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【摘要】 木豆素是新近发现的新型的抗骨质疏松有效成分，它是二苯乙烯衍生物。为了进行构效关系研究，本文利用Wittig反应，合成了六种类似物，总收率36%。
【关键词】 木豆素;芪类化合物;类雌激素;抗骨质疏松
Synthesis of analogues of Longistyline A-2-carboxylic acid as Anti-osteoporosis
LI Zhan，CHEN Di-hua，SI Jian-yong.
Institute of Medicinal Plant，Peking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Science，Beijing100094，China
【Abstract】 For carrying out comparison of anti-osteoporosis activities，six stilbene compounds as analogue of longistyline A-2-carboxylic acid which is an anti-osteoporosis constituent isolated from leaves of Cajasnus cajan L.were synthesized by Wittig reaction.The total yield was36%.
【Key words】 Longistyline A-2-carboxylic acid;Stilbene compound;oestrogen-like hormone;anti-osteoporosis
上世纪八十年代中期，我们对豆科植物木豆（Cajanus ca-jan L.）叶的提取物进行过化学成分研究 ［1］ ，从中分离鉴定了十余种成分。其中木豆素（longistylin A-2-carboxyl）属于芪类（stilbene），在化学结构上，它与临床上应用的己烯雌酚（di-ethylstilbestrol）具有相同的骨架，同属于二苯乙烯的衍生物。
近期，在药理试验的指导下，对木豆叶中分离的有效部位和单体成分进行了抗骨质疏松试验。结果体外和整体试验均表明有明显的作用。例如体外试验，以 3 H-胸腺嘧啶掺入法，用人的类成骨细胞株HOS TE85与药物作用48h，药物终浓度为10 -7 g/ml和10 -8 g/ml时，有效部位和木豆素均显示有强的刺激成骨细胞形成作用，具体表现为促进成骨细胞增殖和刺激细胞胶原形成，与空白对照组比较有显著差异，P<0.05和P<0.01，并呈量效关系。
为了研发活性更强、毒副作用更低有自主知识产权的 药物，我们拟对木豆素及其类似物进行构效关系比较研究。第一阶段，本文设计了以二苯乙烯为骨架、羟基数目或位置不同的芪类衍生物，利用Wittig反应合成了3，5，4′-三羟基-反式芪（白藜芦醇，Ⅰ）、3，4，5-三羟基-反式芪（Ⅱ）、和3，3′，4，5，5′-五羟基-反式芪（Ⅲ）、2，4-二羟基-反式芪（Ⅳ）、3，4，4′，5-四羟基-反式芪（Ⅴ）、2，4，4′-三羟基-反式芪（Ⅵ），以期找到疗效更好的抗骨质疏松的药物。其中，化合物Ⅱ是先前未见报道的新物质，化合物Ⅰ白藜芦醇有多种生物活性 ［2］ 。
以白藜芦醇（1）为例，介绍一下这六个反式芪的合成。我们以3，5-二甲氧基苄基溴（2）和对甲氧基苯甲醛（3）为原料，合成了1 ［3］ 。 1 合成路线 见图1。
图1 1的合成路线 略
2 原料仪器
实验试剂均为分析纯;核磁共振氢谱:INOVA500;质谱:ZAB-2F;熔点测定用北京光电设备厂生产的X4显微熔点测定仪，温度计未校正。
3 合成方法
3.1 3，5-二甲氧基苄基磷酸酯（5）的合成 在100ml四口瓶中，置温度计，回流冷凝管，三通管（氮气保护时，抽真空和充氮气用），滴液漏斗。在瓶中先放13.75g（0.06mol）2，在滴液漏斗中放12.85ml（0.075mol）亚磷酸三乙酯（4），通氮气保护后，加入4，继续通氮气保护，油浴加热至120℃，反应瓶中有气体逸出。反应3h后，无气体逸出，停止加热，得浅黄色液体。
3.2 3，5，4′-三甲氧基芪（6）的合成 在100ml圆底瓶中置上步反应制得的磷酸酯（5）5.76g（0.02mol），瓶上放无水氯化钙干燥管。将反应瓶置于冰水浴中，加无水四氢呋喃25ml，搅拌下加入NaH0.6g（0.02mol），反应2h后，加入1.71g的3（0.0126mol），搅拌反应2h，室温搅拌过夜。
将反应液浓缩至无四氢呋喃蒸出，加入15ml DMF使剩余物溶解，倒入40ml水:甲醇为2:1的溶液中，有固体析出，过滤，固体用水洗，得2.75g白色针晶，是3，5，4′（三甲氧基芪（6），mp:48℃～49℃，此步收率为81%。
