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Department of Biology，the Xiangnan College，Chenzhou423000，China
【Abstract】 Objective To study the influence of Yubang in the wound after thermal injury.Methods SD seventy-eight rats（250g～300g）of both sexes were randomly divided into4groups.One group（n=6）was served as non-burned control and the content of nitric oxide（NO），endothelin-1（ET-1）and MDA in the back skin was measured after exposed to37℃water for20seconds，then the ET-1/NO was calculated.The other groups were exposed to80℃water for20seconds resulting in a deep second degree burn involving about20%surface area.In the2 nd group，nothing was used to protect the wound and it served as blank control group.The3 rd group was used the1%SDAg to protect the wound and served as control group.The4 th group was used the Yubang to protect the wound served as ex-perimental group.After3，6，12，24hours，the content of NO，ET-1was measured in the wound of the2 nd ，3 rd ，4 th group.After6，24hours the content of MDA was measured in the wound of the2 nd ，3 rd ，4 th group.In the2 nd ，3 rd ，4 th group the ET-1/NO was calculated in the3，6，12，24hours after thermal injury.Results The content of ET-1，NO，in the2 nd ，3 rd ，4 th group was higher than that in the1 st group and the content of MDA in the3 rd ，4 th was higher than that in the1 st ，2 nd group.The ET-1/NO in the4 th groups was lower than that in the2 nd group and3 rd groups.Conclusion The content of NO，ET-1and MDA in the wound can increase after thermal injury，and the Yubang may be regulate the content of ET-1and NO，and decrease the production of MDA in the wound after therapeutic in-jury.
【Key words】 Yubang;nitric oxide（NO）;endothelin-1（ET-1）;MDA
磺胺嘧啶银一直以来是用于烧伤创面较好的外用药物，但因其过量吸收常可引起局部或全身的毒副反应。近年一种新型纳米银医用无菌敷料———“愈邦”已在不少医院应用，临床初步显示了其在诸多方面优于传统的磺胺嘧啶银敷料。但对于其发挥作用的机制，除抗感染的作用外，对于创面早期的影响却知之甚少。本实验通过对SD大鼠深Ⅱ°烧伤后分别采用“愈邦”敷料和1%磺胺嘧啶银及空白对照组的皮肤组织中NO、ET-1和丙二醛（MDA）的测定，探讨“愈邦”对烧伤创面早期影响的可能机制，为临床推广应用丰富理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物模型及分组 健康纯种SD大鼠78只，体重250～300g，雌雄不限（湖南省中医研究院动物室提供）。随机分为4组，伤前对照组（n=6）、实验组A组（n=24）、对照组B组（n=24）、空白对照组C组（n=24）。实验前2天以10%Na 2 S背部脱毛。将1%戊巴比妥钠按30～35mg/kg腹腔注射麻醉后，将A、B、C组动物背部浸入80℃水温中20s，造成深Ⅱ°烧伤模型（病理证实），面积约20%BSA，并于腹腔内注入生理盐水15～20ml抗休克。A组以愈邦纳米银敷料包扎，B组以1%SDAg纱布包扎，C组不用任何药物，创面暴露。伤前对照组背部浸入37℃水温中20s不作其他处理。伤后动物单笼喂养，自由饮食。A、B、C组于伤后3、6、12、24h4个时相点在背部取材（每时相点分别为6只），检测NO、ET-1，伤后6、24h两时相点取材测MDA，伤前对照组取材检测NO、ET-1、MDA，取材后存于-70℃冰箱内待测。
1.2 观察指标与方法 NO、ET-1、MDA试剂盒购自解放军东亚研究所。ET-1测定按非平衡免疫法测定［1］;NO含量测定采用Griess法测定;MDA采用改良八井木夫法测定，蛋白含量按紫外分光光度计法测定。
