Literature
Home医源资料库在线期刊中华实用医药杂志2005年第5卷第19期

苦楝果实多糖的微波提取及含量测定

来源:中华实用医药杂志
摘要:【摘要】目的苦楝果实中提取多糖,并测定其含量。方法运用微波技术用水提醇沉法提取苦楝果实多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果测得苦楝果实中多糖含量6。结论首次运用微波技术从地产苦楝果实中提取出多糖,反应速度加快。...

点击显示 收起

    【摘要】  目的  苦楝果实中提取多糖,并测定其含量。方法  运用微波技术用水提醇沉法提取苦楝果实多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果  测得苦楝果实中多糖含量6.48%,平均回收率为99.05%,RSD=1.26%(n=5)。结论  首次运用微波技术从地产苦楝果实中提取出多糖,反应速度加快。

  【关键词】  微波技术;苦楝果实;多糖;提取;含量测定
  
  【Abstract】  Objective  The extraction and content determinations polysaccharides in fruit of melia azedarach.Methods  Microwave technique applied in polysaccharides in fruit of melia azedarach were obtained by hotwater extraction and ethanol precipitation,content determination with phenol-vitriolic colorimetry.Results  The polysaccharides content in fruit of melia azedarach is 6.48%,recovery rate is 99.05%,RSD=1.26%(n=5).Conclusion  Microwave technique applied in the polysaccharides in fruit of melia azedarach has been obtained for the first time.

  【Key words】  microwave technique ;melia azedarach ;polysaccharide ;extraction ;content determination
   
  苦楝(Melia azedarach)为楝科植物,别名翠树、森树、金铃子、紫花树;可栽培为行道园景树,根皮可驱蛔虫,且其对蛔虫的致死作用强于山道年;果实可治腹部疝痛等[1]。其根、叶和果实中均含有苦楝素(即川楝素),可以防治各种螟虫、飞虱、菜青虫、蚜虫等。此外,还有抗真菌、阻断神经肌肉接头、抗肉毒中毒、对呼吸中枢的抑制作用、抗病毒、对酶的抑制作用等[2]。

  微波技术的应用,近年来得到很大发展。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波辐射(MWI)可以大大加快反应速度(最高达1240倍),反应时间以分、秒计[3]。微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了回收率[4],亦取得了令人可喜的进展。

  本实验运用微波技术对苦楝果实用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质,用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分后,再运用微波技术用水提醇沉法制得苦楝果实粗多糖,并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定[5],取得了令人满意的结果。

  1  仪器、试剂及样品

  UV-2401 PC 紫外分光光度计(日本岛津),MCL-3型连续微波反应器(四川大学无线电系)。(+)葡萄糖(AR)105℃干燥恒重,苯酚(AR),硫酸(AR)。苦楝果实:12月份采集于新疆石河子市25小区,自然干燥,粉碎待用。

  2  标准曲线的绘制

  2.1  标准葡萄糖溶液的配制  精确称取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml 容量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8μg/ml标准葡萄糖溶液备用。

  2.2  5%苯酚试剂的配制  取苯酚100g,加铝片0.1g和NaHCO3 0.05g,蒸馏,收集182℃馏份,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。

  2.3  标准曲线绘制  精确量取葡萄糖标准溶液0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7ml置干燥试管中,分别加水使成1.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.6ml,摇匀,然后加浓H2SO47.0ml,充分摇匀,室温放置25min,在400~600nm处测定其最大吸光度,将实验数据做回归处理得回归方程:A=0.0691C+3×10-3  R2=0.9981  r=0.99905  

  3  苦楝果实多糖的提取及精制

  苦楝果实破碎后,称取60g,置500ml烧瓶中,将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反应器中,依次用300ml石油醚(60~90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取,调整功率560W、500W、400W、350W,反应时间20min。残渣挥干溶剂后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630W、600W、560W、450W。减压浓缩至一半体积,加入0.1%活性炭,脱色,过滤,滤液加入95%乙醇使溶液含醇80%,静置过夜,过滤,残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤,得苦楝果实多糖。60℃ 烘干备用。

  4  换算因素测定

  精确称取60℃干燥恒重的苦楝果实多糖20mg,水溶解后定容到100ml容量瓶中,摇匀,作为多糖储备液。

  精确量取多糖储备液0.20ml,加水至1.0ml,按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素:f=W/CD 式中:W为多糖重量(μg),C为多糖液中葡萄糖的重量(μg),D为多糖的稀释倍数。测得f=3.3523。

  5  样品测定

  分别精确称取苦楝果实粉末0.200g、0.201g、0.203g,用80%乙醇浸泡过夜,再于MCL-3型连续微波反应器中用80%乙醇回流20min,调整功率560W、500W、400W、350W。残渣挥去溶剂后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630W、600W、560W、450W。反复洗至250ml容量瓶中,定容,摇匀成为样品液。测定时,精确吸取样品液1.0ml,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值,按下式计算多糖含量:多糖含量%=CDf/W×100 式中:C为样品溶液的葡萄糖的重量(μg),D为样品溶液的稀释倍数,f为换算因素,W为样品的重量(μg),测得平均结果为6.48%,RSD=1.21%(n=3)。

  6  加样回收率测定

  精确称取苦楝果实粉末0.15g,精密加入苦楝果实多糖7mg,再于MCL-3型连续微波反应器中用80%乙醇回流20min,调整功率560W、500W、400W、350W。残渣挥去溶剂后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630W、600W、560W、450W。反复洗至250ml容量瓶中定容。摇匀后,精确移取1.0ml,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值。计算多糖含量,平均回收率为99.05%,RSD=1.26%(n=5)。

  7  讨论

  多糖广泛存在于自然界,是多种中草药的有效成分之一,具有多种生物活性,是理想的免疫增强剂,它能促进T细胞、B细胞、NK细胞、MΦ细胞等免疫细胞的功能,还能促进白介素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子的产生。目前对多糖的研究方兴未艾,多糖的作用机理以及生物功能与结构的关系的研究不断深入,而且不断有新的多糖物质被发现。微波技术应用于植物细胞破壁,大大地加快了反应速度,有效地提高了收率。我们首次运用微波技术从仙人掌中提取出苦楝多糖,并对其含量进行了测定,反应时间缩短了10倍,多糖含量为6.48%。苦楝果实多糖的结构组成和生理活性有待进一步研究。

  【参考文献】

  1  程远斌、彭君铃.楝树-多用途的生态经济树种.河南林业科技,2003,23(3):166.

  2  杨吉安,马玉花,苏印泉,等.苦楝研究现状及发展前景.西北林学院学报,2004,19(1):115-118.

  3  曾昭钧,李香文.微波有机化学进展.沈阳药科大学学报,1999,10:304~309.

  4  张代佳,刘传斌,修志龙,等.微波技术在植物胞内有效成分提取中的应用.中草药,2000,31(9):附 5-6.

  5  周静,李艳,薛梅,等.酸浆果多糖的提取及含量测定.数理医药学杂志,2000,13(3):242.

  作者单位: 832003 新疆石河子,石河子大学化学化工学院

  (编辑:齐  永)

作者: 孙萍王莉鲁建江顾承志 2006-8-20
医学百科App—中西医基础知识学习工具
  • 相关内容
  • 近期更新
  • 热文榜
  • 医学百科App—健康测试工具