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【摘要】 目的 优选芍药甘草汤中芍药苷的提取工艺。方法 采用正交实验法，以提取物中芍药苷含量和干浸膏得率为指标进行实验。选取L 9 （3 4 ）正交表，考察加水量，提取时间及提取次数等因素的影响。结果 芍药甘草汤的最佳提取工艺为10倍水，每次2h，提取2次。结论 此工艺对芍药苷的提取率高，稳定性好，可作为芍药甘草汤的提取工艺。
关键词 芍药甘草汤 芍药苷 正交实验
The optimization of extracting procedure
of paeonia and glycyrrhizae rad.decoction
Zhang Jingze，Hu Yingqing，Lin Mei，et al.
The Armed Police Medical College，Tianjing，300162.
【Abstract】 Objective To study the optimum extracting procedure for Paeonia and Glycyrrhizae Rad.decocˉtion.Methods The optimum procedure was selected with the content of paeoniflorin and mellow dry extracting rates by orthogonal test design.Chosen Orthogonal table L 9 （3 4 ）to research the effect of the volume of water filled，extraction times and the time of extraction.Results The optimum extracting procedure consists of10folds water，2hours each time，extracting2times.Conclusion The content of paeoniflorin is higher and has good stability when this extraction process is used.This process is considered as processing technology for Paeonia and Glycyrrhizae Rad decoction.
Key words paeonia and glycyrrhizae rad decoction paeoniflorin orthogonal test design
芍药甘草汤出自东汉张仲景所著的《伤寒论》，主要由白芍和甘草两味药组成。该方配伍严谨，用药精简，为中医临床常用的和营散逆，疏挛止痛方剂。国内外的相关报道中芍药甘草汤在治疗胃脘痛、腓肠肌痉挛、腰腿痛、足跟痛、急性乳腺炎、小儿腹痛、妊娠腹痛等病症中都有较好的治疗效果，因此现代广泛用于临床各科血虚津伤和疼痛证的治疗。近年的研究中发现，不同炮制品组成的芍药甘草汤对小鼠醋酸扭体反应均有明显的抑制作用，但单味药甘草煎剂无镇痛作用，故针对白芍中的主要成分芍药苷含量为指标，采用正交实验法对最佳提取工艺进行研究，获得了最佳条件。
1 材料与仪器
高效液相色谱仪（日本岛津LC-10AT）;SPD-10A紫外监测器;C-R8A记录仪;Hamilton微量进样器;色谱柱:phenomenex C 18 （250mm×4.6mm，5μm）;甲醇（色谱纯，天津康科德科技有限公司）;白芍、炙甘草（河北省安国市中华中药材栈），符合《中国药典》1995版白芍、甘草项下规定;芍药苷标准品（自天津药品检验所）。
2 方法与结果
2.1 因素及水平 临床中药复方用药多以水提，故实验中选用水煎煮提取工艺，主要考察的因素为加水量，提取时间及提取次数，比较此三因素对芍药苷含量及干浸膏得率的影响。实验方案见表1。
表1 因素水平水平略
2.2 实验方法
2.2.1 样品溶液的提取 称取白芍10.0g，炙甘草5.0g各9分，分别按照L 9 （3 4 ）正交试验表中条件进行提取;合并提取液浓缩至0.1g/ml生药量，过滤，得到9个样品溶液备用。
2.2.2 芍药苷含量测定 精密称取芍药苷对照品5.0mg置50ml容量瓶中，甲醇溶解并定容;分别吸取0.25，0.50，0.75，1.00，1.50ml于10ml容量瓶并加甲醇稀释至刻度，摇匀作为标准溶液。采用HPLC法测定，以phenomenex C 18 柱为分析柱，以甲醇-水（30:70）为流动相，流速为1.0ml/min检测波长230nm。分别吸取上述5种芍药苷标准溶液依次进样20μl，测定峰面积，绘制标准曲线，并得到回归方程为Y=559838X-24687，R 2 =0.9992。将2.2.1中所得的9个样品液稀释至适当的浓度量取20μl进样，测得芍药苷峰面积，计算出样品中芍药苷的含量。
2.3 实验结果 见表2。
2.4 方差分析 见表3、表4、表5。
表2 因素水平和结果略
表3 方差分析芍药苷含量（略）
表4 方差分析干膏得率（略）
表5 多重分析略
3 讨论由试验结果直接分析各因素对试验结果的影响次序位与方差分析结果相吻合，从芍药苷含量方面考虑为:C>B>A;方差分析得实验最佳提取条件应选A 3 B 3 C 2 ;从干膏得率方面考虑:C>A>B，实验最佳提取条件应选A 3 B 3 C 3 ;由于芍药苷为主要镇痛活性成分，本实验主要要考察的芍药 甘草汤的镇痛活性，故在条件选择上侧重考虑芍药苷含量;多重分析表明，提取3次与提取2次的结果差异不大，加10倍量水与加12倍量水，结果的差异不大，另外从节约能源，节省时间方面综合考虑，故可选A 2 B 3C 2 作为芍药甘草汤最佳提取条件。
参考文献
1 国家药典委员会编.中华人民共和国药典2000年版一部，北京:化学工业出版社，2000，78.
2 金芳，等.大孔树脂预分离在HPLC测定芍药甙中的应用.中国中药杂志，1999，24（10）:608-609.
3 陶巧凤.白芍中芍药甙提取工艺的优选.中药材，1999，22（2）:94-95.
作者单位:1300162天津武警医学院生药教研室
2天津医科大学（药学专业2000级实习生）