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【摘要】 目的 分析乙肝前S1抗原（PreS1-Ag）与HBV血清标志物和HBV-DNA的关系，进一步探明PreS1-Ag在乙肝的诊断价值和临床意义。方法 用酶联免疫法（ELISA）检测2835例乙肝患者血清HBV-M和PreS1-Ag，用荧光定量PCR法同时检测HBV-DNA。结果 对HBV血清标志物6种模式进行分析，模式①中，PreS1-Ag阳性率81.82%，HBV-DNA阳性率92.03%，代表病毒高复制，传染性强，与HBeAg呈明显的正相关性，三者间差异无显著性（χ2＝1.62，P＞0.05）。模式②中PreS1-Ag阳性率48.482%，HBV-DNA阳性率39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制。1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P＜0.01)，说明PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。结论 PreS1-Ag能敏感地反映乙肝病毒的复制，与HBV-DNA的一致性较好，尤其可以反映HBeAg阴性的乙肝患者体内病毒的复制情况，在乙肝诊断和治疗中具有重要临床意义。
【关键词】 前S1抗原（PreS1-Ag）；HBV-DNA；乙肝模式；相关性
乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原基因组分别编码前S1、前S2和S三种主要蛋白，前S1抗原（PreS1-Ag）由108或119个氨基酸残基组成［1］，位于乙肝病毒外壳的最外面，具有高度的免疫原性，PreS1-Ag含有肝细胞膜受体，在乙肝病毒附着和侵入人体肝细胞的过程中起重要作用，并作为反映乙肝病毒在体内复制的重要标志物，与HBeAg和HBV-DNA有密切相关性。为进一步探明PreS1-Ag在乙肝的诊断价值和临床意义，笔者选定2835例HBsAg阳性的乙肝患者（6种模式）进行了血清HBV-M、HBV-DNA、PreS1-Ag联合检测和分析，现将结果报道如下。
1 对象与方法
1.1 标本来源
所有标本均来自于2004年5月～2005年4月本院肝病门诊就诊及住院的乙型肝炎患者2835例，其中男1862例，女973例，均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的“病毒性肝炎防治方案”中的病毒性肝炎诊断标准。健康对照150例，均来自本院体检中心，HBV-M检测全阴。
1.2 试剂和方法
乙肝血清标志物HBV-M检测试剂盒购自上海科华实业生物技术有限公司，采用ELISA法，按说明书操作，乙肝标志物按检验的顺序设定(1)HBsAg；(2)HBsAb；(3)HBeAg；(4)HBeAb；(5)HBcAb。PreS1-Ag检测试剂盒购自中科院上海阿尔法生物技术有限公司，采用ELISA法，按说明书操作。HBV-DNA检测试剂盒购自广州中山大学达安股份有限公司，采用荧光定量PCR法，PCR仪为大和Line-gene实时荧光定量分析仪，HBV-DNA阳性值为>1.0×103Copies/ml。
1.3 统计学处理
采用χ2检验和Kappa检验进行统计学分析。
2 结果
2.1 2835例乙肝患者6种乙肝模式与PreS1-Ag和HBV-DNA的检测结果
见表1。模式①中PreS1-Ag阳性率81.82%，HBV-DNA阳性率92.03%，代表病毒高复制，传染性强，与HBeAg呈明显的正相关性，三者间差异无显著性（χ2＝1.62，P＞0.05）。模式②中PreS1-Ag阳性率48.48%，HBV-DNA阳性率39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制，因此临床上不能仅依据HBeAg是否阳性来判断病毒的复制情况。模式④⑤⑥中，由于病毒复制低，传染性弱，PreS1-Ag和HBV-DNA阳性率呈现不同下降,与模式①差异有显著性（χ2＝54.37，P＜0.01）。150例HBV-M全阴对照组血清中PreS1-Ag和 HBV-DNA检测均阴性。
表1 6种乙肝模式与PreS1-Ag和HBV-DNA的检测结果（略）
2.2 PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA的检测结果
见表2。作为乙肝病毒成分的三种标志物，PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA即相互关联，又各具有独立性。PreS1-Ag阳性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（54.18％，82.51％）明显高于PreS1-Ag阴性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（16.81％，22.91％），说明PreS1-Ag与HBV的存在和复制密切相关，对乙肝的诊断起重要补充作用。1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P<0.01)，说明PreS1-Ag与HBeAg和HBV-DNA之间检测结果不一致，PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。
