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Home医源资料库在线期刊中华实用医药杂志2006年第6卷第2期

EDTA依赖性血小板假性减少形成与抗凝时间的关联

来源:中华实用医药杂志
摘要:【摘要】目的探讨EDTA依赖性血小板假性减少与抗凝时间的相关性。方法采用CELL-DYN1700血液分析仪分析EDTA-PTCP阳性患者静脉血经EDTA抗凝后不同时间的血小板数量。结果EDTA抗凝血随时间的推移其血小板计数逐渐减少,抗凝1min时与手工法相比差异无显著性(P>0。结论EDTA-PTCP阳性患者静脉血经EDTA抗凝2min后,其血小板......

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  【摘要】  目的  探讨EDTA依赖性血小板假性减少与抗凝时间的相关性。方法  采用CELL-DYN1700血液分析仪分析EDTA-PTCP阳性患者静脉血经EDTA抗凝后不同时间的血小板数量。结果  EDTA抗凝血随时间的推移其血小板计数逐渐减少,抗凝1min时与手工法相比差异无显著性(P>0.05),抗凝2min时与手工法相比差异存在显著性(P<0.05)。结论  EDTA-PTCP阳性患者静脉血经EDTA抗凝2min后,其血小板计数明显降低,给血小板计数带来较大误差,临床上应予以重视。

  【关键词】  EDTA依赖性血小板假性减少;血小板计数;抗凝时间

  The relations between the causes of EDTA-PTCP and the time of preventing clotting
CHEN Xian-rong.Department of Laboratory Medicine,The Second Hospital of Zhuzhou,Zhuzhou 412005,China

  【Abstract】  Objective  This article discuss the relation between the causes of  EDTA-PTCP and the time of  EDTA preventing clotting.Methods  The CELL-DYN1700 blood analyzer analyses platelet of vein blood of EDTA-PTCP positive patient at different time after EDTA.Results  As the time passes,its blood platelet counts gradually decreases,when EDTA  is one minute,there is no obvious difference compared with the manual method (P>0.05),when EDTA is tow minutes,there is obvious difference compared with the manual method (P<0.05).Conclusion  After 2 minutes EDTA prevents clotting,its vein platelet counts of EDTA positive patient obviously reduces.Which brings a bigger error of the blood platelet counts.So this problem should be paid more attention in clinical.

  【Key words】  EDTA-PTCP;blood platelet count;time of preventing clotting

  全自动血细胞分析仪已在各级医疗卫生单位普遍使用,用EDTA盐作为血细胞分析的抗凝剂已被ICSH认定,并得到广泛使用,但EDTA偶尔可导致血小板发生聚集,引起EDTA依赖性血小板假性减少(EDTA-dependent pseudothrombocytopenia,EDTA-PTCP),肿瘤、自身免疫病、肺心病、晚期妊娠、肝病、毒血症及一些不明原因疾患者多发。国外报道其发生率为0.07%~1%,国内报道为1.26%[1]。虽然在临床上较为少见,但其给血小板计数带来较大误差。临床发现经住院途径送检的EDTA-PTCP阳性患者标本上机检测时(从EDTA抗凝到检测时间大于30min)其血小板计数明显低于正常,而随后复查(经EDTA抗凝后立即上机检测),其血小板计数又在正常参考范围之内。为此,本文特就EDTA抗凝后不同时间对EDTA性血小板聚集的影响进行分析比较,现报告如下。

  1  临床资料

  1.1  一般资料  36例EDTA依赖性血小板聚集阳性病例均为血小板聚集者(EDTA clumper),即EDTA抗凝血室温静置120min后仍聚集,镜下有聚集成团者[2],为本院2003年8月~2005年10月门诊和住院病例,其中住院病例31例、门诊病例5例;男17例,女19例;年龄(42±18)岁。肝癌6例,肺癌3例,胃癌4例,乳癌8例,系统性红斑狼疮3例,慢性肝炎6例,晚期妊娠5例,慢性肾炎1例。

  1.2  主要仪器和试剂  CELL-DYN1700全自动血细胞分析仪及配套试剂,日本Olympus公司产CHS双目显微镜,EDTA·K2(150g/L)为抗凝剂,许汝和血小板稀释液,瑞氏染液。

  1.3  方法

  1.3.1  仪器法  抽取患者静脉血2.0ml加入盛有EDTA·K2(150g/L)40μl的硅化试管中立即混匀后分别在0、1、2、5、10、20min时上机检测。