3.3 白藜芦醇（1）的合成 1g的6和过量的吡啶盐酸盐6g混合，加热至190℃，保持4h。反应结束后，将此黑色的油状物倒入2N HCl中，用EtOAc（3×100ml）萃取。合并萃取液，用无水硫酸镁干燥。浓缩EtOAc液，与硅胶拌样，经过柱层析，以氯仿:甲醇为15:1的洗脱液洗脱，最终得到0.37g的1，为白色针晶，此步收率为44%。
白色针晶，mp:259℃～261℃， 1 H-NMR（CD 3 OD）:6.10（1H，t，J=2.5Hz），6.39（2H，d，J=2.5Hz），6.70（2H，d，J=8.5Hz），6.74（1H，d，J=16Hz），6.90（1H，d，J=16Hz），7.29（2H，d，J=8.5Hz），EI-MS:228（M + ，100），211，199，181，165，107，91，69，55。 1 H-NMR和EI-MS符合结构特征。
4 结果与讨论
4.1 其它反式芪的波谱数据 Ⅱ，浅红色针晶，mp:162℃～163℃， 1 H-NMR（CD 3 OD）:6.57（2H，s），6.84（1H，d，J=16.5Hz），6.93（1H，d，J=16.5Hz），7.18（1H，t，J=7.5Hz），7.30（2H，t，J=7.5Hz），7.45（2H，d，J=7.5Hz），EI-MS:228（M + ，100），209，181，152，139，79。 1 H-NMR和EI-MS 符合结构特征。 Ⅲ，浅黄色针晶，mp:235℃～237℃， 1 H-NMR（CD 3 OD）:6.09（1H，t，J=2.0Hz），6.36（2H，d，J=2.0Hz），6.46（2H，s），6.65（1H，d，J=16.5Hz），6.75（1H，d，J=16.5Hz），EI-MS:260（M + ，100），213，185，157，128，69。 1 H-NMR和EI-MS符合结构特征。
Ⅳ，黄色粉末，mp:183℃～185℃， 1 H-NMR（CD 3 OD）:6.48（2H，dd，J=8Hz），6.95（1H，d，J=16.5Hz），7.15（1H，t，J=7.4Hz），7.27（2H，t，J=7.8Hz），7.35（1H，d，J=16.5Hz），7.45（1H，d，J=7.8Hz），7.46（2H，brd，J=7.4Hz），EI-MS:212（M + ，100），197，183，165，115，43。 1 H-NMR和EI-MS符合结构特征。
Ⅴ，浅黄色针晶，mp:209℃～211℃， 1 H-NMR（CD 3 OD）:6.46（2H，s），6.67（2H，d，J=16.5Hz），6.74（2H，d，J=16.5Hz），6.68（2H，d，J=8.5Hz），7.25（2H，d，J=8.5Hz），EI-MS:244（M + ，100），197，181，141，115。 1 H-NMR和EI-MS符合结构特征。
Ⅵ，黄色粉末，mp:203℃～206℃， 1 H-NMR（CD3OD）:6.49（2H，m），6.86（2H，dd，J 1 =6.8Hz，J 2 =2.0Hz），6.93（1H，d，J=16.5Hz），7.21（1H，d，J=16.5Hz），7.38（2H，dd，J 1 =6.8Hz，J 2 =2.0Hz），7.45（1H，d，J=8.6Hz），EI-MS:227（M + -1，100），213，201，182，107，79。 1 H-NMR和EI-MS符合结构特征。
4.2 制法 在合成过程中，文献 ［3］ 中Wittig成烯反应用甲醇钠，需随用随制，多次反应收率都在82%左右（文献 ［3］ :95%）。改用氢化钠，使反应温和，温度由100℃降至室温，收率仍在82%左右。
【参考文献】
1 陈迪华，李慧颖，林慧.木豆叶的化学成分研究.中草药，1985，16（10）:2-7.
2 王征，罗泽民，邓林伟.白藜芦醇的药理作用机理和合成途径.天然产物研究与开发，2003，15（2）:178-180.
3 Mingfu W，Yi J，Chitang H.Evaluation of resveratrol derivatives as po-tential antioxidants and identification of a reaction product of resveratrol and2，2-diphenyl-1-picryhydrazyl radical.J Agric Food Chem，1999，47（10）:3974-3977.
基金项目:国家自然科学基金“木豆叶防治骨质疏松有效成分的基础研究”的一部分工作
作者单位:100094北京，中国协和医科大学、中国医学科学院药用植物研究所
（编辑:文 静）