2002～2005年我院临床常见细菌分离及耐药性分析

      2002～2005年我院临床常见细菌分离及耐药性分析(pdf)

　　【摘要】  目的  探讨我院2002～2005年临床分离菌株对抗菌药物的耐药情况。方法  细菌鉴定用手工法和美国BD公司BBL Crystal ENF鉴定系统鉴定。药物敏感试验采用纸片扩散法，耐药性数据分析采用WHONET5.3软件。结果  2002～2005年共分离出菌株4867株菌，革兰阴性菌2724株（占56.0%）。主要分离菌为大肠埃希菌、不动杆菌属、沙门菌属、嗜麦芽窄食单胞菌、克雷伯菌属、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、枸橼酸杆菌属。大肠埃希菌对IPM及CAZ的耐药率在10.0%以下，AMK的耐药率在20%以下，FOX、AMC在30%以下，MEM耐药率在40%以下，CIP的耐药率50％～78.8%，SAM、CTX、TIM、SCL、FEP的耐药性在60%以下，CN、SXT、TZP的耐药率低于80%。克雷伯菌属中IPM、CAZ的耐药率在10%以下，AMK的耐药率在20%以下，CN、FOX、FEP、MEM的耐药率在40%以下，CIP的耐药率21.7%～50.6%，SCF、CTX、SAM、SXT、TZP、PIP耐药均在80%以下，超广谱β－内酰胺酶（ESBLS）的发生率大肠埃希菌检出率为45.5%，高于克雷伯菌属44.6%以上，沙门菌属对CRO、LEV的耐药率为0，对AMP、CIP、CHL、SXT的耐药率在10%。不动杆菌属对IPM、AMK、FOX、AMC的耐药率在30%以下，对SCL、TIM的耐药率在60%以下，CIP、TZP、FEP、MEM耐药率在70%以下，嗜麦芽窄食单胞菌对IPM100%耐药，对SXT、CHL的耐药率在30%以下，CIP、TIM的耐药率在50%以下，TZP、CFP在70%以下。结论  4年中分离的致病菌以革兰阴性杆菌为主，肠杆菌科细菌分离率超过了非发酵菌，并且对耐药株的分离率、细菌对抗生素的耐药性呈逐年上升趋势，为此临床医师应合理使用抗菌药物以降低耐药性并采取有效措施控制耐药菌株的传播与流行非常重要。

　【关键词】  革兰阴性菌；超广谱β－内酰胺酶；细菌耐药性；抗生素

     The analysis of bacteria and their resistance to antibiotics：our hospital’s clinical isolates from 2002 to 2005

    ZHOU ling，LIU De-hua，　QIN Hai-yan，et al.The First People’s Hospital of Kunming，Kunming 650011，China

