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【关键词】 时辰 针灸 胃电 胃泌素
由于人生在大自然，人与自然界息息相关，故祖国医学十分重视“因时制宜”，这在针灸临床中体现得更为突出。《素问·八正神明论》:“凡刺之法，必候日月星辰，四时八正之气，气定乃刺之”。现代时间治疗学基于生物学的原理，提出根据机体生理和病理节律的特点以及治疗方法本身时间节律的特点，制定最适时间的治疗方案，以期收到最佳效果。由此可见，时间的变化与机体的功能状态、治疗的效果有一定的联系，本文通过实验探讨时间与针灸疗效的相关性，并对祖国医学关于时间治疗规律作初步探讨。
1 材料与方法
1.1 实验动物 清洁级SD大鼠54只，每只300g左右，雌性，由广州中医药大学实验动物中心提供。大鼠“足三里”取穴参考李忠仁主编《实验针灸学》:膝关节后外侧，在腓骨小头下约5mm处。
1.2 主要仪器及试剂 低速普通离心机（LDZ5-2型），BL-420生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司生产），3%戊巴比妥，15%乙醇，30号1寸针灸针。
1.3 模型的制备 参考徐淑云等主编的《药理实验方法学》急性胃炎及应激性胃溃疡造模方法（阿司匹林、醋酸、盐酸、乙醇灌服法）于实验前8.5h造模。具体方法:取体重300g左右的大白鼠，造模前禁食24h，在清醒状态下，分别用15%的乙醇2ml/只灌胃，4h后即可见胃部急性弥漫性炎症病变。
1.4 分组及处理方法 将54只SD大鼠随机分为辰时组、己时组、酉时组三组，每组18只，再将各组18只SD大鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组、空白对照组各三组，每组6只;即完成最终分组后共为9组，分别为:辰时针刺治疗组、辰时模型对照组、辰时空白对照组，己时组分为:己时针刺治疗组、己时模型对照组、己时空白对照组，酉时组分为:酉时针刺治疗组、酉时模型对照组、酉时空白对照组。针刺治疗组及模型对照组于实验前8.5h进行急性胃炎造模备用，同时，空白对照组予蒸馏水2ml/只灌胃;实验中，各组大鼠均以1.5%戊巴比妥1ml腹腔注射麻醉，麻醉成功后，针刺治疗组予以针刺治疗，07:30开始针刺辰时治疗组;09:30开始针刺己时治疗组;17:30开始针刺酉时治疗组，每组针刺30min，每隔10min施以提插补法1min（针刺及行针均由一人完成），治疗完毕20min后予记录胃电图3min，完毕后取血备用;模型对照组及空白对照组不予治疗，于各自时辰内记录胃电图后取血备用。
1.5 观察指标及检测方法
1.5.1 观察指标 各个时辰各组大鼠胃电及血清胃泌素水平。
1.5.2 检测方法 胃电图检测方法:大鼠麻醉成功后，打开腹腔，暴露胃部，以胃电图导联仪相关电极夹于胃体部，无关电极夹于胃窦部，即可检测胃电，相关参数:放大倍数（G）为5000，时间（T）为0.01s，频率（F）为100Hz，连续波。血清胃泌素检测:眼眶取血后（针刺治疗组均在针刺结束后10min取血）将血液离心，取上层血清以放射免疫分析法检测胃泌素浓度，由广州中医药大学核医学实验室检测。胃泌素试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供，严格按说明书操作。
1.5.3 仪器 采用上海日环仪器一厂SN-695B型放免r测量仪。
