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关键词 超声检查 妊娠 胎儿 肝脏 超微结构
Effects of diagnostic ultrasonic wave on the ultrastructure of the fetal liver of second trimester of pregnancy
Feng Zeping，Wu Lianlian，Chen Hui.
The Third Hospital of Changsha，Hunan410002.
【Abstract】 Objective To determine whether diagnostic ultrasound wave irradiations do harm to the fetus of second trimester of pregnancy and to establish the safe threshold dose.Methods 36pregnant cases were randomly diˉvided into4groups:Ⅰfor control，ⅡⅢⅣwere irradiated on the fetal liver before artificial abortion for5，10，30min respectively.All the samples were examined48hours later to observe the effects made on the ultrastructure of the fetal liver.Results GroupⅣwere found that partial mitochondria of the liver cell expanded，swelled and mitochondria crest disappeared and vacuolated，no changes were found in groupⅡ，Ⅲ.Conclusion Loeal irradiaton less than10min is harmless to the ultrastrueture of fetal liver. Key words ultrasound examination pregnancy fetus liver ultrastrueture
目前诊断用超声在产科检查中有无生物效应的研究内容，从胎儿发育环境（绒毛组织）至胎儿本身部分器官研究层次有一些报道 ［1～5］ 。但对诊断用超声对中孕宫内胎儿肝脏组织细胞超微结构研究未见有报道。本实验采用诊断超声经孕妇腹部定点持续辐射宫内胎儿肝脏组织，然后取出胎儿肝脏组织进行光镜与电镜超微结构研究，探讨诊断用超声对中孕宫内胎儿肝脏组织细胞有无超微结构影响。为建立诊断用超声在产科检查的安全阈值剂量提供不同组织细胞学实验数据。
1 资料与方法
1.1 对象 选择年龄19～36岁，平均年龄26.5岁，妊娠16～28周，平均孕周为22.5周，拟行人工水囊引产术的健康孕妇36例，孕期均无用药史，无烟酒嗜好及有害理化因素接触史，无流产及异常生育史，夫妇均健康，怀孕期间未接受过B超检查。
1.2 分组 将36例中孕妇女随机分4组，即Ⅰ组:正常对照组（未经超声照射取胎肝6例）;Ⅱ组:超声照射30min（取胎肝10例）;Ⅲ组:超声照射10min（取胎肝10例）;Ⅳ组:超声照射30min（取胎肝10例）。上述超声照射组均于照射后立即行人工水囊引产术后取材。
1.3 仪器 应用美国GERTFLV5型黑白超声诊断仪，探头频率3.5MHz，超声输出剂量4.5mW，输出超声波剂量0.5mW/cm 2 （由本市计量局测定）;应用电子显微镜日立H-600型电镜观察与照片，LKB-8800型
超薄刀片机切片。
1.4 方法 在孕妇腹部涂耦合剂，用3.5MHz凸阵探头移动扫查，找到宫内胎儿脊柱纵切再转入横断显示胎儿肝脏横断面，然后直接找到胎儿腹前壁脐根部的脐静脉，跟踪进入肝脏与门静脉交界处断面固定部位，定点照射，此部位距体表平均照射深度4.5cm，按分组定点持续照射后，立即在产科行水囊引产，一般在48h将胎儿引下，解剖被超声照射过的肝组织，分别制成光镜与电镜标本。电镜标本是将肝组织切成若干1mm 3 小块置于2.5%戊二醛溶液前固定，1%锇酸后固定，0.1M磷酸缓冲液漂洗，丙酮逐级脱水，EˉPON812封闭式包埋，醋酸铀和硝酸铝双重染色。光镜标本按组织学常规切片方法，10%甲醛固定，石蜡包埋，HE染色。
2 结果
