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1 材料与方法
1.1 标本 2000年1月～2004年5月间本院门诊体检人员的清晨空腹血液标本，共15028例。年龄为9～67岁。其中男9327例，女5701例。
1.2 试剂 上海科华公司的HBsAg酶免试剂盒。
1.3 仪器 美国产AWARENESS-2600酶标仪。
1.4 方法 按照试剂盒说明书进行操作，用酶标仪读取各孔OD值。将标本分为HBsAg阳性（OD≥0.2100）和可疑阳性（0.1050≤OD<0.2100）两类，每类又依据血清外观分为溶血与无溶血两组，每组标本留取血清至4℃冰箱保存，次日双孔复检，溶血标本重新采取无溶血血清，双孔复检。
2 结果
初检HBsAg阳性标本327例，其中无溶血标本282例，复检双孔均OD>0.1050;溶血标本45例，复检1例双孔OD<0.1050，经反复检测证实HBsAg为阴性。可疑阳性标本119例，其中无溶血标本77例，复检双孔OD≥0.1050的有12例，65例OD<0.1050，经χ 2 检验，P<0.005，差异有显著性;溶血标本42例，复检双孔均OD≥0.1050的有3例，39例OD<0.1050，经χ 2 检验，P<0.005，差异具有显著性。
3 讨论
ELISA法检测HBsAg具有简易、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好的特点，且不需要昂贵仪器，没有放射性污染，故被普遍采用。但是在检测过程中影响因素很多，如试剂、标本、操作等因素。标本溶血后，血清中的血红蛋白具有类似过氧化物酶的作用，此作用与酶结合物中的辣根过氧化物酶相同，并且能与包被抗体结合，洗涤时不易洗脱，与底物作用显色而呈假阳性。从以上结果可以得知，对可疑阳性标本进行双孔复检是非常必要的，它可以去除操作和标本因素的影响，如孔间相互污染，洗板不彻底，标本分离不完全，标本中含有干扰物质，标本溶血等。检测HBsAg的标本应单独送检，加样过程中每份标本更换一次吸头，杜 绝标本间的污染，同时，加标本或试剂时，滴头要靠近孔口，以防外溅，洗板时孔内液体不得外溢，避免反应孔间污染。目前，应用ELISA法检测HBsAg多采用一步法，它简化了步骤、缩短了反应时间，但也带来了假阴性的弊端，HBˉsAg浓度过高时，辣根过氧化物酶标记HBsAg被过量的HBˉsAg所饱和，不能与结合在包被抗HBs上的HBsAg结合而出现假阴性。因此，当HBsAg检测阳性，HBsAg检测为阴性时，应将血清标本稀释后，重新检测HBsAg。因HBsAg检测对上学、招工等影响重大，检验人员应严格遵守操作规程，加强责任意识，对可疑阳性标本应进行双孔复检。
作者单位:266071海军青岛疗养院检验科