    【Abstract】  Objective  To find out the pathogens distribution and their drug resistance from 2002 to 2005 in our hospital.Methods  The BBL Crystal ENF were used to identify pathogens.Antimicrobial susceptibility testing was performed using Kirby－Bauer Method.The results of examination were judged according to NCCLs standard.The data were processed by WHONET 5.3.Results  Among the isolated 4867 strain pathogens，Gram－negative bacteria were 56.0%（n=2724），from high to low，the pathogens in turn were Escherichia coli，Acinetobacter，Salmonella，Stenotrophomonas maltophilia，Klebsiella，Pseudomomas aeruginosa，Enterobacter cloacae，Citrobacter.Escherichia coli showed the drug－resistant rate below 10% to both imipenem and ceftazidime;below 20% to amikacin;below 30% to both cefoxitin and amoxicillin/clavulanic acid;below 40% to meronem;50%～78.8% to ciprofloxacin;below 60% to ampicillin/sulbactam、cefotaxime、piperacillin/tazobactam、cefoperazone/sulbactam and cefepime;below 80% to gentamicin、trimethoprim/sulfamethoxazole and piperacillin/tazobactam.Klebsiella showed the drug－resistant rate below 10% to both imipenem and ceftazidime; below 20% to amikacin; below 40% to gentamicin、cefoxitin、cefepime and meronem; below 80% to ciprofloxacin、cefoperazone/sulbactam、cefotaxime、amppicillin/sulbactam、trimethoprim/sulfamethoxazole、piperacillin/tazobactam and piperacillin.The rate 45.5% of extended spectrum beta－lactamases（ESBLs）  of Escherichia coli is higher than that of  Klebsiella 44.6%.Salmonella  is susceptive to ceftriaxone and levofloxacin，it showed the drug－resistant rate 70% to ampicillin、ciprofloxacin、chloramphenicol and trimethoprim/sulfamethoxazole.Acinetobacter  showed the drug－resistant rate below 30% to imipenem、amikacin、cefoxitin and ampicillin/sulbactam;below 60% to cefoperazone/sulbactam and ticarcillin/clavulanic acid;below 20% to ciprofloxacin、piperacillin/tazobactam、cefepime and meronem.Stenotrophomonas maltophilia showed the drug－resistant rate 100% to imipenem;below 30% to chloramphenicol and trimethoprim/sulfamethoxazole;below 50% to ciprofloxacin and ticarcillin/clavulanic acid;below 70% to piperacillin/tazobactam and cefepime.Conclusion  Gram－negative bacilli were very prominent in pathogens of nosocomial infection.The detected rate of Enterobacteri－a－caae is higher than the other Gram－negative bacilli.The isolated rate of drug－resistant strains and the drug resistance rates were increased rapidly by years.It is very important to monitor the distribution of bacteria and their resistance to antibiotics.The drug－resistance study help to find out the sensitive drugs for clinical application，thus to bring down the growth of drug－resistance rate of bacteria.

    【Key words】  Gram－negative bacteria；extended spectrum beta－lactamases（ESBLs）；drug－resistance；antibiotics

    细菌耐药性的出现和传播严重影响人类健康，细菌耐药性带来治疗无效、感染加重甚至死亡［1］。由于抗生素的广泛应用，细菌的耐药性呈逐年上升趋势。了解近年来我院革兰阴性杆菌分离率及耐药情况，为临床合理使用抗生素提供可靠依据。现对我院2002年1月～2005年12月分离的2724株非重复革兰阴性杆菌的分离情况及耐药性进行回顾性分析。

　1  材料与方法

    1.1  菌株来源  为2002年1月～2005年12月我院门诊及住院病人送检的痰、血、尿、分泌物、脑脊液等各种标本中分离出的2724株革兰阴性杆菌。

    1.2  细菌鉴定  用手工法和美国BD公司BBL－CRYSTAL ENF鉴定系统鉴定。

    1.3  药物敏感试验  采用K－B（纸片扩散）法。药敏纸片和药敏培养基MH琼脂（英国Oxoid公司），广州乐通泰生物科技有限公司购置。阿米卡星（AMK）、庆大霉素（CN）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、头孢哌酮/舒巴坦（SCL）、替卡西林/棒酸（TIM）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、复方新诺明（SXT）、头孢噻肟（CTX）、头孢他啶（CAZ）、头孢哌酮（CFP）、头孢曲松（CRO）、氨曲南（ATM）、哌拉西林（PRL）、亚胺培南（IPM）、头孢吡肟（FEP）、头孢西丁（FOX）、左氧氟沙星（LEV）、美罗配能（MEM）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）。质控菌株大肠埃希菌ATIM25922、金黄色葡萄球菌ATIM25923、铜绿假单胞菌ATIM27853、大肠埃希菌ATIM35218购于卫生部临检中心。产超广谱β－内酰胺酶检测按CLSO/NCCLS颁布的检测方法，确证实验采用双纸片法，抗菌药物纸片为头孢噻肟/克拉维酸（30/10μg）和头孢他啶/克拉维酸（30/10ug）。

