阿奇霉素与氧氟沙星的体外联合抗菌作用

　　【摘要】  目的  探讨阿奇霉素与氧氟沙星的体外联合抗菌作用。方法  本文用微量稀释法测定阿奇霉素与氧氟沙星的体外联合抗菌作用，并与试管稀释法比较。结果  除微量法两株、试管法三株金黄色葡萄球菌外，MIC均有不同程度的降低；微量法测定中除2例耐药菌株外，两药联用只有2例显示无关或拮抗作用，试管法共三株金黄色葡萄球菌的FIC>1.0，即联合对此三株金黄色葡萄球菌呈无关或拮抗作用，占10%，合用对其余的28株金黄色葡萄球菌都为协同或相加作用（占总株数的93.33%）；试管法测定中仅有三株金黄色葡萄球菌的FIC>1.0，即联合对此三株金黄色葡萄球菌呈无关或拮抗作用，占10.00%，其他均在1.0及以下，即协同和相加的菌株有27株（90.00%）微量法和试管法所测数据经SPSS统计软件处理后，得到联合前后测出的MIC差异均有显著性（P值均＜0.05）；而微量法与试管法所测算出的FIC指数则差异无显著性（P>0.05）。结论  由此得出微量法是一种使用培养基少、简便和可靠的方法，可代替传统的试管法值得推广使用；同时还证实对治疗由金黄色葡萄球菌引起的严重感染，可采用阿奇霉素与氧氟沙星联合用药方案。
   
　　【关键词】  微量稀释法；   阿奇霉素；  氧氟沙星
   
　　目前，阿奇霉素与氧氟沙星合用是临床常使用的联合治疗方案，如宫颈炎、前列腺炎等［1，2］。为证实此联合应用的合理性，本文采用阿奇霉素和氧氟沙星合用，用微量法对临床分离的30株金黄色葡萄球菌在体外测定其抗菌活性，并与试管法作比较，为临床合理用药提供依据。

　　1  材料与方法

　　1．1  药液制备  分别把阿奇霉素（苏州长征-欣凯制药有限公司生产）和氧氟沙星（江苏扬子江药业集团生产）用蒸馏水配制成为1000μg/ml溶液，冷藏备用。用时配成浓度为100μg/ml的试验液。

　　1．2  培养基  使用Schaedler肉汤。

　　1．3  菌株及菌液制备  试验菌株为我院自临床病人分离所得，试验前所有菌株都经过重新鉴定，共30株金黄色葡萄球菌。将分离的菌株接种于Schaedler肉汤中，37℃培养过夜，比浊、稀释，加入含有抗生素的培养基中，使其最终菌量为3×105CFU/ml。

　　1．4  聚苯乙烯微孔稀释板  12孔8排，每孔容量0.5ml。微量移液管为上海求精生化仪器厂产品，规格为50～250μl。

　　1．5  微量稀释法

　　1．5．1  单药药敏试验  最低抑菌浓度（MIC）的测定用二倍稀释法。在微板的11个孔中依次加入用肉汤作倍比稀释的抗生素溶液，每孔100μl，最后一孔未加抗生素作为对照，再在每孔中加入菌液100μl。各孔中的最终抗生素浓度依次为100、50、25……摇匀后放在铺有湿纱布的方盘中，于37℃孵育24h。在衬有黑底的光线下观察结果，以弥漫混浊、单一的大圆点或丝网状为细菌生长指标，无菌生长的最低浓度为该药单用时的MIC。

　　1．5．2  联合药敏试验  采用棋盘微量稀释法［3］，将两药分别用肉汤作倍比稀释，以浓度各不相同的抗生素50μl，交叉组合于微板孔中，加菌液（菌量同单药药敏试验）100μl，使微板的每一孔中阿奇霉素浓度不变，氧氟沙星则依次为2倍、1倍、0.5倍MIC……；在微板的每一排中，氧氟沙星不变，阿奇霉素浓度依次为2倍、1倍、0.5倍MIC……，振摇均匀，放在铺有湿纱布的方盘中，于37℃孵育24h。细菌生长指标同单药药敏试验。无菌生长的最低浓度为联用时的MIC。

