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【摘要】 目的 探讨大黄藿苓汤对腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭的影响。 方法 用Wistar 大鼠灌服腺嘌呤造模,分给药1组、给药2组治疗，检测肾功能指标及肾病理改变。结果 给药1、2组肾脏病理改变较模型对照组明显减轻，尿素氮、肌酐、尿酸均较模型对照组明显减低（P<0.05）。结论 大黄藿苓汤具有延缓肾功能衰竭的作用。其机制可能是促进氮质化合物的排出、改善肾功能，抑制肾脏纤维组织增生。
【关键词】 大黄藿苓汤； 腺嘌呤； 慢性肾衰； 实验研究
慢性肾功能衰竭（CRF）是由于多种慢性肾脏疾病发展到晚期，肾实质损害引起临床综合征。其临床症状复杂，死亡率较高，透析和肾脏移植是治疗该病的重要手段，但受治疗费用所限，尚未普及。因此，CRF的非透析疗法为国内外医学专家所重视。大黄藿苓汤是临床治疗慢性肾功能衰竭的有效方药。为探讨其作用机理,本实验观察了大黄藿苓汤对腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能衰竭的影响，现报告如下。
1 实验材料
1.1 实验动物 雄性Wistar大鼠40只，体重150～180g，由中国医学科学实验动物研究所繁育场提供。
1.2 实验药品 腺嘌呤（Adenine, C5H5N5, FW: 135.13）上海伯奥生物科技有限公司提供，进口分装，批号：020508。用时加蒸馏水配成2%混悬液，置4℃冰箱备用, 混匀后使用。 大黄藿苓汤：由大黄、淫羊藿、猪苓、茯苓、雷公藤、莪术、丹参、红花、当归等药物组成，药材由解放军第272医院中药房提供，煎成生药浓度为7.04g/ml的煎剂装瓶，置4℃冰箱备用。
1.3 主要仪器 使用日立7020全自动生化仪、光学显微镜。
2 实验方法
2.1 分组及造模方法 40 只大鼠购入后，适应性喂养1周，随机分为4 组，即正常对照组、模型对照组、给药1组、给药2组，每组各10只。除正常对照组外，各组按250mg/(kg·d) 给大鼠腺嘌呤灌胃［1，2］。正常对照组用等量生理盐水灌胃，造模用药21 天，并于第21 天经眼眶取血做肾功能检查。
2.2 给药方法 正常对照组、模型对照组：实验开始至51天实验结束，每天1次，2 ml/只生理盐水灌胃；给药1组：实验开始至51天实验结束，每天1次，大黄藿苓汤2ml/只灌胃；给药2组：实验开始至21天，每天1次，2 ml/只生理盐水灌胃，实验22天至51天实验结束，大黄霍苓汤2ml/只灌胃。治疗过程中大鼠自由进食、饮水。
2.3 观察指标 (1)尿素氮、肌酐、尿酸、血钙、血磷等：血标本离心，取血清，日立7020型全自动生化仪测定。(2)肾组织形态学：肾脏标本10%福尔马林固定，石蜡包埋，常规HE染色，光镜观察。
2.4 统计学方法 计量资料用t检验,计数资料使用秩和检验。
3 结果
3.1 第21天时各组生化指标测定结果 见表1。表1 第21天时各组生化指标测定结果 注：与正常对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，ΔP<0.05
通过表1可以看到，在第21天时，模型对照组尿素氮、肌酐、尿酸均明显高于正常对照组（P<0.01），说明造模成功。给药1组在第21天时，尿素氮、血肌酐、尿酸的上升水平明显低于模型对照组，提示肾功能损害明显轻于模型对照组，但血钙、血磷的变化不明显。
3.2 第51天时各组生化指标测定结果 见表2。表2 第51天时各组生化指标测定结果 注：与正常对照组比较，**P<0.01，*P<0.05；与模型组比较，ΔΔP<0.01，ΔP<0.05
通过表2可以看出，给药1、2组肾功能、血磷指标均明显好于模型对照组，表明大黄藿苓汤可以明显抑制肾衰的进展，给药1、2组之间无明显差别，给药1组较给药2组肾功能进展有减慢的趋势。
