输血传染HIV，卫生部要求用ELISA法对献血者进行抗-HIV检测，目前国内市场上的抗-HIV（1/2）双抗原夹心法试剂盒有二种:一步法和二步法。笔者在使用过程中发现国产一步法试剂盒假阳性率明显高于二步法试剂盒，而且一步法试剂盒在检测某些高滴度HIV抗体标本时存在严重的
钩状效应;国产二步法试剂盒在检测某些低浓度标本时存在检测OD值较低的现象，很容易造成漏检现象的发生;进口试剂盒检测各类标本均能保持良好的灵敏度和特异性。
1 资料与方法
1.1 样本 2002年1月～2003年12月广东省茂名市无偿献血者标本32340份，第一组13060份，第二组19280份，第三组为第一、二组检测得出的可疑标本共120份。
1.2 试剂 A、C是2种国产抗-HIV（1/2）双抗原夹心ELISA一步法试剂盒;B、D是2种国产抗-HIV（1/2）双抗原夹心ELISA二步法试剂盒;E是进口抗-HIV（1/2）双抗原夹心ELISA一步法试剂盒。上述试剂均通过批检并在有效期内使用并严格操作。
1.3 仪器 RSP100/8全自动加样仪（瑞士TECAN公司）;FAME24/20全自动酶免分析仪（瑞士哈美顿公司）。
1.4 方法 所有操作均严格按本站的SOP进行，每批实验均进行室内质控;所有可疑标本上送市疾控中心用蛋白印迹法进行确证。
2 结果
2.1 5种抗-HIV（1/2）双抗原夹心ELISA试剂盒检测情况 见表1。
2.2 2份强阳性标本稀释前后用5种试剂检测所得的OD值 见表2。
2.3 1份弱阳性标本在5种试剂中的检出滴度对比 见表3。
表1 5种抗-HIV（1/2）双抗原夹心ELISA试剂盒检测情况略
表2 2份强阳性标本稀释前后5种试剂检测的OD值对比略
表3 1份弱阳性标本在5种试剂中的检出滴度对比略
3 讨论
为了预防和控制HIV经输血传播，对献血者进行严格的HIV抗体检测是现行的必须且有效的手段，但当各家采供血机构面临众多的检测试剂时，如何合理的选择试剂，在 充分利用血液资源的同时能最大限度地保证血液质量，防止阳性血液的漏检，已成为大家关注的焦点问题。笔者通过总结分析发现，有些人认为只要是国家批准的、批检合格的试剂都可以使用，对于其它问题一概不用考虑的观点是不可取的。首先通过表1可以看出，国产一步法试剂盒A、C的假阳性率明显高于二步法B、D试剂盒;表2中，2份强阳性标本的原倍血清用国产一步法试剂盒检出的OD值明显低于其它三种试剂盒，而把强阳性标本稀释128倍后用A、C试剂盒重复检测的OD值与其它三种厂家结果相近，说明部分国产一步法试剂盒在检测强阳性标本时可能出现钩状效应，此结果与有关文献 ［1］ 报道一致;表3提示，进口试剂盒E检测弱阳性标本OD值较其它试剂高，国产一步法试剂盒A、C检测此标本OD值结果也明显高于二步法试剂盒B、D，二步法试剂盒D检测时出现漏检现象，二步法试剂盒B检出OD值仅处于临界值附近，如操作稍有不慎也极易造成漏检。综上所述，笔者认为，选择抗-HIV试剂盒时，一步法与二步法同时使用能起到互补作用，但由于国产一步法试剂盒假阳性率较高，如条件允许选择进口试剂与另一国产二步法的试剂盒检测血液，在保证血液质量的同时又能有效的节约血液资源。
参考文献
1 冯健亮，陆典瑞，李启辉.抗-HIV（1/2）ELISA一步法检测时应注意钩状效应.中国输血杂志，2003，16（4）:265-266.
作者单位:525000广东省茂名市中心血站