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Immunohistochemical study of bcl-2，c-myc proteins in benign prostatic hypertrophy
Zhang Yueli，An Ruihua，Sun Zhipeng，et al.
The Department of Urology，Lijian Hospital of Mudanjiang City，Heilongjiang157011.
【Abstract】 Objective To observe the relationship between bcl-2，c-myc and benign prostatic hypertrophy（BPH），we detected the bcl-2and c-myc proteins in7tissues of normal prostate and23tissues of BPH with im-munohistochemical techique.Results In normal prostatic tissues，the immunostain of bcl-2was mainly restricted in the basal cell layer of epithelium，and the immunostain of c-myc was not detected.In BPH tissues，the bcl-2im-munostain was found in basal cells and secretory cells，the c-myc had a positive rate of26.1%in BPH tissues.Con-clusion The bcl-2and c-myc overexpressed in BPH tissues，and play roles in BPH developing.
【Key words】 benign prostatic hyperplasica bcl-2protein c-myc protein
前列腺增生是一种病因复杂的疾病。近年来的研究表明，前列腺组织中bcl-2和c-myc的激活可导致前列腺增生的发生 ［1，2］ 。本实验应用免疫组化方法检测前列腺增生组织中bcl-2和c-myc的表达情况，以分析前列腺增生形成的机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本 正常对照组7例，取自尸检前列腺组织，经石蜡包埋，HE染色确认为正常前列腺组织。年龄22～34岁，平均26.3岁。前列腺增生组23例，取自我院1995～1998年手术的BPH组织石蜡包埋标本。其中，开放性手术14例，闭合性手术（TURP）9例，年龄56～82岁，平均65.2岁。
1.1.2 试剂 免疫组化试剂购自福州迈新生物技术开发公司。第一抗体为bcl-2（100）和c-myc（9E/11）鼠抗人单克隆抗体。
1.2 方法 免疫组化操作采用S-P法。切片厚度为5μm，用已知的bcl-2和c-myc阳性染色组织作阳性对照，以PBS液替代第一抗体作空白对照，同步做HE染色以核实原病理诊断。
1.3 统计学方法 bcl-2以细胞浆被染成棕黄色为阳性;c-myc以细胞核被染成棕黄色为阳性。统计学处理采用方差分析。
2 结果
正常前列腺组织中，bcl-2阳性染色细胞主要位于腺体的基底细胞层，腺体分泌细胞偶有着色（图1）;未见c-myc阳性染色细胞在前列腺增生组织中，bcl-2阳性染色细胞不仅见于腺体基底细胞，而且还见于大多数腺体的分泌细胞（图2）;同一个BPH组织中，有的腺体只在基底细胞阳性染色，有的腺体基底细胞和分泌上皮细胞都有阳性。但bcl-2与腺体上皮增殖程度并不完全平行，有的腺体分泌细胞堆积分层非常明显，bcl-2表达却很弱。在BPH间质中，bcl-2阳性细胞有簇集存在的趋势。通过与HE染色切片对比，这些细胞被确认为炎性细胞。在23例BPH组织中，有6例显示c-myc阳性染色（26.1%）。间质细胞着色明显，有2例梭状的间质细胞核呈现强阳性染色（图3）。在其中4例BPH组织的腺体中也有阳性染色，阳性染色分布于基底细胞和分泌细胞。
3 讨论
前列腺增生症是老年性常见疾病，病理变化是前列腺组织的腺体细胞及间质的纤维细胞、平滑肌细胞发生堆积。其病因复杂，目前认为，多种因素参与前列腺增生。有研究发现BPH的间质和上皮细胞增殖活性较正常前列腺明显增高，同时上皮细胞的凋亡率显著下降 ［3，4］ 。 bcl-2是明确的凋亡抑制基因，它的激活可抑制细胞凋亡，导致细胞堆积。本实验显示，正常前列腺组织中，bcl-2阳性染色主要位于腺体的基底细胞层。bcl-2的这种分布是与基底细胞的功能有关的。而在BPH组织中，bcl-2阳性染色不仅存在于腺体的基底细胞层，而且也存在于大多数腺体的分泌细胞中。这说明bcl-2参与了前列腺增生的发生。bcl-2的过度表达，导致腺体细胞的凋亡受到抑制，细胞的增殖与死亡失去平衡，使细胞堆积。另外，本实验也同时显示，bcl-2表达与腺体上皮细胞堆积的程度并不完全一致，有的腺体分泌细胞堆积分层非常明显，bcl-2表达却很弱，笔者认为bcl-2的过度表达所导致的细胞凋亡受抑并不是腺体细胞堆积的唯一原因，还有其它基因的异常参与腺体细胞的堆积。本实验还观察到BPH间质中，bcl-2阳性染色细胞多是炎性细胞，而前列腺自身纤维细胞和平滑肌绝大多数无阳性染色，提示间质的增生与bcl-2无关。c-myc基因功能复杂，它的激活既可促进细胞增殖，也可促进细胞凋亡 ［5，6］ 。本实验显示，正常前列腺组织中无c-myc阳性染色细胞，而在BPH组织中，有c-myc阳性染色（26.1%），其中2例染色呈强阳性。这说明在前列腺增生中，c-myc基因被过度激活。由于BPH组织中无细胞过度的凋亡 ［3，4］ ，因此在前列腺增生组织中，c-myc的作用不是促进细胞凋亡，而是促进细胞增殖，导致前列腺细胞堆积。另外本研究显示，c-myc阳性染色见于前列腺腺体和间质细胞，说明BPH中腺体和间质细胞的堆积都有c-myc的参与，这一点与bcl-2表达不同。但c-myc在BPH中的阳性率仅为26.1%，因此推测可能还有其它基因的异常参与了前列腺细胞的过度增殖。有研究表明，bcl-2和c-myc之间存在协同作用，在bcl-2过度表达的情况下，c-myc促进细胞凋亡的作用可被抑制，仅发挥促进细胞增殖的作用 ［7，8］ 。本实验发现，在4例前列腺增生的腺体中同时有bcl-2和c-myc的过度激活。因此，这4例BPH腺体细胞的堆积是二者共同作用的结果，既 有细胞增殖的加速，又有细胞凋亡的抑制。 Thompson等人在利用c-myc和ras基因转染前列腺细胞的实验中发现，单独c-myc的转染导致前列腺增生，而同时转入ras基因则导致前列腺癌的发生 ［2］ 。因此他推测，前列腺增生的发生是单一癌基因激活的结果，而多基因的异常则导致肿瘤的形成。但本实验却显示:前列腺增生组织中有c-myc和bcl-2的同时过度表达，前列腺细胞并未出现恶变，这说明除bcl-2和c-myc外，尚存在其它因素影响前列腺细胞的恶性转化。因此，前列腺增生中癌基因的异常情况尚待进一步研究。（本文图片见封三）
参考文献
1 张学军，Lee C，Olsson C，等.bcl-2基因在良性前列腺增生中的作用.中华泌尿外科杂志，1997，18:97.
2 ThompsonTC，Southgate J，Kitchener G.Multistage carcinogenesis induced by ras and myc oncogenes in a reconstitued organ.Cell，1989，56:917.
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8 Fanidi A，Harrington EA，Evan GI.Cooperative interaction between c-myc and bcl-2protooncogenes.Nature，1992，359:554.
基金项目:黑龙江省自然科学基金资助项目
作者单位:157011黑龙江省牡丹江市利健医院泌尿外科
哈尔滨医科大学第一临床医院泌尿外科