表2 PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA的关系（略）
3 讨论
前S1抗原（PreS1-Ag）是乙型肝炎病毒（HBV）外壳蛋白，它含有肝细胞受体，在HBV感染细胞和机体免疫应答方面起重要作用。在病毒感染机体的整个周期中，前S1蛋白的独特功能，使其能够较充分反映机体的体液免疫状况，直至病程的转归过程［2］。以往研究认为HBeAg、HBV-DNA是反映乙肝病毒复制的标志，近年来，PreS1-Ag作为HBV血清学的新标志物显示出很高的临床应用价值，PreS1-Ag的持续存在表明有病毒复制和病毒颗粒存在。在本实验中2835例乙肝患者其乙肝病毒三种成分PreS1-Ag、HBeAg、HBV-DNA阳性检出率分别为54.89％、44.36％、55.62％, 说明PreS1-Ag和HBeAg、HBV-DNA有较好的一致性,在判断乙肝病毒的复制方面有同样的诊断价值。实验模式①中，PreS1-Ag阳性率和HBV-DNA为81.82%和92.03%，与HBeAg呈明显的正相关性,代表病毒处于高复制、传染性强。
Pichoud等［3］发现部分患者抗HBe阳转后，病毒在体内仍继续复制，病情较重，其中部分可以演变为肝硬化或肝癌，自然好转率非常低。原因是HBV为逃避宿主的免疫反应而发生前C区末端变异，导致HBeAg的不表达，在临床上出现HBeAg缺陷型的HBV血清模式，造成诊断和治疗的困难。本实验模式②中HBeAg阴性，抗HBe阳性，预示病毒复制减慢或终止，但PreS1-Ag和HBV-DNA阳性检出率为48.48%和39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制，临床上不能仅依据HBeAg是否阳性来判断病毒的复制情况。模式④中HBeAg阴性，PreS1-Ag和HBV-DNA阳性率为16.85%和19.66%，说明PreS1-Ag作为病毒感染、复制的指标较HBeAg敏感。因此，PreS1-Ag的检测弥补了因HBeAg阴性而影响了患者的诊断和治疗，对判断患者的病情和体内乙肝病毒的复制有很好的独立参考价值。
夏帮世等［4］报道，PreS1-Ag与HBV-DNA有较好的一致性，但又存在一定的交叉阳性和交叉阴性。PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA即相互关联，又各具有独立性，在不同的乙肝血清标志物中其阳性表达有很大差别，本实验中1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P＜0.01)，说明PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。PreS1-Ag虽然与HBV-DNA呈正相关并且符合率高［5］，但由于检测的成分和表达的意义不完全一致，因此不能等同或替代HBV-DNA的检测，在临床诊断中应充分依据两种指标的独立性和互补性来诊治患者。PreS1-Ag阳性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（54.18％，82.51％）明显高于PreS1-Ag阴性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（16.81％，22.91％），说明PreS1-Ag与HBV的存在和复制密切相关，对乙肝的诊断起重要补充作用。因此，加强PreS1-Ag的基础和临床应用研究，实现多种乙肝标志物的联合检测对诊断和治疗乙肝具有重要意义。
【参考文献】
1 黄学忠，吴祥，黄秀琴.乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义. 临床肝胆病杂志，2002，18（2）：33-34.
2 姚云清，张定风.乙型肝炎病毒感染、复制及其清除机制.中华肝胆病杂志，2002，10（5）：398-400.
3 Pichoud C,Berby F,Stuyver L,et al.Presistence ofviral replication ofter anti-HBe senoconversion during antiviral therapy for chronic hepatitis B.Jhepatol，2000,32:307-312.
4 夏帮世，沈忠海，马红松，等.慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA与肝功能的关系. 中华检验医学杂志，2004，27（9）：575-576.
5 陈松.血清前S1抗原检测的临床价值.中华实验和临床病毒学杂志，2003，17（3）：295-297.
