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【摘要】 支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见的呼吸道疾患，发生在各个年龄组的人群，严重影响着患者的生活质量。哮喘在全球的患病人数已经超过1亿，而且在儿童中患病率正在上升。而肿瘤坏死因子ＴＮＦ-α是导致血管炎症损伤和炎性细胞浸润的主要因素，在哮喘的发病过程中起到重要作用。哮喘患者的外周血、痰及肺泡灌洗液中有高水平表达。本文简要地对ＴＮＦ-α的蛋白水平、mRNA 水平及其基因多态性与哮喘发病的关系作一综述。
【关键词】 肿瘤坏死因子；哮喘
哮喘是一种慢性的气管变态反应性炎症，由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等细胞及其分泌的细胞因子参与［1］。这些细胞产生的介质和细胞因子，有的直接作用于气管，有的通过神经介质间接作用于气管，引发慢性变态反应性炎症反应。而肿瘤坏死因子ＴＮＦ-α是由单核巨噬细胞产生的具有广泛生物学活性的多肽, 与机体炎症、免疫反应密切相关。适量的ＴＮＦ-α对机体产生保护作用, 而其慢性刺激或大量释放却可以引起组织的免疫损伤［2, 3］。 当过敏原刺激时, 肺的巨噬细胞活化, 释放ＴＮＦ-α等一系列炎症介质, 激活Ｔ淋巴细胞, 而活化的Ｔ淋巴细胞分泌白介素-2和一氧化氮等介质, 参与气道炎症反应过程及肺上皮细胞的损伤，进而导致哮喘的发生［4, 5］。因此，ＴＮＦ-α在哮喘发病中起到重要作用。研究表明ＴＮＦ-α在哮喘患者的痰、肺泡灌洗液、外周血及支气管黏膜均有高水平表达［6, 7］。本文就ＴＮＦ-α水平的变化及其基因多态性与哮喘发病过程的关系综述如下。
1 ＴＮＦ-α在哮喘病人外周血中的变化
温志红等比较了哮喘急性发作期与缓解期血清中TNF-α的水平，发现发作期血清中ＴＮＦ-α水平较缓解期、对照组明显升高, 提示ＴＮＦ-α参与哮喘发病。并且缓解期使用激素组与未用激素组相比, 前者TNF-α的水平下降更显著, 接近正常对照水平, 这是因为糖皮质激素可抑制ＴＮＦ-α等细胞因子的产生和活性, 从而打断炎症介质的级联反应, 减轻气道炎症反应［8］。其他大量报道均表明哮喘发作期TNF-α水平明显高于缓解期和对照组, 提示TNF-α与哮喘的发病机制有关。因此，TNF-α是一个判断哮喘病情的指标［9, 10］。
2 ＴＮＦ-α在哮喘病人痰中的变化
赵海涛等利用逆转录聚合酶链反应(ＲＴ-ＰＣＲ)方法测定痰标本中ＴＮＦ-α的ｍＲＮＡ水平，发现有相当部分标本可以成功地扩增出所需的ＰＣＲ产物。实验发现哮喘组ＴＮＦ-α ｍＲＮＡ的表达量与正常对照组相比有明显差异, 且与患者痰中嗜酸粒细胞百分比及病情严重程度呈正相关, 提示痰中ＴＮＦ-α的ｍＲＮＡ表达量的增高可能预示着气道炎症, 特别是嗜酸粒细胞炎症的严重程度。但是, 哮喘患者与慢支患者间ＴＮＦ-α ｍＲＮＡ表达量无明显差异，说明ＴＮＦ-α为一非特异性指标［11］。其他研究者也证明哮喘急性发作期中，痰中TNF-α水平明显高于哮喘缓解期与正常对照［12］。
3 ＴＮＦ-α在哮喘病人支气管和肺泡灌洗液中的变化
