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【摘要】 目的 探讨宫颈沙眼衣原体（CT）感染对生育的影响。方法 应用聚合酶链反应（PCR）技术，对800对不孕夫妇宫颈分泌物、尿道分泌物进行CT－DNA检测，并观察宫颈CT感染对围排卵期宫颈黏液葡萄糖含量及性交后试验的影响。结果 800对不孕夫妇衣原体感染的阳性率分别为：女31.2%;男30.1%。宫颈CT感染妇女围排卵期性交后试验与未感染的妇女比较，每高倍镜视野的活精数明显减少（P＜0.05），围排卵期宫颈黏液葡萄糖含量明显减少（P＜0.01）。经治疗后宫颈CT转阴的妇女，围排卵期性交后试验每高倍镜视野的活精数明显高于治疗前（P＜0.05），宫颈黏液的葡萄糖亦明显高于治疗前（P＜0.01）。治疗后宫颈CT持续阳性妇女，围排卵期性交后试验与治疗前比较，每高倍镜视野的活精数无明显变化（P＞0.05），宫颈黏液的葡萄糖亦无明显变化（P＞0.05）。结论 宫颈CT－DNA感染是不孕的一个重要因素，导致不孕的原因，可能与患者宫颈黏液葡萄糖含量降低，影响精子在宫颈黏液中的活力有关。
【关键词】 不孕；沙眼衣原体 ；聚合酶链反应； 性交后试验
沙眼衣原体（chlamydia trachomatis，CT）感染是盆腔炎及非淋菌性尿道炎的主要病原体，衣原体感染是导致不孕和不育的原因之一［1～5］。为探讨宫颈CT感染与生育的关系，笔者应用聚合酶链反应（polymerase chain reachtion，PCR）方法，对不孕夫妇宫颈分泌物和尿道分泌物进行CT－DNA检测并治疗，同时观察宫颈CT－DNA感染的妇女，治疗前后围排卵期宫颈黏液葡萄糖含量及性交后试验的变化，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象 为2003年1月～2005年2月，来我院不孕门诊就诊的不孕夫妇共800对，其中原发性不孕482对，继发性不孕318对。月经周期正常的不孕妇女342例，月经周期不正常的妇女458例。年龄范围，女23～41岁，男25～43岁。女性查体：阴道分泌物未见滴虫和霉菌，宫颈光滑，子宫正常大小，宫颈黏液抗精子抗体阴性，近3个周期内曾行输卵造影或输卵管通液试验，显示至少有一侧输卵管通畅。每一月经周期由B超、LH峰值和宫颈黏液评分来观察卵泡发育和排卵情况。男性查体：精子计数大于4000万／ml，活动率大于60％，量2～4ml，畸形精子小于20％，液化良好，精子活力a+b>40％。
1.2 标准采集与检测
1.2.1 标本采集 女性患者用无菌棉拭子，插入宫颈内1～2cm，向同一方向旋转10s，取宫颈分泌物，男性患者用无菌棉拭子，插入尿道口内1cm，向同一方向旋转10s，取尿道分泌物检测，标本保存于－20℃冰箱待测。
1.2.2 PCR方法检测CT－DNA 试剂盒由上海复生生物工程研究所提供。严格按试剂盒说明书操作步骤，由专人操作。所用仪器为：Line-gene荧光定量PCR检测系统，型号：FQD－33A。
1.3 治疗方法 对宫颈CT－DNA阳性者，夫妇双方同时服用药物治疗，所用药物有红霉素、四环素和交沙霉素等剂量为500mg，每日分3～4次口服，治疗7天，停药7天复查宫颈CT－DNA。
1.4 葡萄糖含量测定 采用葡萄糖氧化酶-过氧化物比色测定法。
1.5 性交后试验 每对夫妇均于B超显示优势卵泡直径大于18mm，宫颈黏液评8分以上时行性交后试验，性交后2～3h取宫颈黏液，制片观察不同区域10个高倍镜视野的活精数，计算出每高倍镜视野的活精数。
1.6 统计学处理 记数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验。
2 结果
2.1 800对不孕夫妇宫颈和尿道分泌物CT－DNA的检测结果见表1。
表1 800对不孕夫妇宫颈及尿道分泌物CT－DNA感染情况（略）
注：χ2=0.265，P＞0.05
表1中，不孕夫妇CT－DNA感染的阳性率分别为32.3％、30.1％，同时发现，241例尿道分泌物CT－DNA阳性的男性，其妻子宫颈分泌物CT－DNA均呈阳性；而18例宫颈分泌物CT－DNA阳性的女性其丈夫的尿道分泌物未见CT－DNA感染。