　　1．5．3  试管法  采用文献方法测定［4］。

　　2  结果

　　2．1  结果评价  阿奇霉素与氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的联合抗菌作用评价可用最低抑菌比值（FIC）以及FIC指数判断：FIC≤0.5为协同作用; FIC> 0.5，≤1.0为相加作用；FIC>1.0为无关和拮抗作用［5］。

　　2．2  实验测定结果  见表1～3。

　　表1  微量法测定30株金黄色葡萄球菌MIC结果（略）

　　表2  试管法测定30株金黄色葡萄球菌MIC结果（略）

　　由表1、2可看出，两药合用后，除微量法2株、试管法3株金黄色葡萄球菌（这些菌株可能是耐药菌株）外，MIC均有不同程度的降低；微量法测定中除2例耐药菌株外，两药联用只有2例显示无关或拮抗作用，试管法共3株金黄色葡萄球菌的FIC>1.0，即联合对此三株金黄色葡萄球菌呈无关或拮抗作用，占10%。

　　合用对其余的28株金黄色葡萄球菌都为协同或相加作用（占总株数的93.33%）；试管法测定中仅有3株金黄色葡萄球菌的FIC>1.0，即联合对此3株金黄色葡萄球菌呈无关或拮抗作用，占10.00%，其他均在1.0及以下，即协同和相加的菌株有27株，占90.00%。表1、表2中的数据用SPSS统计软件处理后得表3。

　　表3  经SPSS统计软件处理的数据（略）

　　由表3可看出，不论是微量法还是试管法，其联合前后测出的MIC差异均有显著性（P值均＜0.05）；而微量法与试管法所测算出的FIC指数则差异无显著性（P>0.05）。

　　3  讨论

　　以上实验提示，阿奇霉素与氧氟沙星合用对临床上所分离的金黄色葡萄球菌均有协同或相加作用（除耐药菌株外），联合前后测得的MIC差异均有显著性（P＜0.05），此合用可提高疗效、减少用量、防止耐药菌的产生，其机制是由于阿奇霉素与细菌50s核糖体亚单位作用，抑制细菌蛋白合成，从而快速抑制细菌生长，应用氧氟沙星后，阻断了细菌DNA的复制，进一步的杀死和阻止了细菌的生长繁殖。因此，临床采用阿奇霉素与氧氟沙星联合用药方案治疗非淋菌性泌尿生殖感染、无合并症淋病等严重感染。
     
　　此实验还证实微量法测定抗生素联合体外抗菌作用的方法是一种使用培养基少、简便和可靠的方法，可代替传统的试管法（t=0.713，P＞0.05），值得推广使用。

　　【参考文献】

　　1  李波，王小霞，刘杰.  盐酸左氧氟沙星与阿奇霉素联合治疗复发性沙眼衣原体宫颈炎疗效观察.  西藏医药杂志，2003，24（2）：34-35.

　　2  杨泽英，李基岩. 氧氟沙星与阿奇霉素治疗慢性前列腺炎的临床疗效比较.  中国医院药学杂志，2003，23(4)：235-236.

　　3  屈毅.  现代运用抗生素—理论、实验方法和临床应用.  成都： 四川科学技术出版社，1987，346-364.

　　4  李淑英.  阿奇霉素与氯霉素对金黄色葡萄球菌体外联合抗菌试验. 中国药学杂志，1991，26(10)：595.

　　5  郑钧镛，王光宝.  药品微生物学及检验技术. 北京： 人民卫生出版社，1989，353-355.
 
　　(编辑：宋  冰)

　　作者单位：550002 贵州贵阳，贵阳卫校药学教研室

　　　　　　　550002 贵州贵阳，贵州省人民医院药剂科