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The clinical studies of Fas and CD34expressions in acute leukemia（AL）
Ye Fang，Qiao Zhenhua，Zhu Lei，et al.
Department of Hematology，The Second Hospital of ShanXi Medical University，Tai Yuan，030001.
【Abstract】 Objective To explore the role of Fas and CD34expressions in AL.Methods We detect Fas and CD34from AL patients with flow cytometry（FCM）.Results （1）Fas expression in acute myeloid leukemia（AML）was higher than in acute lymphocytic leukemia（ALL）and CD34expression had no difference in AL.（2）Comparing the groups of Fas + with Fas - ，CD34 + with CD34 - ，we found their CR rates had obvious difference.Conclusion In AL.Fas is a favorablely prognostic factor and CD34is an unfavorable one.
【Key words】 AL Fas CD34
近年来研究提示，AL发病机制之一是促凋亡基因和/或抑凋亡基因表达紊乱使细胞凋亡减少 ［1］ 。Fas是重要的诱导细胞凋亡因子。Fas抗原与其天然配体FasL结合即可诱导细胞调亡 ［2］ 。本研究应用FCM对59例AL患者治疗前及CR后骨髓白血病细胞的Fas、CD34的表达情况进行测定，以明确二者在AL发病机制中的作用及对预后的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2002年9月～2003年9月我科59例初发AL患者，年龄6～70岁，中位年龄34岁，AML45例（M 2 13例，M 3 17例，M 4 8例，M 5 7例），ALL12例，急性混合细胞性白血病（AMLL）2例，10名健康者作对照。
1.2 诊断标准、临床治疗方案、疗效标准 参阅文献 ［3］ 。
1.3 研究方法 59例AL患者初诊及CR后行Fas、CD34检查。
1.3.1 主要仪器设备及试剂 FCM ESP ELITE型（Coulter，U.S.A）;JSK-1、羊抗鼠IgG2a、IgG1及IgG2b、各种单克隆抗体（PHARMINGEN，U.S.A）。
1.3.2 FCM直接免疫荧光法检测Fas、CD34 每种单抗20μl，各加入100μl EDTA抗凝新鲜骨髓液，暗处室温放置30min，Coulter Q-PREP破红细胞，1200rpm离心5min，弃上清，PBS500μl洗涤1次，1200rpm离心5min，弃上清，细胞悬浮在500μl PBS中，上机检测，分析10000个细胞（激发波长488nm，发射光用550nm带滤色片测红色荧光强度）。采用CD45-SSC设门，ELITE4.5软件分析数据（同时设立IgG及健康者阴性对照）。
1.4 统计学方法 应用SPSS软件处理数据，组间率比较行四格表卡方检验，P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 Fas、CD34表达情况 参照文献，CD34≥20%为阳性;本研究10名正常对照Fas值ˉx±s=（23.11±12.34）%，>35.45%为阳性。
2.2 Fas、CD34在初发AL的表达 见图1。
2.3 Fas、CD34表达与AL疗效关系 将患者分为Fas + 与Fas - 组、CD34 + 与CD34 - 组，见图2、3。
图1 Fas和CD34在AL表达情况
图2 Fas表达与AL CR率的关系
图3 CD34表达与AL CR率的关系
3 讨论
凋亡调控基因作用的失调在疾病发生中的作用越来越不可忽视 ［1］ 。Fas是诱导凋亡因子，白血病细胞低表达Fas，造成白血病细胞过度增殖，机体肿瘤负荷高，CR率降低。由此推测，Fas表达与AL患者的疗效相关:Fas高表达可能是预后良好的因素。本研究显示:Fas在ALL的表达率为33.33%，在AML的表达率为62.22%，且两表达率间差异有非常显著性（P<0.01），故Fas可能在AL发生中起作用;而CD34的表达与AL类型无关。根据二者的表达情况，将患者分为Fas + 与Fas - 组、CD34 + 与CD34 - 组:在Fas + 与Fas - 组的AML，CR率分别为89.20%、47.06%（P<0.01），Fas + 与Fas - 组的AL，CR率分别为90%、45.5%，差异均有显著性（P<0.01），Fas + 组CR率高于Fas - 组，这提示Fas阳性表达可能是预后良好因素。在AML，CD34 + 与CD34 - 组CR率分别为27.27%、85.29%（P<0.01），在AL，CD34 + 与CD34 - 组CR率分别为40%、86.36%（P<0.05），差异均有统计学意义，这与有关报道 ［4］ 相符;CD34有独立预后意义，CD34 + 者CR率低，预后差。综上所述，Fas、CD34的表达对AL患者的疗效及判断预后均有意义:二者与疗效高度相关，Fas可能是AL患者预后好的因素，而CD34为疗效差、预后差的重要因素。这提示临床医生要充分考虑到这些因素，实行AL个体化治疗，使更多的AL患者获得长期无病存活。
参考文献
1 杨纯正，王树滨.肿瘤化疗和细胞凋亡.中华血液学杂志，2000，21（10）:285-286.
2 Nagata S，Golstein P.The Fas death factor.Science，1995，267:1449.
3 张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准.第二版.北京:科学出版社，168-380.
4 Boekhorst P，Lee K D，Schoester M，et al.Predominance of functional multidrug resistance（MDR）phenotype in CD34+ acute myeloid leukemia cells.Blood，1993，82:3157-3162.
作者单位:030001山西医科大学第二医院血液科