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【摘要】 目的 观察雅培CD1600血球计数仪和贝克曼库尔特Gen.sⅡ血球计数仪在计数血小板时的特性，分析其优缺点。方法 检测50例正常人和100例异常人样本，正常人样本系门诊无异常的血液标本，异常样本系指三系有异常的标本，并结合手工显微镜法为参考。结果 50例正常人标本血小板计数有较好的重复性，变异系数（CV）均<4.0%，但100例异常标本结果差异有显著性（P<0.05）。结论 两仪器在计数异常标本时，应高度重视异常结果，必要时进行手工复查。
【关键词】 雅培CD1600；贝克曼库尔特Gen.sⅡ；血小板计数；正常人标本；异常人标本
我院从2004年月12月购进一台美国贝克曼库尔特公司的贝克曼库尔特Gen.sⅡ血球计数仪（以下简称Gen.sⅡ），为了研究和原有的一台雅培CD1600血球计数仪（以下简称CD1600）血小板计数结果的兼容性，做了本实验,观察了一系列的数据，旨在探讨某些血小板异常，特别是计数<50×109/L的样本在两台血球仪上计数结果的差异,分析其原因。CD1600是卫生部1994年的中标产品，各方面性能不错，一直使用至今，Gen.sⅡ是一台先进的五分类血球计数仪，性能卓越，对于血小板计准确性的问题一直是大家讨论的焦点，许多仪器未能准确地将血小板和“非血小 板颗粒”分开，如冷球蛋白，冷纤维蛋白原，溶血，小红细胞，红细胞包涵体，白细胞碎片等干扰，从而导致血小板计数不可靠。
1 材料与方法
1.1 标本来源
1.1.1 正常组 门诊病人未发现异常的50个标本，男25例,女25例,平均年龄35岁。
1.1.2 异常组 2005年5月～2007年4月的门诊及住院病人共100例，其中缺铁性贫血70例，均为女性，平均32岁；再障20例；特发性血小板减少性紫癜10例，均为儿童。
1.2 仪器与试剂 CD1600及原装配套试剂，配套高、中、低质控品; Gen.sⅡ及原装配套试剂，配套高、中、低质控品; 血小板稀释液（草酸铵法）按《全国临床检验操作规程》第2版配制，于4℃冰箱保存; 全血标本用15%EDTA-K2抗凝［1］（20μl+1000μl血液）； CH20型奥林巴斯显微镜； 医光牌计数板(0.1mm,1/400mm2)； 瑞氏染液（自配）。
1.3 方法
1.3.1 正常同一标本计数 正常人同一标本分别在CD1600和Gen.sⅡ上进行计数 取15%EDTA-K2抗凝全血 1ml,充分混匀，交替在两仪器上计数3次，记录血小板数值。
1.3.2 异常标本计数 在工作中碰到异常标本时，马上在另一台血球仪上重做一次，确定是异常标本后，然后重新抽血，再分别在两台仪器上计数3次，并记录结果。
1.3.3 手工计数 以上标本都必须用显微镜复查，血小板 稀释液0.38ml加20μl血液混匀,充液,静置15min后计数,每份标本计数两次,取平均值。
1.3.4 血涂片观察 以上所有标本均应制血涂片，用新鲜全血（不能用抗凝血，抗凝血容易使细胞发生皱缩，血片染色不好）瑞氏染色后观察血小板的大小、形态、有无聚集以及白细胞、红细胞的形态和细胞碎片。
1.3.5 血小板计数结果 实验数据用x±s表示，用SPSS13.0软件统计。
2 结果
2.1 CD1600与Gen.sⅡ对于血小板计数的精密度结果 两仪器的精密度均在设定的 范围内（CV<4.0%），但Gen.sⅡ的CV%较CD1600小(这与其三孔同时测定取均值有关),见表1。 表1 CD1600与Gen.sⅡ对于血小板计数的精密度结果
2.2 Gen.sⅡ报警提示和血涂片镜检中异常情况结果 见表2,在50例正常人标本中仅有2例血小板报警,且镜检证实是血小板聚集。在100例异常标本中,经血片镜检所见，红细胞形态大小不均占79%，小红细胞占71%，血小板聚集占9%。 表2 Gen.sⅡ报警提示和血涂片镜检中异常情况结果
2.3 CD1600与Gen.sⅡ和手工显微镜法血小板计数结果比较 见表3。表3 CD1600与Gen.sⅡ和手工显微镜法血小板计数结果比较注:与显微镜法计数血小板结果比较,*P<0.05,ΔP<0.01;M为中位数;P25为第25位百分位数;P75为第75位百分位数.
