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首页医源资料库在线期刊中华医学实践杂志2010年第9卷第1期

乙型病毒性肝炎检测的临床意义和影响因素

来源:中华医学实践杂志
摘要:【关键词】乙型病毒性肝炎检测临床意义1概述乙型病毒性肝炎是目前已确认的病毒性肝炎中对人类健康危害最为严重的一种肝炎,1965年Bhumberg等首次发现乙型肝炎病毒(HBV)的表面抗原(HBsAg),HBV属于嗜肝DNA病毒科,完整的HBV病毒称为Dane颗粒,直径42nm,球形,有包膜(即HBsAg)。2传播途径急性和慢性乙型肝......

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【关键词】  乙型病毒性肝炎 检测 临床意义

 1 概述

  乙型病毒性肝炎是目前已确认的病毒性肝炎中对人类健康危害最为严重的一种肝炎,1965年Bhumberg等首次发现乙型肝炎病毒(HBV)的表面抗原(HBsAg),HBV属于嗜肝DNA病毒科,完整的HBV病毒称为Dane颗粒,直径42nm,球形,有包膜(即HBsAg)。患者血中除Dane颗粒外,还有16~25nm的球状和杆状体,是病毒组装过剩的HBsAg,HBV基因组由部分双链的环状DNA组成,长约3.2Kb,有4个开放读码框架,即S(包括前S1和前S2)、C(包括前C)、P和X4区HBV抗原,包括:

  1.1 表面抗原(HBsAg) 由S基因编码,是HBV的衣壳蛋白,包括S前S1和前S2蛋白,HBsAg是HBV感染的主要标志,具有抗原性,可刺激机体产生特异性抗HBs。抗HBs可中和HBV,是一种保护性抗体。

  1.2 核心抗原(HBcAg) 是病毒的核衣壳成分,由C基因编码,为颗粒状态的抗原,被HBsAg包被,因此在感染者血液中不易检出。HBcAg可刺激机体产生抗HBc抗体。

  1.3 e抗原(HBeAg) 也由C基因编码,是HBV核心的可溶性抗原,HBeAg阳性表示病毒在体内复制,传染性较强,HBeAg可刺激机体产生抗HBe抗体,此抗体对HBV感染具有保护作用。

  2 传播途径

  急性和慢性乙型肝炎病人及血液HBsAg阳性无症状的携带者是HBV的主要传染源,HBV主要经过血液、性接触、日常生活接触和母婴垂直传播。

  3 检测方法

  目前检测的HBV特异血清标志物主要有HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc-IgM和抗HBc-IgG,常用的检测方法为酶联反应法,此方法检测HBV主要影响因素有以下几种。

  3.1 试剂影响因素 目前酶联反应法检测HBV的试剂盒有很多厂家生产,由于不同厂家HBV抗原组合不同,来源和用量方面也有差异,就造成临床上使用不同厂家的试剂盒检测HBV的结果有很大差异,经常是这家试剂检测阳性,另一家试剂检测阴性,尤其是弱阳性标本,不但是这部分患者HBV感染的临床诊断不明确,而且在筛选献血源时,极易发生漏检造成受血者感染HBV病毒。

  3.2 内源性物质的影响 由于患者体内特有内源性物质的存在,与固相HBV抗原非特异性结合而造成假阳性结果。

  类风湿因子(RF)的干扰:类风湿因子可大量存在于类风湿性关节炎及某些自身免疫性疾病患者血液中,RF有与变性的IgG非特异性结合的性质,在酶链法检测HBV的过程中,标本中的RF就与固相上的IgG及酶标记IgG结合,出现假阳性反应。

  高免疫球蛋白血干扰:血清中高浓度的非特异性免疫球蛋白可与酶标记IgG结合,非特异性地吸附在固相表面,造成假阳性。

  3.3 操作过程中影响因素 (1)温度的影响:温度是酶联法测定HBV的影响结果的关键因素,育温时间不够,弱阳性标本检测不出,出现假阴性结果。(2)洗板的影响:洗板对酶联法检测HBV来说也是关键步骤,洗板分手工洗板和机器洗板,如果是手工洗板,洗液配制的浓度要够,加洗液后一定要停留几秒钟每次都要甩干,连续5次,不然的话会出现假阳性或假阴性的结果。一般因为机器洗板较手工洗板效果要好,关键是洗板次数的选择。洗板次数较少,造成残留,可引起假阳性结果。洗板次数过多可造成抗原抗体结合物洗脱,造成假阴性结果。(3)显色的影响:显色影响的关键是显色温度和显色时间,有些实验室操作人员不严格按说明书操作,因为担心“花板”,往往是显色时间不到就匆忙终止显色结果造成弱阳性标本不能显色才导致假阴性结果的发生。

  4 讨论

  乙型肝炎严重地影响了患者的身心健康,不但给患者带来了经济上的损失,而且还给患者带来了重大的精神损伤,也给周围人群带来了精神伤害。因此,我们在日常生活当中一定要注意个人卫生和环境卫生,对一些污染物,尤其是血污染和呕吐物还有检验用过的标本和用过的医疗器材,一定要处理好,先消毒后焚烧,以免HBV病毒传播扩散。并且在实际工作当中一定要加强实验室的科学管理,强化标准化流程操作,加强质量控制,提高人员素质,以减少HBV检测出现假阳性和假阴性结果的发生。

  

作者: 林连凤 2011-6-29
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