作者单位： 464000 河南信阳，信阳市中心医院检验科
464000 河南信阳，信阳职业技术学院附属医院
(编辑：石 岚)
【摘要】 目的 分析乙肝前S1抗原（PreS1-Ag）与HBV血清标志物和HBV-DNA的关系，进一步探明PreS1-Ag在乙肝的诊断价值和临床意义。方法 用酶联免疫法（ELISA）检测2835例乙肝患者血清HBV-M和PreS1-Ag，用荧光定量PCR法同时检测HBV-DNA。结果 对HBV血清标志物6种模式进行分析，模式①中，PreS1-Ag阳性率81.82%，HBV-DNA阳性率92.03%，代表病毒高复制，传染性强，与HBeAg呈明显的正相关性，三者间差异无显著性（χ2＝1.62，P＞0.05）。模式②中PreS1-Ag阳性率48.482%，HBV-DNA阳性率39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制。1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P＜0.01)，说明PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。结论 PreS1-Ag能敏感地反映乙肝病毒的复制，与HBV-DNA的一致性较好，尤其可以反映HBeAg阴性的乙肝患者体内病毒的复制情况，在乙肝诊断和治疗中具有重要临床意义。
【关键词】 前S1抗原（PreS1-Ag）；HBV-DNA；乙肝模式；相关性
【中图分类号】 R446.61；R512.6+2
乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原基因组分别编码前S1、前S2和S三种主要蛋白，前S1抗原（PreS1-Ag）由108或119个氨基酸残基组成［1］，位于乙肝病毒外壳的最外面，具有高度的免疫原性，PreS1-Ag含有肝细胞膜受体，在乙肝病毒附着和侵入人体肝细胞的过程中起重要作用，并作为反映乙肝病毒在体内复制的重要标志物，与HBeAg和HBV-DNA有密切相关性。为进一步探明PreS1-Ag在乙肝的诊断价值和临床意义，笔者选定2835例HBsAg阳性的乙肝患者（6种模式）进行了血清HBV-M、HBV-DNA、PreS1-Ag联合检测和分析，现将结果报道如下。
1 对象与方法
1.1 标本来源
所有标本均来自于2004年5月～2005年4月本院肝病门诊就诊及住院的乙型肝炎患者2835例，其中男1862例，女973例，均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的“病毒性肝炎防治方案”中的病毒性肝炎诊断标准。健康对照150例，均来自本院体检中心，HBV-M检测全阴。
1.2 试剂和方法
乙肝血清标志物HBV-M检测试剂盒购自上海科华实业生物技术有限公司，采用ELISA法，按说明书操作，乙肝标志物按检验的顺序设定(1)HBsAg；(2)HBsAb；(3)HBeAg；(4)HBeAb；(5)HBcAb。PreS1-Ag检测试剂盒购自中科院上海阿尔法生物技术有限公司，采用ELISA法，按说明书操作。HBV-DNA检测试剂盒购自广州中山大学达安股份有限公司，采用荧光定量PCR法，PCR仪为大和Line-gene实时荧光定量分析仪，HBV-DNA阳性值为>1.0×103Copies/ml。
1.3 统计学处理
采用χ2检验和Kappa检验进行统计学分析。
2 结果
2.1 2835例乙肝患者6种乙肝模式与PreS1-Ag和HBV-DNA的检测结果
见表1。模式①中PreS1-Ag阳性率81.82%，HBV-DNA阳性率92.03%，代表病毒高复制，传染性强，与HBeAg呈明显的正相关性，三者间差异无显著性（χ2＝1.62，P＞0.05）。模式②中PreS1-Ag阳性率48.48%，HBV-DNA阳性率39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制，因此临床上不能仅依据HBeAg是否阳性来判断病毒的复制情况。模式④⑤⑥中，由于病毒复制低，传染性弱，PreS1-Ag和HBV-DNA阳性率呈现不同下降,与模式①差异有显著性（χ2＝54.37，P＜0.01）。150例HBV-M全阴对照组血清中PreS1-Ag和 HBV-DNA检测均阴性。
表1 6种乙肝模式与PreS1-Ag和HBV-DNA的检测结果（略）
2.2 PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA的检测结果
见表2。作为乙肝病毒成分的三种标志物，PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA即相互关联，又各具有独立性。PreS1-Ag阳性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（54.18％，82.51％）明显高于PreS1-Ag阴性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（16.81％，22.91％），说明PreS1-Ag与HBV的存在和复制密切相关，对乙肝的诊断起重要补充作用。1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P<0.01)，说明PreS1-Ag与HBeAg和HBV-DNA之间检测结果不一致，PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。