1.3 统计学处理 实验结果以ˉx±s表示，采用SPSS10统计学软件包以配对及组成t检验，检测水准α=0.5、α=0.1取双侧。
2 结果
2.1 创面NO含量测定结果 伤后NO上升，3组均较伤前明显升高，对照组和空白对照组在大多数时相点较实验组明显升高，但对照组和空白对照组比较两者差异无显著性。见表1。
表1 伤后不同时相点NO含量比较 （略）
注:与伤前对照组比较， * P<0.01;与B、C组比较， ** P<0.05; *** P<0.01
2.2 创面ET-1含量的测定结果 伤后ET-1含量上升，3组较伤前均有明显上升，对照组、空白对照组较实验组显著升高。对照组和空白对照组差异无显著性，见表2。
表2 伤后不同时间ET-1含量比较 （略）
注:与伤前对照组比较， * P<0.01;与B、C组比较， ** P<0.05， *** P<0.01。
2.3 创面MDA含量结果 伤后MDA含量上升，实验组上升不明显，但对照组和空白对照组明显上升，且对照组和空白对照组含量差异无显著性。见表3。
表3 伤后不同时间MDA含量比较 （略）
注:与伤前对照组比较， * P<0.01;与B、C组比较， ** P<0.01
2.4 伤后各时相点ET-1/NO比值比较 在伤后3h，三组比值接近，但在其他时相点，实验组较对照组和空白对照组为低，且逐步趋向伤前。而对照组、空白对照组在24h仍升高。见表4。
表4 伤后不同时间ET-1/NO的比值（略）
3 讨论
MDA作为细胞脂质成分多价不饱和脂肪酸的氧化产物，其浓度间接反应了细胞膜的氧化受损程度 ［2］ 。NO对于深Ⅱ°烧伤早期创面保持足够的血流灌注起重要作用，它通过抑制血管平滑肌的收缩，减少血小板聚集及中性粒细胞粘附，减少炎性细胞释放介质对创面的影响 ［3］ 。而过量的NO亦可造成创面损伤。ET可以直接损害血管内皮细胞，使其活力下降;细胞内MDA量增加、SOD下降，内皮素及其受体和NO等的改变与烧伤早期损害的各种指标存在明显的相关性。创面高浓度的ET不仅直接损伤组织细胞，使渗出和水肿加重，与组织水肿呈正相关 ［4］ ，而且使创面微血管长时间处于收缩状态，则血栓形成，组织进一步缺血缺氧。而ET-1作为中性粒细胞的有效趋化因子可使中性粒细胞大量聚集导致创面再损伤。在本实验中，实验组NO、ET-1的含量在多数时相点较对照组及空白对照组明显降低;MDA的含量也较对照组和空白对照组明显降低，且在伤后各时相点差异无显著性，而对照组和空白对照组在伤后24h较6h明显增加。通过对烧伤早期创面ET-1/NO比值测定，发现伤后3h各组比值较接近，但较伤前增高明显，而在随后的各时相点实验组逐步接近于伤前，对照组和空白对照组在伤后24h仍然增高。正常情况下，体内ET和NO存在相互制约的关系 ［5］ ，处于动态平衡，ET和NO之间存在负反馈调节机制，ET通过其β受体促进NO释放，而NO则通过cGMP途径抑制ET的生成，同时NO也可通过调节ET受体而对ET的释放产生反馈作用，使二者保持平衡，这对于维持脏器恒定血供极为重要。本实验通过对1%SDAg与纳米银“愈邦”敷料分别处理烧伤创面后相应时相点的ET-1、NO、MDA的测定，其结果说明了烧伤早期创面损伤与创面ET-1和NO的含量变化有关，纳米银“愈邦”外用后可能通过调节创面ET-1、NO的含量和比值而减少创面组织细胞脂质过氧化损害程度。实验组MDA含量的减少说明纳米银“愈邦”除了直接抑制ET-1的生成或（和）释放，减轻了对于创面的损害，同时更为重要的可能是通过优化ET-1/NO的比值，使微血管处于适度的舒缩状态，从而保障了创面的有效血供。
“愈邦”是通过纳米科学技术，将天然矿物质银以物理、化学的微观研究理论为基础，以当代精密仪器和先进技术为手段，以医用无菌纱布为载体加工而成的超精细银颗粒的创面外用材料。现代研究表明，物质颗粒越小，其离子溶出度越大;颗粒越小，其表面积越大，生物活性越高。“愈邦”具有极强的渗透性，渗入创面组织，产生生物热反应，亦有助于清除损伤组织释放的过氧化物质、炎性介质，以此达到保护创面的目的。
“愈邦”应用《医用微生物学》中“使菌体变性或沉淀”的经典理论，对大多数致病菌有杀菌或抑菌作用，控制创面炎症，亦可进一步调理或减轻损伤性因子和炎性介质对组织的损伤，有利创面愈合。
【参考文献】
1 贾晓明，朱兆明，曾强，等.烧伤早期大鼠血浆、皮肤创面及脏器内皮素的动态变化.解放军医学杂志，1997，22（1）:40-427（9）:37.
2 Ohkawa H，Ohishi N，Yagi K.Assay lipid peroxides in animal tissue by thiobarbituti cacideration.Ann Biol Chem，1979，95（2）:351-358.
3 L lindblow，J Cassato L，Yregard，et al.Importance of nitric oxide in the regulation of burn oedma，proteinuria and urine outpout.Burns，2000，（26）:13-17.
4 Kowal Vern A.Walenga JM，Sharp Pucci M，et al.Postburn oedema and related Changes interleukin-2，leakocytes，palalet activation，endothelin-1，and C1estearase inhibitor.J Burn Care Rebahi，1997，18（2）:99-103.
5 陈建国，闻安民，刘建中，等.内皮素/一氧化氮系统失调在妊高征发病中的作用.中国现代医学杂志，2000，10（6）:38-40.
作者单位:423000湖南郴州，湘南学院生理学教研室（△ 病理学教研室;# 组织学与胚胎学教研室）
410013湖南长沙，中南大学湘雅三医院烧伤整形科