复方丹参注射液在兔体内的药动学研究

　　【摘要】 目的  研究复方丹参注射液在兔体内的药动学。 方法  用RP-HPLC法定量测定兔血浆中丹参素的含量。健康新西兰兔禁食24h后，静注复方丹参注射液，测定不同时间丹参素的血药浓度。用PKSOLUTION药动学程序对血药浓度-时间数据进行拟合。 结果  大鼠静注复方丹参注射液后，丹参素的主要药动学参数为:t 1/2（β） =0.48h，β=1.45h -1 ，t 1/2（α） =0.07h，α=9.98h -1 ，AUC 0→∞ =199.33μg·ml -1 ·h -1 。 结论  大鼠静注复方丹参注射液后，丹参素在大鼠体内呈二室开放模型，进入体内迅速分布，代谢消除也较快。
     
     
　　Study of pharmacokinetics of complex Danshen injection in rat
     
　　Hong Xin，Mi Suiqing，Ye Shaomei，et al.
   
　　Institute of Clinical Pharmacology of Guangzhou University of TCM，Guangzhou510405.
   
　　【Abstract】 Objective To study the pharmacokinetics of Danshensu，a major ingredient in the complex Dan-shen injection，in rats.Methods The drug concentration in plasma was determined by RP-HPLC method.The data were processed with the software PKSOLUTION.Results The primary pharmacokinetics parameters were:t 1/2（β） =0.48h，β=1.45h -1 ，t 1/2（α） =0.07h，α=9.98h -1 ，AUC 0→∞ =199.33μg·ml -1 ·h -1 ，respectively in iv complex Dan-shen injection to the rats.Conclusion The Danshensu in rats is fitted to open two compartment model，and it is dis-tributed and eliminated quickly.
   
　　Key words complex Danshen injection Danshensu pharmacokinetics
      
　　复方丹参注射液由丹参和降香组成，临床上用于治疗心绞痛及心肌梗死等疾病。其中丹参中主要水溶性有效成分丹参素具有抗心肌缺血和改变冠状动脉血流量等药理作用 ［1］ ，已有丹参素单一成分在兔体内药动学研究的报道 ［1］ ，本课题组已建立了一个专一性强，灵敏、快速的测定血中丹参素的浓度的方法 ［2］ ，并对大鼠口服复方丹参滴丸后丹参素的体内过程进行了研究。为了探讨复方丹参制剂中主要有效成分丹参素经不同的给药途径后体内代谢过程的变化规律，本研究应用反相HPLC法测定了兔静注复方丹参注射液后丹参素的药动学参数，以探讨不同给药途径及不同组方的丹参制剂对丹参体内过程的影响。

　　1 材料与方法
    
　　1.1 药品与试剂 复方丹参注射液（三九药业集团雅安制药厂，）;丹参素对照品（上海医科大学提供）;内标对羟基苯甲酸（日本东京化成工业株式会社）;甲醇（色谱纯），冰醋酸，乙酸乙酯，盐酸均为分析纯。
   
　　1.2 主要仪器 美国Waters液相色谱仪（Wters Assoc，Mi-ford，MA，USA）;510输液泵，486紫外检测器，U6K进样阀，LXT-Ⅱ离心沉淀机（上海医用分析仪器厂）;SK-1快速混匀器（江苏医疗仪器厂）。
   
　　1.3 实验动物 新西兰兔，雄性，体重2～2.5kg，广东省医用实验动物中心提供。
   
　　1.4 血清中丹参素的测定方法 按本研究室自行建立的血中丹参素的HPLC法进行测定 ［2］ 。
   
　　1.5 给药方案与样品采集 雄性新西兰兔5只，体重2～2.5kg。按10ml/kg的剂量注射复方丹参注射液，分别于给药前和给药后5、10、20、30、45、60、90、120min取血3ml，离心后分离血清，存于-40℃冰箱中保存至分析。
   
　　1.6 统计学方法 药物动力学参数用PK Solution2.0软件进行拟合计算。

　　2 结果
    
　　2.1 血药浓度测定方法的评价
   
　　2.1.1 方法的专属性 用本法测定血清中的丹参素，血中的内源性物质不干扰丹参素和内标的测定，色谱图见图1。

　　2.1.2 线性范围 丹参素的线性范围为0.5～16.0mg/L，回归方程为Y=0.0506X+1.886，r=0.9996。
   
　　2.1.3 回收率和精密度试验 丹参素高、中、低3个浓度的平均回收率分别为93.1%、99.5%、101.7%。本法的日内精密度RSD<6%（n=5），日间精密度RSD<7%（n=5）。

　　2.2 药物动力学研究 兔静注复方丹参注射液后，丹参素的平均血药浓度-时间曲线见图2。用PK Solution2.0软件对丹参素在兔体内的血药浓度曲线进行拟合，结果显示兔静注复方丹参注射液后丹参素在体内的药物动力学模型可用二房室模型来描述，药物动力学参数:t 1/2（β） =0.48h，β=1.45h -1 ，t 1/2（α） =0.07h，α=9.98h -1 ，AUC 0→∞ =199.33μg·ml -1 ·h -1 。
    
　　图1 兔血清样品的高效液相色谱图（略）
   
　　图2 兔静注复方丹参注射液后丹参素的药-时曲线（略）
　　
　　3 讨论
    
　　本研究采用HPLC法对兔静注复方丹参注射液后丹参素的血药浓度进行了测定，方法灵敏、专属性强，操作简单，已用该方法对大鼠灌服复方丹参滴丸后丹参素的体内浓度进行了测定，结果表明该方法可作为丹参制剂的临床药物监测的质控方法。
   
　　本研究结果表明兔静注复方丹参注射液后丹参素在体内的过程可用开放的二室模型来描述，其中t 1/2（α） 仅为0.07h，说明药物在体内分布迅速，t 1/2（β） 为0.48h，药物的清除速率亦较快，4个半衰期即2h后，药物在体内基本清除干净，故药物在体内不会产生蓄积。由于该药在体内清除迅速，在临床用药时，应注意给药间隔。同为静注给药，该实验结果与文献 ［1］ 报道的结果相近，但与文献 ［3］ 的结果有一定差异，可能是由于选用动物的种属不同，另外文献 ［3］ 使用的丹参制剂为丹参注射液，本法采用的是复方丹参注射液，因此该复方中降香也可能对丹参素的体内过程产生影响，其相关的作用机理有待进一步探讨。
    
　　参考文献
    
　　1 何怀冰，王蓓，陈，等.荧光光谱法测定家兔中丹参素血浓度及其药物动力学参数.上海第一医学院学报，1983，10（4）:295-299.
   
　　2 洪馨，宓穗卿，王宁生.复方丹参滴丸中丹参素的药物动力学研究.中药新药与临床药理，2000，11（5）:286-288.
   
　　3 王娟，马张庆，宋建国.丹参注射液在大鼠体内的药动学研究.中国临床药理学与治疗学，2003，8（2）:183-185.

　　* 基金项目:国家自然基金资助项目（编号:39770909）
   
　　作者单位:510405广东广州中医药大学临床药理研究所