1.6 实验数据处理方法 先经F检验后，再予t检验。
2 实验结果
2.1 针刺双侧足三里穴对胃电的影响
2.1.1 对基本电节率幅度的影响 实验结果（表1）表明，针刺大鼠双侧足三里穴对麻醉状态下大鼠的胃电幅值有一定影响。总体上，造模后大鼠胃电基本节率幅度较空白对照组（正常大鼠）降低，且存在明显差别（P<0.05），而针刺治疗后，与空白对照组则无明显差别（P>0.05），但与模型对照之间存在明显差别（P<0.05），说明针刺可使急性胃炎而致的胃电基本节率紊乱的电节率恢复正常。而各时辰之间及与模型对照、空白对照相比则无明显差异，说明针刺对大鼠胃电幅值无明显影响。由此可见，针刺治疗对大鼠胃电幅值的影响不存在时辰的差异性。
表1 针刺对大鼠胃电幅值变化 （略）
2.1.2 对胃电收缩波频率的影响 实验结果（表2）表明，针刺大鼠双侧足三里穴对麻醉状态下大鼠的胃电收缩波频率存在明显影响。模型对照与空白对照之间在不同时辰（辰时、己时、酉时），胃电收缩波频率均无明显变化（P>0.05），而针刺治疗后，辰时组及己时组则有明显变化（P均<0.01），说明该效应（大鼠胃电收缩波频率增强）是由针刺引起的;并且辰时针刺治疗组的胃电收缩波频率与己时针刺治疗组、酉时针刺治疗组均存在显著差别（P均<0.01），表明辰时针刺足三里穴对大鼠胃电胃电收缩波频率影响较其它两个时辰较明显，己时次之;酉时组在针刺后与模型对照、空白对照无明显差别（P>0.05），说明酉时针刺对大鼠胃电收缩波频率无明显影响。由此可见，针刺治疗对大鼠胃电收缩波频率的影响存在治疗时间上的差异性。而在酉时，模型对照、空白对照的胃电收缩波频率与辰时、己时比较，存在明显差别（P<0.05）。这可能与酉时这一时辰大鼠所处的麻醉状态（较前两组浅）有关。
表2 针刺对大鼠胃电收缩波频率变化 （略）
2.2 针刺双侧足三里穴对血清胃泌素的影响 总体而言，针刺对麻醉状态下大鼠血清胃泌素，从均数上比较是有降低的，但不具有统计学意义（P>0.05），而辰时及己时针刺对麻醉状态下大鼠血清胃泌素，从均数上比较是有降低的，亦不具有统计学意义（P>0.05但P<0.07），酉时针刺，则可明显降低血清胃泌素水平（P<0.05）。这可能与酉时大鼠的麻醉状态有关。见表3。
表3 针刺对大鼠血清胃泌素影响 （略）
3 讨论
3.1 针刺在治疗效应上存在时间上的差异性 胃肠平滑肌的电活动包含基本电节律和动作电位两种形式已为大家公认，大鼠平滑肌也是如此。目前，有关胃电的起源和离子基础虽然还未完全阐明，但胃电作为胃运动功能的一种指标已为大家所接受 ［1］ ，另外，针刺胃经下合穴“足三里”对胃肠的影响在众多研究报道和临床实践中均已证实，因此，用胃电活动作为指标，观察不同时辰针刺大鼠足三里穴对急性胃炎大鼠胃电活动变化来评价不同时辰针刺效应的差异性是可取的。乙醇可破坏胃黏膜屏障作用，使黏膜渗透性增强，H + 逆向弥散进入黏膜，抑制胃黏液及HCO 3- 的分泌，从而影响了参与胃电基本节律的Na + 、K + 等离子的正常转运，使黏膜动作电位降低，胃电不规则或幅值下降，出现胃动力不足的临床表现 ［2］ 。实验中，我们根据祖国医学的经络理论和脏象学说关于“十二经脉者，内属脏腑，外络肢节”的理论指导，采用“循经取穴”的原则，取胃经下合穴“足三里”对急性胃炎大鼠模型的治疗。实验结果表明:针刺可使紊乱的胃电节律恢复正常，并可使胃电收缩波频率加快，从而加强胃的蠕动，以对抗急性胃炎引起胃电的紊乱。