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关键词 酶法 血液 酒精浓度
酒后驾车是一个世界性的交通安全问题，每年都有大量的交通死亡事故与酒后驾车有关。血液中酒精浓度测定，是交通部门用以判断酒后驾驶或醉酒驾驶的重要依据。血液中酒精浓度测定早期用蒸馏氧化法和渗透压法，准确性和特异性均较差。后来用醇氢脱氢酶法和气相色谱分析，虽然准确性高，但仪器价格昂贵，一般医院难以推广。为了配合交通管理部门的工作，本省内我们首家引进美国罗氏（Roche）公司生产的酒精测定试剂盒，用全自动生化分析仪进行血液中乙醇含量测定，经一年多的应用，结果比较满意且测定非常方便。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 测定原理 乙醇+NAG + ∠乙醛+NADH+H +反应产生NADH，根据吸光度的变化，测得乙醇的浓度。
1.2 试剂盒货号11776312190，Roche公司生产。R 1 :缓冲液及防腐剂;R 2 :NAD/ADH ≥3mmol/L NAD ≥37U/ml ADH 稳定剂及防腐剂
1.3 c.f.a.s校正品货号20751995190，Roche公司生产，浓度为227mg/dl（49.3mmol/L）。
1.4 质控品（自配）精确吸取无水乙醇（AR）1.0ml，用1000ml的容量瓶稀释至刻度。
1.5 仪器HITACHI7170A全自动生化分析仪。
1.6 仪器分析参数:Assay/Point:Rate A5/11～17。Wave（Sub/Main）:700/340nm。Normal:8μl。Reagent:R 1 100μl;R 2 220μl。
2 结果
2.1 线性范围 取混合血清一份，加入无水乙醇至500mg/dl，分别稀释成400、300、200、100、50、10和5mg/dl8个浓度，用本法测定，按NCCLS EP6-P文件作线性评价 ［1］ ，其线性回归方程为:Y=0.98X-1.52，r=0.999。在0～500mg/dl范围内线性良好。
2.2 精度试验 按NCCLS EP5-T2文件评价 ［1］ ，用自配的质控品每天测定1次，共40次。X=76.64mg/dl，SD=1.7mg/dl，批内CV=1.02%，批间CV=2.20%。说明精密度良好。
2.3 干扰试验 胆红素<60mg/dl;血红蛋白<200mg/dl;甘油三酯<1000mg/dl对本试验无影响。
2.4 方法比较 选10份含量不同的标本（范围在5～290mg/dl）用本法（Y）和气相色谱法（X）测定，按NCCLS EP9-P评价方案作方法比较，结果:Y=1.022X+0.08，r=0.998。
2.5 结果 2003年4月份起，我市交通管理部门共送检疑有酒后驾车者127人，其中15人血清乙醇浓度<30mg/dl（0～29mg/dl），除1人（24mg/dl）承认饮酒外，其余14人（0～13mg/dl）均否认饮酒。另外112人均最终承认饮过酒，血中乙醇浓度在34～290mg/dl。
3 讨论
血液中的酒精浓度达到50～100mg/dl时，其症状为面色潮红、精神兴奋、反射减慢、视敏度减低，此时驾车有可能发生交通事故;酒精浓度>100mg/ml时，中枢神经受抑制，驾车时很容易发生交通事故。欧美国家将血清中乙醇含量≥50mg/dl作为酒后驾驶的标准。依据1997年国家颁布的《机动车驾驶员驾车时血液中酒精含量规定》，我省出台驾车人血液酒精含量限定标准的地方标准为:驾驶员血液中酒精含量大于或等于30mg/dl为酒后驾车，含量大于或等于100mg/dl为醉酒驾车。新的道路交通安全法实施后，发生交通事故是否酒后驾车、酒后驾车还是醉酒驾车的法律依据都是用量化来表示的，实验室为交通管理部门提供驾驶人员血液中酒精含量，是判断事故责任的依据之一，因此准确性是至关重要的。
酶法催化乙醇为乙醛，同时还原NAG + 为NADH。样本中乙醇浓度可以通过监测340nm波长处NADH吸光度获得。该法灵敏度高，精密度好，批间CV=2.20%，且和气相色谱法有良好相关，适合各种类型的自动生化分析仪，临床实验室测定非常方便。是一种简单、快速、灵敏和特异的检测方法。注意事项:由于乙醇易挥发，采集标本时要使用一次性真空针管采血，隔绝标本与空气的接触，以免影响结果的准确性。
参考文献
1 杨昌国，许叶.线性评价和干扰试验中NCCLS评价方案的应用.临床检验杂志，1999，17（3）:47-49;184-186.
作者单位:226500江苏省如皋市人民医院