表2 PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA的关系（略）
3 讨论
前S1抗原（PreS1-Ag）是乙型肝炎病毒（HBV）外壳蛋白，它含有肝细胞受体，在HBV感染细胞和机体免疫应答方面起重要作用。在病毒感染机体的整个周期中，前S1蛋白的独特功能，使其能够较充分反映机体的体液免疫状况，直至病程的转归过程［2］。以往研究认为HBeAg、HBV-DNA是反映乙肝病毒复制的标志，近年来，PreS1-Ag作为HBV血清学的新标志物显示出很高的临床应用价值，PreS1-Ag的持续存在表明有病毒复制和病毒颗粒存在。在本实验中2835例乙肝患者其乙肝病毒三种成分PreS1-Ag、HBeAg、HBV-DNA阳性检出率分别为54.89％、44.36％、55.62％, 说明PreS1-Ag和HBeAg、HBV-DNA有较好的一致性,在判断乙肝病毒的复制方面有同样的诊断价值。实验模式①中，PreS1-Ag阳性率和HBV-DNA为81.82%和92.03%，与HBeAg呈明显的正相关性,代表病毒处于高复制、传染性强。
Pichoud等［3］发现部分患者抗HBe阳转后，病毒在体内仍继续复制，病情较重，其中部分可以演变为肝硬化或肝癌，自然好转率非常低。原因是HBV为逃避宿主的免疫反应而发生前C区末端变异，导致HBeAg的不表达，在临床上出现HBeAg缺陷型的HBV血清模式，造成诊断和治疗的困难。本实验模式②中HBeAg阴性，抗HBe阳性，预示病毒复制减慢或终止，但PreS1-Ag和HBV-DNA阳性检出率为48.48%和39.92%，说明HBeAg阴性的患者仍存在着病毒复制，临床上不能仅依据HBeAg是否阳性来判断病毒的复制情况。模式④中HBeAg阴性，PreS1-Ag和HBV-DNA阳性率为16.85%和19.66%，说明PreS1-Ag作为病毒感染、复制的指标较HBeAg敏感。因此，PreS1-Ag的检测弥补了因HBeAg阴性而影响了患者的诊断和治疗，对判断患者的病情和体内乙肝病毒的复制有很好的独立参考价值。
夏帮世等［4］报道，PreS1-Ag与HBV-DNA有较好的一致性，但又存在一定的交叉阳性和交叉阴性。PreS1-Ag与HBeAg、HBV-DNA即相互关联，又各具有独立性，在不同的乙肝血清标志物中其阳性表达有很大差别，本实验中1556例PreS1-Ag阳性中HBV-DNA阳性率82.51％（1284/1556），HBeAg阳性率54.18％（843/1556），两者差异有显著性(χ2＝37.24，P＜0.01)，说明PreS1-Ag与HBV-DNA符合率较HBeAg高，在判断乙肝复制方面比HBeAg更有意义。PreS1-Ag虽然与HBV-DNA呈正相关并且符合率高［5］，但由于检测的成分和表达的意义不完全一致，因此不能等同或替代HBV-DNA的检测，在临床诊断中应充分依据两种指标的独立性和互补性来诊治患者。PreS1-Ag阳性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（54.18％，82.51％）明显高于PreS1-Ag阴性组中HBeAg和HBV-DNA阳性率（16.81％，22.91％），说明PreS1-Ag与HBV的存在和复制密切相关，对乙肝的诊断起重要补充作用。因此，加强PreS1-Ag的基础和临床应用研究，实现多种乙肝标志物的联合检测对诊断和治疗乙肝具有重要意义。
【参考文献】
1 黄学忠，吴祥，黄秀琴.乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义. 临床肝胆病杂志，2002，18（2）：33-34.
2 姚云清，张定风.乙型肝炎病毒感染、复制及其清除机制.中华肝胆病杂志，2002，10（5）：398-400.
3 Pichoud C,Berby F,Stuyver L,et al.Presistence ofviral replication ofter anti-HBe senoconversion during antiviral therapy for chronic hepatitis B.Jhepatol，2000,32:307-312.
4 夏帮世，沈忠海，马红松，等.慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA与肝功能的关系. 中华检验医学杂志，2004，27（9）：575-576.
5 陈松.血清前S1抗原检测的临床价值.中华实验和临床病毒学杂志，2003，17（3）：295-297.
作者单位： 464000 河南信阳，信阳市中心医院检验科
464000 河南信阳，信阳职业技术学院附属医院
(编辑：石 岚)