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【摘要】 目的 利用低温乙醇法分离蛋白组份Ⅲ再提取人免疫球蛋白。 方法 将蛋白组份Ⅲ用氯化钠溶液溶解、调解pH值、乙醇沉淀离心后精制得人免疫球蛋白。 结果 每1.0kg蛋白组份Ⅲ中提取人免疫球蛋白平均12.62g，质量符合规程要求。 结论 本工艺从蛋白组份Ⅲ再提取人免疫球蛋白是可行的方法。
【关键词】 蛋白组份Ⅲ 提取 人免疫球蛋白
人免疫球蛋白是人体血液中的抗体物质，具有免疫防御作用。是治疗免疫缺陷症及预防甲型肝炎、麻疹等病的药物。常规生产是采用低温乙醇法 ［1］ 进行蛋白分离的组份Ⅱ+Ⅲ，再进一步去除组份Ⅲ，提取的组份Ⅱ进行精制制得人免疫球蛋白制品。但常规分离组份Ⅱ+Ⅲ不能将组份Ⅱ完全分离出，余下的组份Ⅲ中含有少量人免疫球蛋白、凝血因子Ⅱ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅹ等，利用其提取人免疫球蛋白及凝血因子Ⅸ是可行的。本文就利用组份Ⅲ提取人免疫球蛋白加以介绍。
1 材料和方法
1.1 材料 管式离心机德国101H;酸度计美国ORION公司420A;超滤器美国MILLPORE公司YF 2 PSK31R;不锈钢反应罐;原材料:低温乙醇法分离蛋白组份Ⅲ（本室提供）;试:醋酸、醋酸钠、氯化钠、碳酸氢钠皆为分析纯;乙醇:药用级。
1.2 方法 用适量氯化钠溶液将蛋白组份Ⅲ沉淀充分溶解，温度要求0～2℃，用醋酸盐缓冲液调解酸碱度，加乙醇至25%，降温至-5～-6℃，分步离心得组份Ⅱ沉淀，进一步溶解、超滤精制得人免疫球蛋白。工艺流程见图1。检定:纯度、多聚体、白喉抗体检测方法依据《中国生物制品规程》2000年版 ［2］ 。
2 结果
经过5批试验，人免疫球蛋白提取水平达12.62g/kg组份Ⅲ沉淀，纯度98.59%，符合规程不低于90%的要求;多聚体0.56%，符合低于5%的要求，白喉抗体效价8.09AU/g IgG，符合规程要求大于3.0AU/gIgG。见表1。
图1 工艺流程
表1 用低温乙醇法分离蛋白组份Ⅲ提取免疫球蛋白的关键质量指标（略）
3 讨论
利用低温乙醇法分离的组份Ⅲ沉淀再提取人免疫球蛋白，是一种可行的方法，从以上结果中可以看出，其关键质量指标符合规程要求。考虑成本因素，可以将多批组份Ⅲ沉淀合并在一起进行提取，工艺简单，稳定性较好，提高人免疫球蛋白产率约10%，充分利用了珍贵的血液资源，可供业内人士参考。
参考文献
1 刘隽湘.输血疗法与血液制剂，北京:人民卫生出版社，1996，85.2 中国生物制品规程，北京:化学工业出版社，2000，76.
（编辑子 萱）
作者单位:130062吉林省长春生物制品研究所