精制冠心颗粒中丹参酮ⅡA的含量测定

【摘要】  目的 采用高效液相色谱法测定精制冠心颗粒中丹参酮ⅡA的含量。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水(80：20)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长270nm。结果 丹参酮ⅡA进样量在0.102～0.896μg范围内与峰面积具有良好的线性关系，相关系数0.9998，回收率99.88%。结论 本方法操作简便，精密度好，结果准确可靠，适用于精制冠心颗粒中丹参酮ⅡA含量的测定。

【关键词】  高效液相色谱法; 丹参酮ⅡA; 精制冠心颗粒

【Abstract】 Objective To determine the content of tanshinoneⅡA in Jingzhi Guanxin particle by HPLC. Methods HPLC analysis was carried out with Hypersill BDS C18 column and methanol-water(80：20) as mobile phase.The flow rate was 1.0ml/min and the detection wavelength was 270 nm. Results The calibration curve was linear in the range of 0.102～0.896 ug for tanshinoneⅡA (r=0.9998) , the average recovery was 99.88%(n=6). Conclusion This method is rapid, accurate , reliable and suitable for the determination of tanshinoneⅡA in Jingzhi Guanxin particle.

　　【Key words】 HPLC; tanshinoneⅡA;Jingzhi Guanxin particle.

　　精制冠心颗粒为临床上疗效确切，且常用的活血化瘀药品，由丹参、赤芍、降香等5味中药组成。收载于《中国药典》2005年版一部。原标准中未对丹参进行含量检测，为确保该产品的疗效及有效控制产品质量，本文采用高效液相色谱法对丹参酮ⅡA进行了含量测定，该方法操作简单，精密度好，结果准确可靠。现报告如下。

　　1 仪器与试药

　　TSP型高效液相色谱仪(P4000，UV2000)，丹参酮ⅡA对照品(含量测定用,批号：110766-200518)购自中国药品生物制品检定所;甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水;药品购自市场。

　　2 方法及结果

　　2.1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为VP-ODSC18柱(4.6mm×250mm, 5μm);流动相为甲醇-水(80：20);流速为1.0ml/min;检测波长为270nm;检测温度为室温;理论塔板数以丹参酮ⅡA计算，不低于3000。

　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含40μg的丹参酮ⅡA对照品溶液，即得。

　　2.3 供试品溶液的制备 取本品5袋，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)15 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　2.4 阴性对照溶液的制备 按处方取缺丹参的其他各药物，按处方工艺制备，制得阴性对照品溶液。照供试品的测定方法进行测定，结果表明，其他组分对丹参酮ⅡA的测定无干扰，结果见图1。

　　2.5 线性关系的考察 分别精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液(0.102mg/ml)1、2、4、6、8ml，各置10ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取各稀释液10ul，按“2.3”项下试验方法，分别注入液相色谱仪。以对照品的进样量X(μg)对峰面积Y进行线性回归，回归方程为：Y=1.97×105X-74.6，r=0.9998。结果表明：丹参酮ⅡA进样量在0.102～0.896μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。

　　2.6 精密度试验 取对照品溶液连续进样5次，峰面积积分值的RSD为0.93%。

　　2.7 重复性试验 取样品1批，平行制备5份供试品溶液，分别按“2.3”项下方法测定含量，测定结果平均值为0.98mg/g ，RSD为0.87%。

　　2.8 稳定性试验 取供试品1份，在0.5、1、4、8h分别按供试品项下方法试验，试验结果的RSD为0.97%，试验表明在8h内供试品溶液是稳定的。

　　2.9 回收率试验 精密称取已知含量的供试品6份(各约0.7g)，精密称定，各精密加入适量丹参酮ⅡA对照品适量，依“2.3”项下制备法进行提取及含量测定，计算回收率，结果见表1。表1 回收率试验数据

　　2.10 样品的含量测定 取本品6个批号，按“2.3”项下方法试验，精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，图谱见附图1。结果见表2。表2 样品测定结果

　　3 讨论

　　本试验样品的超声处理时间不宜过长，试验初步证明超过15min丹参酮ⅡA的含量并未显著提高，因而拟定为15min。本方法的阴性对照品在与丹参酮ⅡA对照品的吸收峰处无干扰峰，且方法简单、具重复性，可以作为精制冠心颗粒的质量标准，建议在以后的标准修订中，增加丹参酮ⅡA的含量测定，以提高该药品的质量检测水平。

作者单位：264000 山东烟台,烟台药品检验所