已有研究发现哮喘病人支气管灌洗液中白细胞基础分泌TNF-α增加, 并且经植物血凝素等刺激后, 其分泌量呈数量级增加［13］。薛玉文等检测了26例哮喘患者支气管肺泡灌洗液中ＴＮＦ-α水平, 并分析其与患者肺功能的相关性, 结果显示，哮喘患者肺泡灌洗液中ＴＮＦ-α含量明显高于正常人［14］。王伟等以卵白蛋白致敏和吸入激发复制哮喘豚鼠模型, 以L929细胞杀伤和MH60.BSF2细胞增殖反应检测TNF-α，发现哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液及肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α明显升高并呈动态改变［15］。
4 肿瘤坏死因子启动子基因多态性与哮喘的相关性
哮喘的发病受遗传和环境等因素的影响。ＴＮＦ-α为候选的哮喘易感基因之一。人ＴＮＦ-α基因位于人类染色体6p21.3上。遗传学研究表明, 该区域存在与哮喘发病相关的基因座位。在ＴＮＦ-α启动子区-308位含有一个单碱基变异(Ｇ→Ａ)取代, 其突变型基因命名为ＴＮＦ2, Ｇ→Ａ的替换可使ＴＮＦ-α转录水平升高6～7倍［16］。有关ＴＮＦ-α基因多态性与哮喘关系的研究多在白人患者中进行, 结果不一致。Moffatt对88个核心家系的413例对象进行研究, 结果表明哮喘患者中的TNF-α基因高表达与TNF-α启动子多态性(TNF-308*2)和LTα基因多态性(LTαNCOI*1)有关［17］。 Witte对236例研究对象进行的病例研究也表明TNF-308*2等位基因与哮喘的发生有关［18］。 并且Albuqurque认为TNF-308*1和LTαNCOI*2两个等位基因可以使哮喘发生的危险性增加5倍［19］。 但是，Louis等的研究并未发现ＴＮＦ-α基因多态性与哮喘易感性及表型间存在相关性［20］。 Buckova［21］ 和Shek［22］在各自的研究中也未发现TNF-308的各等位基因在病例组和对照组之间的分布频率存在差异。 国内也进行了有关ＴＮＦ-α基因多态性与哮喘关系的研究，结论也不尽一致。高金明等采用聚合酶链反应－限制性长度多态性 (ＰＣＲ-ＲＦＬＰ) 方法探讨了ＴＮＦ-α基因多态性和哮喘遗传易感性及哮喘表型的关系, 结果显示ＴＮＦ-α 22纯合子在哮喘组的频率高达20. 8%, 等位基因频率为0.42, 明显高于健康对照组。这一结果提示,ＴＮＦ-α 22纯合基因型和我国哮喘患者的易感性明显相关，并发现ＴＮＦ-α 22基因是哮喘发病的独立危险因素。但是未发现ＴＮＦ-α基因多态性与肺功能损害程度的相关性［23］。而赵海军等也研究了TNF-308等位基因和基因型在中国东北汉族哮喘患者和健康对照者之间分布情况，发现TNF-308等位基因在哮喘组和健康对照组之间的分布差异并无显著性, TNF-308的3种基因型 (GG、GA和AA) 在哮喘组和健康对照组的分布差异也无显著性［24］。
以上研究结果的矛盾可能与样本数量不足及遗传背景有关。要阐明ＴＮＦ-α基因在哮喘发病中的作用，还需要进一步扩大样本量和家系的数目。
5 结论
ＴＮＦ-α是导致血管炎症损伤和炎性细胞浸润的主要因素,它通过作用于血管内皮细胞, 增加内皮细胞粘附分子如细胞间粘附分子(ＩＣＡＭ)-1、血管细胞粘附分子(ＶＣＡＭ)-1表达, 诱导血小板活化因子及ＩＬ-1、ＩＬ-8的释放, 促进炎症细胞粘附、游走、浸润及中性粒细胞脱颗粒、呼吸暴发, 引起组织损伤［25，26］。因此，ＴＮＦ-α在哮喘的发病过程中起到重要作用，其mRNA及蛋白水平均明显上升，从而成为判断哮喘发病过程、病情程度的一项敏感而非特异的指标。
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作者单位： 1 410007 湖南长沙，湖南中医学院附属第一医院检验科
2 湖南长沙，湘雅三医院病理科
(编辑：守 中)