2.2 259例宫颈分泌物CT－DNA阳性的不孕妇女，围排卵期性交后试验及宫颈黏液的葡萄糖含量与541例宫颈分泌物CT－DNA阴性妇女比较，结果见表2。
表2 CT－DNA阳性妇女性交后试验与葡萄糖含量结果（略）
注：χ2=6.29，P＜0.05，P＜0.01
2.3 259例宫颈分泌物CT－DNA阳性的不孕妇女，治疗后有192例（74.2%）转阴，转阴后的192例不孕妇女，围排卵期重复性交后试验及宫颈黏液的葡萄糖含量测定，结果见表3。
表3 治疗后CT－DNA转阴的妇女性交后试验及葡萄糖含量（略）
注：χ2=6.02，P＜0.05，P＜0.01
2.4 治疗后67例（25.8%）不孕妇女，宫颈分泌物CT－DNA持续阳性，围排卵期重复性交后试验及宫颈黏液的葡萄糖含量测定，结果见表4。
表4 治疗后CT－DNA持续阳性妇女性交后试验及葡萄糖含量（略）
注：χ2=1.16，P＞0.05，P＞0.05
3 讨论
沙眼衣原体是非淋菌性泌尿生殖道炎症的主要病原体，衣原体在宿主细胞内生长繁殖，有小而致密的原体和大而疏松的始体两种不同的颗粒，原体在宿主细胞外较稳定，无繁殖能力，但感染性强，侵入宿主细胞后，逐渐发育成始体，以分裂方式繁殖，但无感染性，发育成熟的子代原体从破坏的感染细胞中释出，再感染新的易感细胞，从而导致一系列病理变化。
本研究发现，不孕妇女宫颈CT－DNA感染的阳性率为31.2%，其丈夫尿道分泌物的感染率为30.1%，经统计学处理，夫妇双方感染率无明显差异（P＞0.05），说明夫妇双方只要有一方感染，对方感染的可能性很大，因而治疗时必双方同时服药。本文所得女性宫颈CT－DNA感染的阳性率，与国外不孕病人生殖道沙眼衣原体感染的发生率24％～31％［2，3］及国内报道不孕妇女宫颈衣原体感染率26％～31.3%［3，4］相近，说明不孕妇女宫颈衣原体感染是一个不可忽视的问题。
目前，国内研究较多的是CT感染在输卵管性不孕及不育症中的作用，认为沙眼衣原体能产生内毒素，这种毒素导致生殖道的炎症粘连和阻塞［5］，引起不孕和异位妊娠。本研究发现输卵管通畅的不孕病人，宫颈CT－DNA感染时围排卵期性交后试验与未感染妇女比较，每高倍镜视镜视野的活精数明显减少（P＜0.05），宫颈黏液的葡萄糖含量明显降低（P＜0.01）。经治疗后宫颈CT－DNA转阴的妇女，围排卵期性交后试验，每高倍镜视镜视野的活精数较治疗前明显增多（P＜0.05），宫颈黏液的葡萄糖含量明显增加（P＜0.01）。治疗后宫颈CT－DNA持续阳性的妇女，围排卵期性交后试验，每高倍镜视镜视野的活精数较治疗前无明显变化（P＞0.05），宫颈黏液的葡萄糖含量亦无明显变化（P＞0.05）。说明不孕妇女宫颈CT－DNA感染，降低宫颈黏液的葡萄糖含量，并影响精子妇女在宫颈管中的活动，体外试验［6］表明，精子存活与宫颈黏液中的葡萄糖含量有关，宫颈黏液中葡萄糖含量低，可解释某些原因不明不孕。沙眼衣原体侵入宫颈时，利用宫颈黏液的葡萄糖合成糖原，以供自身繁殖［7］，从而使宫颈黏液中的葡萄糖含量降低。我们认为：宫颈CT－DNA感染引起不孕的原因，可能是感染CT后宫颈黏液中的葡萄糖含量降低，影响宫颈中精子的活动所致。所以，对不孕夫妇常规行衣原体检查并治疗，是治疗不孕一个不容忽视的步骤［8，9］。
【参考文献】
1 Gates W Jr， Wadderheit JN. Genitl Chalmgdial infection：epidemiology and reproductive sequelac.Am J Obstet Gynecol，1991，164：1771-1781.
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3 Lucisano A， Morandotti G，Marana R，et al.Chlamydial genitalInfection and Caparoscopic findings in infertile women Eur J Epidemiol，1993，8：645.
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9 郝翠芳.不孕妇女宫颈沙眼衣原体感染的临床观察.实用妇产科杂志，2002，18（3）：183－184.
(编辑：黄 杰)
作者单位：528000 广东佛山，佛山市顺德区龙江医院妇产科