    1.4  分析方法  采用WHONET5.3软件对病人首次分离菌株进行耐药性数据分析。

　2  结果

    2002年1月～2005年12月，从我院门诊及住院病人送检标本共分离出革兰阴性杆菌2724株，2002～2005年主要阴性分离菌株见表1。表1  2002～2005年主要革兰阴性杆菌菌株数及耐药率    2002～2005年主要革兰阴性杆菌对多种抗生素的耐药性见表2、表3，沙门菌属的耐药情况见表4，不同年份大肠埃希菌、克雷伯菌产酸ESBLS的检出率见表5。表2  2002～2005年大肠埃希菌、克雷伯菌对16种抗生素的耐药率 表3  2002～2005年不动杆菌属、嗜麦芽窄食假单胞菌对16种抗生素的耐药率表4  2002～2005年沙门菌属对6种抗生素耐药率表5  不同年份大肠埃希菌、克雷伯菌ESBLS检出情况

    3  讨论

    2002～2005年间共分离出致病菌4867株，革兰阴性杆菌2724株，占56.0%，排列前三位的是大肠埃希菌、不动杆菌属、沙门菌属，与俞莲花［2］报道的革兰阴性菌排序有所不同。表1大肠埃希菌的检出率从2002年的35.8%上升到2005年的44.3%。不动杆菌属2002年为13.2%，2003年、2004年有所上升，2005年为8.0%。沙门菌属的检出率从2002年的10.5%上升到2004年的18.2%，2005年下降到8.9%。嗜麦芽窄食假单胞菌2002年为4.9%，2003～2004年上升2倍，2005年下降至5.4%。克雷伯菌属从2002年的5.6%上升到2005年的12.5%。铜绿假单胞菌的检出率从2002年14.2%下降到2005年的10.3%。阴沟肠杆菌的检出率从9.8%下降到2005年1.7%。肠杆菌科细菌检出率大于非发酵菌，肠杆菌科已成为我院感染的优势致病菌。

    表2显示，2002～2005年大肠埃希菌耐药率小于30%的有碳青酶烯类的亚胺培南（0.4%），阿米卡星（6.1%～12.9%），头孢西丁（11.1%～17.4%），阿莫西林/棒酸（11.8%～29.7%）、头孢他啶（0.7%）。以上说明了大肠埃希菌对亚胺培南、头孢他啶最敏感。大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率（58%～78.8%）。与马越报道基本一致［1］。我国大肠埃希菌对喹诺酮类药物耐药率逐年升高，且升高幅度大，可能与我国将喹诺酮类药物普遍应用于畜牧业等行业有关。复方新诺明的耐药率也很高58.9%～78.4%，与韩善桥报道一致［３］。　　克雷伯菌对多种抗生素的耐药率小于30%的抗生素有碳青霉烯类的IPM （1.2%），CAZ （2.5%），AMK（0~12.7%）；克雷伯菌对FOX、AMC、SCL、SAM、CTX的耐药率均高于大肠埃希菌，而对CIP（21.7%～50.6%），SXT（39.1%～72.2%）的耐药率明显低于大肠埃希菌，有可能与临床使用此类药物有关。　　沙门菌属对6种抗生素的耐药率平均在10%以下，CRO、LEV为100%敏感，AMP（1.2％～5.2%）、CIP（0～2.4%）、CHL（0～2.7%）、SXT（0～2.2%）、AMP、CIP、C、SXT耐药率平均低于马越［3］报道，这可能与地区差异有关。　　大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLS检出的情况见表5。近年来由于三代头孢菌素在临床的广泛应用，在抗生素的选择压力下，筛选出产ESBLS和（或）AMPC酶的细菌，能水解CTX、CAZ、CRO等三代头孢及ATM等单酰胺类抗生素［３～５］。如表所示，2002～2005年产ESBLS菌检出率呈上升趋势，分别从2002年的35.6%上升到2005年的58%。克雷伯菌属临床分离株产ESBLS菌株检出率高于大肠埃希菌。2002～2005年ESBLS的总发生率大肠埃希菌（45.5%），克雷伯菌（44.6%）。略低于王辉报道的大肠埃希菌产超广谱β－内酰胺酶的发生率56.8%，克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶的发生率42.3%。本次研究发现我院产ESBLS的大肠埃希菌和克雷伯菌临床分离株对头孢噻肟的耐药率明显高于头孢他啶［6］。表明国内ESBLS主要为头孢噻肟酶，与国内学者报道相同［7］，产ESBLS的大肠埃希菌和克雷伯菌不仅对青霉素、三代头孢菌素及氨曲南有较高的耐药率（80%）而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类抗生素药也产生耐药性（>50%），本组资料显示，对于产ESBLS菌株碳青霉烯类、IPM、MEM、AMK，其次为SCL、FOX、AMP、CAZ，临床应加强合理使用抗生素管理，控制耐药菌的产生和医院感染暴发流行。　　表3中不动杆菌在非发酵菌中占首位，它在免疫力低下的患者中，可引起严重的，甚至致死性的感染。对多种抗生素具有广泛的耐药性。对16种抗生素的耐药性表明，亚胺培南对不动杆菌属活行最高，耐药率在1.6%～2.2%，使它成为不动杆菌医院感染菌的首选药物。但亚胺培南耐药的不动杆菌也在日增。PIP的耐药率（40.7%～71.7%），三代头孢CRO耐药率（42.6%～71.7%），CAZ（37.0%～67.9%），CFP（38.9%～75.5%），这比国内一些医院报道的高。CIP耐药率（40.7%～68.6%）；氨基糖苷类AMK的耐药率（11.0%～25.５%），SCL（7.5%～55.5%），TIM（20.4%～61.0%），FEP（22.2%～66.0%）。SXT（48.1%～70.7%）比国内其他医院报道的要高［８］。　　　铜绿假单胞具有多重耐药性，耐药机制复杂，近年来的研究表明，主要与细菌外膜蛋白的低渗透性、生物膜的形成、多耐药泵出系统及β-内酰胺酶的产生等因素有关［９］。铜绿假单胞耐药率低于30%的有7种药，FOX（3.0%～16.7%），AMC（3.0%～16.7%），AMK （3.0%～16.7%），CIP（6.7%～29.3%），CTX（8.6%～14.3%），SAM（8.6%～14.3%）。因此掌握耐药性，及时、准确地检出耐药菌株，研究耐药机制，对临床合理使用抗生素，延缓细菌的耐药性产生，控制耐药菌株和多重耐药菌株的播散和流行具有十分重要的意义［10］。