3.3 病理学观察 正常对照组：肾组织如常，组织学均未见病变。模型对照组：肾体积均明显增大。个别动物肾体积较正常对照组可增大1倍以上。各肾均存在区域性肾单位萎缩、消失，纤维组织增生明显及炎细胞浸润。部分肾小管上皮细胞坏死、消失或扩张，甚者呈囊性。肾实质内肾小球数目明显减少并可见大小不一、数量不等的棕褐色结晶或异物肉芽肿形成及粉染匀质的管型。给药1组：肾病变较模型对照组明显减轻，肾体积除个别动物外，均略增大或接近正常对照组，肾单位萎缩、消失，纤维组织增生面积较小且局限在近被膜的皮质部分。除个别动物外，扩大的肾小管及结晶体形成均减轻，部分肾组织学与正常对照组比较大致相似。给药2组：肾病变较模型对照组减轻，区域性肾单位萎缩消失。纤维组织增生面积较模型组小；扩大的肾小管及肾实质内的结晶体亦少些。
综合上述改变现将肾脏病变程度分为以下4级：“+”肾体积略增大或接近正常，肾单位萎缩、消失，纤维组织增生面积较小且局限在肾被膜下皮质区域，偶见扩大的肾小管及肾实质内的结晶体，余肾组织与正常对照比较大致相似。“++”肾体积增大，区域性肾单位萎缩、消失，纤维组织增生面积<1/4视野，部分肾小管扩大，可见结晶体。“+++”肾体积增大明显，区域性肾单位萎缩、消失纤维组织增生面积≥1/2视野，较多的肾小管扩大，结晶体仍较多。“++++”肾体积增大明显大于正常1倍，区域性肾单位萎缩、消失，纤维组织增生面积>1/2视野，扩大的肾小管呈囊性，见较多的结晶体及异物肉芽肿形成，炎细胞浸润明显（见表4）。表4 根据以上病变分级，各组动物肾脏病变程度注：与正常对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，ΔP>0.05
通过表4可以看到，正常对照组各动物肾均未见显著病变，而模型对照组动物肾病变明显，提示模型的建立可靠。给药1组肾病变明显减轻，与模型对照组比较，P<0.05，两者差异有显著性。表明给药1组有防治作用。给药2组肾病变虽减轻，但与模型对照组比较，P>0.05，两者差异无显著性，但有减轻趋势。
4 讨论
慢性肾功能衰竭为内科危重病症，是由于多种慢性肾脏疾患发展到晚期，肾实质损害引起慢性肾功能严重损害，体内氮质及其代谢产物潴留，不能维持体内水、电解质及酸碱平衡而引起的各种临床综合征。其机制目前尚未完全清楚，对于CRF的治疗主要采用保守治疗和透析治疗、肾移植的替代疗法，由于替代疗法的治疗费用昂贵，尚难普及，因此中医药治疗CRF有着重要意义。CRF类似祖国医学的“水肿”、“癃闭”“虚劳”、“关格”、“溺毒”等症。以CRF发生发展病程中主要临床表现，我们认为CRF的病机为内生和外来之毒侵蚀机体，引发脏腑阴阳失调，血瘀气滞，精血耗损，故自拟具有活血化瘀、益气养血、补肾健脾、利水排毒的大黄藿苓汤治疗，取得了较好的临床效果。大黄藿苓汤主要由大黄、淫羊藿、猪苓、茯苓、雷公藤、丹参、莪术、红花、当归等组成。现代药理实验表明大黄、淫羊藿、丹参、莪术具有使CRF 大鼠的血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr) 上升速度减慢的作用［3～5］。本实验研究表明大黄藿苓汤可减低尿素氮、血肌酐、尿酸，减少肾单位萎缩、消失，抑制纤维组织增生面积。说明大黄藿苓汤能改善慢性肾功能衰竭的临床症状，延缓病情的恶化，其机制可能是促进氮质化合物的排出、改善肾功能，抑制肾脏纤维组织增生。
本实验研究表明大黄藿苓汤可减低CRF 大鼠尿素氮、血肌酐、尿酸，减少肾组织的肾单位萎缩、消失、纤维组织增生面积。
【参考文献】
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5 陈梅芳． 大白鼠5／6 肾切除所致慢性肾衰动物模型的中药治疗观察．中国医药学报, 1988， (6): 24-27.
基金项目：天津市科委自然基金项目(编号：003607811)
作者单位： 1 300020 天津，解放军第272医院
2 天津，天津中医药大学
3 天津，天津安定医院
(编辑：宋 冰)