HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量

    【摘要】 目的  建立HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量。 方法  采用Diamond C18色谱柱（5μm，4.6×150mm），柱温为室温，流动相:甲醇-水（70:30），流速为1ml/min，检测波长:240nm，以峰面积计算。 结果  线性范围4～24μg/ml。平均加样回收率为（103.2±3.2）%（n=15）。 结论  本法简便、快捷、灵敏，可作为醋酸地塞米松片质量控制的有效方法。

    【关键词】  HPLC 醋酸地塞米松

    Determination of dexamethasone acetate tablets by HPLC

    Wu Aiqin，Ren bin，Wu Lihua，et al.

    Dept of Pharmacy，The First Affiliated Hospital of SunYat-Sen University，Guangzhou510080.

    【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for the determination of dexamethasone acetate tablets.Methods Analytical column was Diamond C18（5μm，4.6×150mm），methanol-water（70:30）was used as the mo-bile phase at the flow rate of1ml/min.The detection wave length was240nm and the peak area was calculated.Re-sults The calibration curve was linear within the concentration range of4～24μg/ml.The average recovery was（103.2±3.2）%（n=15）.Conclusion The method was proved to be simple，rapid and accurate.

    【Key words】 HPLC dexamethone acetate

    醋酸地塞米松为肾上腺皮质激素类药，《中国药典》2000年版醋酸地塞米松片的含量测定方法为紫外分光光度法 ［1］ ，此法专属性不强，选择性较差，其结果可能受到片剂中其它辅料或添加剂的影响。本文采用HPLC法测定其含量，现报道如下

    1 仪器与试药

    Waters高效液相色谱仪（515泵;996光电二极管矩阵检测器）;岛津UV-1601PC紫外分光光度计;醋酸地塞米松对照品（浙江仙琚制药股份有限公司提供，含量为99.30%，批号031008）;市售醋酸地塞米松片（规格:0.75mg/片，A厂批号:030403;B厂批号:030501（B1）;030902（B2）;030502（B3）;C厂批号:20021001（C1）;20030601（C2））;甲醇（色谱纯，默克公司），水为二次重蒸水。

    2 方法与结果

    2.1 色谱条件 色谱柱:Diamond C18（5μm，4.6×150mm），流动相:甲醇-水（70:30），流速:1ml/min，柱温:室温，检测波长:240nm，进样量:20μl。在该色谱条件下，醋酸地塞米松保留时间为4.95min，色谱图见图1。

    2.2 溶液配制

    2.2.1 对照品储备溶液的配制 精密称取醋酸地塞米松对照品约25mg，置于25ml容量瓶中，加入甲醇适量溶解，定容，摇匀，配成1mg/ml的对照品储备液。

    2.2.2 标准曲线制备 分别精密吸取上述储备液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml，置于25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配成4、8、12、16、20、24μg/ml的标准溶液。取20μl进样，以醋酸地塞米松峰面积A对其浓度C进行线性回归，回归方程为C=2.3×10 -5 A+0.605697，r=0.9997。试验结果表明，在4～24μg/ml范围内醋酸地塞米松峰面积和浓度呈良好的线性关系。

    图1 地塞米松高效液相色谱图 A:地塞米松对照品;B:B片;1:地塞米松

    2.2.3 供试品溶液的配制 分别取供试品20片，精密称定，研细。称取适量（相当于醋酸地塞米松3.75mg）置50ml容量瓶中，加入甲醇25ml，置50～60℃的水浴中保温10min，并不断振摇，放冷至室温，定容，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置50ml容量瓶，加甲醇至刻度即得。吸取20μl进样，以醋酸地塞米松峰面积A代入标准曲线计算供试品含量。

    2.3 回收率试验 精密称取已知含量的醋酸地塞米松供试品粉末适量（相当于醋酸地塞米松0.75mg），置于10ml容量瓶中，加储备液适量，加入甲醇5ml，置50～60℃的水浴中保温10min，并不断振摇，放冷至室温，定容，摇匀并过滤，精取续滤液0.8ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，用HPLC法进行测定，以实测值除以加入量计算加样回收率。平均加样回收率为（103.1±1.5）%（n=15）。结果详见表1。

    表1 回收率试验结果 （略）

    2.4 样品测定 各供试品的HPLC法测定结果见表2。参照《中国药典》2000版采用紫外分光光度法 ［1］ 测定各样品含量结果亦见表2。

    3 讨论

    《中国药典》采用紫外分光光度法测定醋酸地塞米松片的含量 ［1］ ，美国药典则采用高效液相色谱法测定醋酸地塞米松片的含量。参照美国药典的方法，本实验采用HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量，醋酸地塞米松与杂质分离良好，且平均加样回收率为（103.2±3.2）%，方法可靠。 

    表2 各厂家醋酸地塞米松片含量测定结果 （略）

    供试品HPLC色谱图在地塞米松色谱峰前存在片剂辅料杂峰，说明辅料在240nm处存在紫外吸收，可干扰醋酸地塞米松片含量的测定，导致紫外分光光度法测得的含量偏高，与HPLC法相差达15%。用HPLC法测定三个厂家片剂含量均低于含量限度（90%～110%），而用药典方法测定的结果则均合格，由此可见，在药典方法下其含量检测合格的样品，仍有可能不合格。因此，我们认为，药典所用醋酸地塞米松片含量测定方法有待改进。本文所用HPLC法简便，快捷，灵敏，可作为醋酸地塞米松片质量控制的有效方法。

    参考文献

    1 中国药典编委会.中华人民共和国药典（二部），北京:化学工业出版社，2000，1019.

    （编辑小 石）

    作者单位:510080广州中山大学附属第一医院药学部（ Δ 广东药学院实习生）