　【参考文献】

    1  马越，李景云，张新妹，等.2002年临床常见细菌耐药性监测.中华检验医学杂志，2004，1：38－39.

    2  俞莲花，胡大康，王冬国.临床分离的1566株革兰阴性杆菌耐药性分析.中华检验医学杂志，2004，27（9）：570.

    3  管希周，罗燕萍，刘又宁，等.高产AmpC酶肺炎克雷伯菌的临床报道.中华医院感染杂志，2004，14（4）：461－464.

    4  明德松，吴一波，谢尊金.单独和联合药物敏感分析.中华医院感染杂志，2004年，14（5）：489－491.

    5  管希周，刘又宁.质粒介导的AMPC酶研究进展.中华医院感染杂志，2004，14（6）：713－716.

    6  王辉，陈明钧.2003－2004年中国十家教学医院革兰阴性杆菌的耐药性分析.中华检验医学杂志，2005，28（12）：1297－1298.

    7  余丹阳，刘又宁.AMPC酶和ESBLS酶在阴沟肠杆菌中的表达及其对耐药性的影响.中华医学杂志，2002，82：1351－1358.

    8  章白苓，桂炳东.ABA的耐药性及同源性研究.中华医院感染杂志，2005，15（12）：1327－1329.

    9  曹孟淑，徐元宏，胡杰贵.Pae对β－内酰胺酶类抗生素耐药机制的研究进展.国外医学·呼吸系统分册，2003，23（2）：90－94.

    10  糜祖煌，黄支密，秦玲.鲍曼不动杆菌耐药性和氨基糖苷类修饰酶，β－内酰胺酶基因研究.中华医院感染杂志，2004，14（9）：968－971.

    作者单位： 650011 云南昆明，昆明市第一人民医院检验科细菌室

　（编辑：余  强）