2.1 光镜观察结果 4组中有3组经不同超声时间与剂量辐射的肝组织与正常对照组比较均显示各组的肝小叶结构清楚，肝细胞核大而圆，核仁明显、居中，胞浆嗜酸性、红染，肝小叶门管区中小叶间动脉、小叶间静脉、小叶间胆管结构清晰。
2.2 电镜观察结果 正常对照（Ⅰ）组均显示肝细胞大小形态正常，细胞核呈现圆形或卵圆形，核染色质结构清晰，细胞膜及核膜清晰，胞浆中线粒体结构清晰，内质网、溶酶体、高尔基复合体、核糖体结构均清晰（见图1），Ⅱ组与Ⅲ组肝细胞结构与正常对照比较均无明显超微结构改变，Ⅳ组每例与正常对照组比较均有不同程度的改变，表现为肝细胞内线粒体肿胀，嵴模糊，细胞核稍大，核染色质稍稀疏，其余超微结构无明显形态学改变（见图2），正常对照组与不同时间超声波辐射宫内胎儿肝细胞光镜与电镜结果比较见表1。图1 正常对照组显示，肝细胞正常超微结构与细胞核及核染色质均正常（×10000） 图2 Ⅳ组（超声照射30min），显示肝细胞内线粒体部分肿胀，嵴模糊，细胞核稍大，核染色质稍稀疏（×8000） 表1 不同时间与剂量超声辐射宫内胎儿肝脏光镜与电镜结果比较组别辐射时间
3 讨论
诊断超声辐射量对宫内胎儿细胞的敏感性。研究结果证明，诊断用超声辐射中期妊娠宫内胎儿肝组织细胞持续照射10min以内与正常对照组比较肝细胞超微结构无改变，说明正在发育完善及新生娇嫩的细胞器及结构，在一定的剂量与时间的范围内不敏感性或无损伤性。当持续照射30min时，全组均有肝细胞超微结构的部分改变，表现在线粒体的形态结构上，而且只有线粒体肿胀，嵴模糊，其它细胞器、细胞膜、细胞核均无形态学改变，说明肝细胞内线粒体对超声波敏感性较高，这种敏感程度与诊断用超声波的时间长短与剂量大小密不可分。从笔者以往的研究报道来看 ［1～5］ :诊断用超声波对中孕宫内胎儿卵母细胞、精原细胞、垂体细胞、心肌细胞、肾细胞研究结果表明:持续照射30min均有各种细胞线粒体不同程度改变外，还有其它形态学改变，如严重一些有卵母细胞及精原细胞，其次是垂体细胞及心肌细胞和肾细胞，最轻微的是肝细胞，这些细胞不同程度的形态学改变，也是证明宫内胎儿这些不同细胞对诊断用超声辐射所产生的生物效应敏感性上存在着差异。人类细胞与小动物细胞更是存在着明显的差异。这与王锦惠 ［6］ 等用彩色多普勒对小鼠早孕胚胎细胞超微结构研究就证明了这一点。人类细胞与小动物细胞，从细胞的功能结构、物质能量代谢、分裂周期及对内源性防护物质储存上都存在较大的差异，因而对超声波生物效应敏感性上就存在较大的差异。
辐射剂量与细胞超微结构改变的量效关系:研究结果表明，超声输出剂量在0.5mW/cm 2 ，时间持续照射5～10min时，肝细胞超微结构无形态学改变，但持续照射30min时对宫内胎儿的肝细胞有超微结构形态学轻微改变，证明了诊断用超声产生的生物效应的大小与其辐射的时间和剂量密切相关。如辐射时间长或剂量大，超声的生物效应就可能产生，本研究在一定超声输出剂量下，在同一条件取材下，设立几组不同超声波辐射时间，对宫内胎儿肝组织细胞超微结构有无改变的不同结果，可以证明超声波辐射的物理剂量，也是可以客观、实际地评估超声波生物效应的物理量，为建立超声在产科应用安全防护阈值提供依据。为此，超声在产科作为产前检查工具，要特别注意几点:早孕期间应尽量避免超声检查，如有指征需要做超声检查，要禁用彩多色普勒观察胚胎及原始心管搏动，一般使用黑白超声为宜，要选用有经验、操作熟练医师观察，不要在胚囊及胚芽切面上使用聚焦，时间应控制在1min之内;中、晚孕期间，应坚持短时间、小剂量、少次数的原则，每位孕妇检查时间应控制在10min内，在每一切面层次上停留不宜过长，慎重使用彩色多普勒超声;在生殖医学实践中，使用经阴道超声监测排卵与取卵作“试管婴儿”时，应特别慎重，更不能用经阴道彩色多普勒仪观察排卵与取卵，因为新生命从一个细胞开始，如果超声波影响到了这个开始的新生命细胞，那人们是难以接受或不能容忍的。
参考文献
1 冯泽平，陈辉，吴连连，等.诊断超声对中孕宫内胎儿卵巢超微结果影响的研究.中国超声医学杂志，1997，13（12）:43-46.
2 冯泽平，陈辉，吴连连，等.诊断超声对中孕宫内胎儿睾丸超微 结构影响的研究.中国超声医学杂志，1996，12（5）:12-14.
3 冯泽平，陈辉，吴连连，等.诊断超声对宫内胎儿心脏超微结构影响的研究.中国超声医学杂志，1999，15（10）:761-763.
4 冯泽平，陈辉，吴连连，等.诊断超声对宫内胎儿垂体超微结构影响的研究.中国超声医学杂志，1998，14（11）:3-5.
5 冯泽平，陈辉，吴连连，等.诊断超声对宫内胎儿肾脏超微结构影响的研究.中国超声医学杂志，2002，18（3）:175-177.
6 王锦惠，刘立民，魏睿，等.诊断剂量彩色多普勒超声对小白鼠早孕胚胎组织细胞安全性的影响.中国超声医学杂志，2002，18（8）:578-581.