3 讨论
血小板计数由于干扰因素较多，要求准确计数有一定的难度，无论是手工计数还是仪器计数都存在着较大的误差。近些年来，稍大的医院都拥有两台以上的血球计数仪，笔者在工作中发现，同一标本在不同的仪器上进行血小板计数，有时结果差异有显著性（P＜0.05），对此做了观察分析。
CD1600与Gen.sⅡ都是采用了经典的库尔特原理，略有差别的是CD1600是单通道计数，而Gen.sⅡ是三通道同时计数取均值。从表1两仪器的精密度对比中可知，Gen.sⅡ比CD1600的精密度要好一些。
两仪器在计数正常人标本时［（100～300）×109/L］结果对比差异无显著性（P＞0.05）,从表3可以看出50例正常人标本中仅有2例提示血小板聚集，并且在血片中可见血小板聚集现象 ［2］，这可能是采血不顺利，抗凝欠佳混匀不及时或是本身就有自凝现象。仪器在计数再障和特发性血小板减少性紫癜患者标本时，结果差异也不是很大。但是仪器在计数缺铁性贫血标本时，结果差异较大，在70例缺铁性贫血标本中有20例标本发现，血小板在Gen.sⅡ上计数出现结果偏低（＜20×109/L），同时有报警提示，但在CD1600上计数却发现结果正常或远高于在Gen.sⅡ上的结果，分析血常规报告单发现平均红细胞体积（MCV）均＜75fL，红系曲线偏左，经血片观察都显示红细胞大小不均和小红细胞，部分有红细胞碎片、血小板聚集等，在缺铁性贫血患者的外周血液中为小红细胞和低血色素表现［3］，在CD1600上，由于仪器采用相对分类法，即非此即彼（不是红细胞就是血小板了），这些小红细胞和红细胞碎片误被当作血小板了，导致结果偏高，而在Gen.sⅡ上，仪器是直接计数2～20fL范围的颗粒，再拟合一条0～70fL的曲线，将少部分的小血小板和大血小板统计在内，有效排除干扰。但拟合曲线的给出有4个条件：（1）血小板计数＞20×109/L；（2）直方图呈正态分布；（3）直方图的峰值在3～15fL范围；（4）PDW＜20%。只有符合了上述4个条件才能得到准确结果，而病理性异常标本往往缺乏上述4个条件，导致曲线不能拟合而结果偏低，且多以结果＜20×109/L出现。所以在Gen.sⅡ上出现结果偏低或血小板结果后出现“R”时，且临床上无出血症状时，应做血小板手工复查［4］。CD1600毕竟是90年代初的产品，技术落后于Gen.sⅡ，所以本实验研究认为，在大批量健康人标本检测时，可用CD1600计数血小板，而针对血液病患者标本检测时(特别是小细胞低色素性贫血)，建议用Gen.sⅡ测定，必要时用手工法复查，使检测结果更加准确、可靠。
【参考文献】
1 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程，第3版.南京：东南大学出版，2006,122.
2 李胜发，程大林.血小板可逆聚集在全血细胞分析中的影响.临床检验杂志，2003,21（1）：37.
3 寇丽筠，陈宏础.临床基础检验学，第2版.北京：人民卫生出版社，2000,2，56-57.
4 张志强.218例仪器法血小板计数警示与手工法复查结果分析.南华大学学报医学版，2005,33（3）：402－403.
作者单位：311241 浙江杭州,杭州市萧山区第二人民医院检验科