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Rh血型是人类红细胞血型系统中最为复杂、最具有多态性的系统,在临床输血中具有重要意义,D抗原分为阳性和阴性两大类,在常规血清学技术鉴定的Rh阴性者中,采用间接抗球蛋白试验(IAT)和吸收放散试验部分仍可检测出D抗原,即Du或Del。
1 对象与方法
1.1 对象 58例用单克隆抗-D检测为阴性的无偿献血者。
1.2 方法
1.2.1 Du型检测 Du型排除试验按试验规程[1]操作。
1.2.2 Del型检测 采用三氯甲烷/三氯乙烯吸收放散法。将经过5次充分洗涤的压积红细胞0.5ml分别加入8种抗D血清0.5ml;混匀37℃孵育30min,隔5min摇1次;然后洗涤5次,末次洗涤后弃尽上清液,加入与之等体积的生理盐水,再加入与之等量的三氯甲烷/三氯乙烯(1:1)混合液,盖振摇30秒,开盖后37℃水浴5min,离心3000 rpm 5min,取上层放散液100μl,加5%的“O”Rh(+)试剂红细胞50μl,37℃孵育30min,生理盐水洗涤3次,加最适稀释度抗球蛋白100μl,离心3000 rpm 15s观察结果,出现凝集者经重复试验验证后确定为Del型。
2 结果
2.1 Du型检测 58例初筛Rh阴性献血员经过Rh确证试验后52例为Rh阴性,6例为Du型,占10.8%。
2.2 Del型检测 52例Rh阴性献血员经过吸收放散试验后40例为Rh阴性,12例为Del型,占23.1%。
3 讨论
Rh血型是继ABO血型发现后临床意义最大的一个血型。D阴性在中国人中的比率约为0.2%~0.3%。大部分D阳性个体采用盐水法即可检出D抗原,但有很少一部分个体盐水法检测D抗原为阴性,只有用间接抗球蛋白试验才可检出,这些个体称为Du型。此外,在中国人D阴性人群中,若采用更敏感的方法如吸收放散试验检测,约20%~30%的个体仍可为D抗原阳性,为Del表型[2]。Du、Del都是弱D抗原,很容易漏检。Rh阴性的人被Du、Del抗原免疫致敏同样可以产生抗-D,导致溶血反应。对常规方法检定的RhD阴性个体,不但要排除Du型,而且要排除Del型,对安全输血非常重要,在无偿献血者中应进行间接抗球蛋白试验和吸收放散试验检测Du、Del型,以保证临床输血安全。
【参考文献】
1 李勇,杨贵贞.人类红细胞血型学使用理论与试验技术. 北京:中国科学技术出版社,1999,270-271.
2 Shao CP,Maas JH,Su YQ,et al. Molecular phenotypes in Chinese population. Vox Sang,2002,83(2):156-459.
作者单位: 266071 山东青岛,青岛市中心血站
(编辑:若 木)