另外，本实验还发现，针刺治疗对大鼠胃电收缩波频率的影响存在治疗时间上的差异性，且以辰时治疗对大鼠胃电收缩波频率的影响较为显著，己时次之，酉时则无明显影响。这与祖国医学中十二经气于十二时辰按“肺寅大卯胃辰宫，己脾心午小未中，申膀酉肾心包戌，亥焦子胆丑肝通”的顺序行旺于十二经脉，即以辰时行旺于胃经的观点在治疗上有相合之处。在实验中，我们于己时针刺大鼠足三里穴，发现针刺对大鼠胃电收缩波频率亦存在显著影响，但较辰时弱，而在酉时（肾经行旺时间）针刺，则对胃电收缩波频率无明显影响，这可能与足阳明胃经与足太阴脾经相表里，而肾经与胃经无直接联系，当脾经行旺时，针刺足三里穴可影响胃电节率，肾经行旺时，针刺足三里穴则无明显效应。由此可见，祖国医学关于经络与脏腑相关，经络气血的生理等理论具有一定的科学性，在临床治疗中有一定的指导意义。
3.2 针刺对胃泌素的影响 胃泌素是一种重要的胃肠激素，主要由G细胞分泌。G细胞以胃窦部最多，胃底、十二指肠和空肠处亦有少量分布。胃泌素的作用主要是刺激胃酸分泌，并能促进胃肠道黏膜（尤其是胃泌酸区黏膜）的生长和刺激胃肠胰蛋白质、RNA、DNA合成增加;而在刺激酸分泌的阈下剂量，胃泌素可刺激胃窦部运动 ［2］ 。众多研究报道均显示:针刺足三里穴可影响血清胃泌素水平。有学者通过观察针刺足三里穴对血清胃泌素含量的影响，发现针刺足三里穴可以使血清胃泌素含量减少 ［3］ ;周氏 ［4］ 等则观察到电针足三里穴可使胃液、血清中胃泌素下降，利于抑制胃酸的分泌;而苏氏 ［5］ 观察观到的结果刚好相反，认为针刺足三里可使血清胃泌素含量明显升高;另外，有报道指出，采用提插手法刺激足三里穴较捻转手法使新西兰兔血浆胃泌素分泌增加更加明显，并认为不同针刺方法或手法，甚至不同刺激参数对血浆胃泌素含量的影响都不同 ［6］ 。我们在实验中同样亦观察到针刺足三里穴可使急性胃炎模型大鼠血清胃泌素降低。虽无统计学意义，这可能与我们实验有关，因为实验中，大鼠处于麻醉状态，各项生命活动低下，而胃泌素的分泌与体液因素有关 ［2］ ，并且针刺后10min立即取血，未达到最高的血清胃泌素浓度，故针刺后未见血清胃泌素明显的降低，使实验结果不具统计学意义，而在酉时组则见血清胃泌素有明显降低，因该时辰大鼠处于较辰时、己时清醒，对针刺较敏感有关，从而引起血清胃泌素降低。故我们认为，针刺足三里穴可引起急性胃炎大鼠血清胃泌素浓度降低，并且针刺引起血清胃泌素的升高或降低，与机体所处的状态有关，因为针刺的机制在于良性调整，具有双向性调节作用，而对于急性胃炎大鼠而言，针刺可使血清胃泌素含量降低。
参考文献
1 张经济.关于胃电的研究.生理科学进展，1979，10（4）:312-317.
2 周吕.胃肠生理学———基础与临床，北京:科学出版社，1991，63-72，217，102-103.
3 石光清，丁纯志，肖明.针刺足三里穴对血清胃泌素含量的影响.中国中西医结合杂志，2000，20（1）:49-50.
4 周国平，严洁，常小荣，等.电针足三里对胃黏膜损伤家兔前列腺素E胃泌素水平的影响.中国中医药科技，2004，11（1）:1-2.
5 苏薇薇.针刺对血浆胃肠激素和胃分泌机能的影响.中西医结合杂志，1994，14（2）:709.
6 张宏，唐纯志、陈永萍，等.提插、捻转法针刺足三里对新西兰兔胃电和血浆胃泌素、cAMP、cGMP的影响.广州中医药大学学报，2002，19（2）:112-114.
作者单位:510405广州中医药大学针灸推拿学院