  1.3.2  手工法  在抽取病人静脉血后的同时,立即从中取20μl血用许汝和稀释液按“全国临床检验操作规程”(第2版)的操作步骤进行血小板计数。

  1.3.3  血涂片油镜镜检法  将未抗凝血及EDTA抗凝后1、2、5min时的抗凝血分别推片,行瑞氏染色后,在油镜下观察血小板的聚集情况。

  1.4  统计学处理  数据用x±s,两两比较用t检验。

  2  结果

  2.1  血小数计数  EDTA抗凝血随时间的推移,血小板计数逐渐减低。当抗凝1min后,其血小板计数与手工法相比差异无显著性(P>0.05),当抗凝2min后,其血小板计数与手工法相比差异有显著性(P<0.05),见表1。

  表1  EDTA性血小板聚集血(n=36)在EDTA抗凝后不同时间血小板的测定值  (略)

  2.2  血小板聚集情况  EDTA抗凝血随时间的推移,其血涂片中血小板聚集数目发生变化,由刚开始的5个左右的小聚集发展到10~20个左右的中等聚集,到后来形成50个以上的更大聚集。未抗凝的血涂片中,血小板呈单个散在分布,无聚集现象。

  3  讨论

  自Older等[3](1980年)报道一例EDTA-PTCP现象后,引起国内外广泛关注。EDTA-PTCP形成的主要原因是由于EDTA盐作为抗凝剂,诱导抗凝血中血小板互相聚集、堆积,形成以血小板围绕淋巴细胞周围的血小板卫星现象[4]。有学者认为其发生与血小板表面存在某种隐蔽性抗原有关[5]。EDTA可导致血小板活化,产生GP改变[6],即血小板形态发生改变,由正常的圆盘状变为圆球形。改变血小板膜表面的某种隐蔽性抗原构象,与存在血浆中的自身抗体结合,激活细胞膜中的磷脂酶A2(PLA2)和磷脂酶C(PLC),使血小板膜磷脂水解并释放花生四烯酸(AA)、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原、内源性钙离子等活性物质[7]。这些活性物质能活化血小板纤维蛋白原受体(FIB-R),促进血小板与纤维蛋白原聚集成团。本实验结果表明:EDTA-PTCP患者血液经EDTA抗凝2min后,血小板明显发生聚集,其原因可能是EDTA螯合到2min时,血小板表面存在的隐蔽性抗原大量暴露并发生构象变化,与血液中的自身抗体结合而启动血小板聚集。故在临床检验中,对于2min内未完成检测的门急诊标本及住院部标本如发现上机时血小板图形异常,血小板计数低的患者标本应做涂片检查,查看有无血小板聚集现象,若有怀疑EDTA-PTCP现象,应手工法复查血小板,可避免由EDTA-PTCP现象引起误诊误治。

  另外,笔者观察到EDTA-PTCP现象:住院患者的发生率高于门诊、急诊患者的发生率,肿瘤患者化疗以后发生率又高于其他患者的发生率。其原因可能是由于这些患者免疫功能发生紊乱而产生了某种自身抗体。有实验表明:EDTA-PTCP患者血浆IgG、IgM值明显升高,说明此现象与自身抗体有很大的关系,这种抗体可能是抗血小板抗体和抗心磷脂抗体。

  【参考文献】

  1  Bizzaro N.EDTA-dependent pseudothrombocytopenia: a clinical and epidemiological study of 11 cases,with 10-year follow up.Am J Hematol,1995,50(2):103-109.

  2  朱忠勇.准确计数血小板方法学研究进展.国外医学·临床生物化学与检验分册,2002,23(3):132.

  3  Onder O,Weinstein A,Loyer LW.Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that are reactive in blood anticoagulated with chelating agents.Blood,1980,56:177-182.

  4  宓庆梅,施巍宇,郝婉莹,等.EDTA依赖性假性血小板减少症一例.中华检验医学杂志,2004,27(10):719.

  5  Bragnani G,Bianconcini G,Brogna R,et al.Pseudothrombocytopenia  clinical comment on 37 cases.Minerva Med,2001,92(1):13-17.

  6  Rao GH,Peller JD,Wthite JG.Infuence of ionized calcium on thrombin induced down regulation of GPIb/IX receptors on human platelets.Thromb Res,1997,85(3):23.

  7  王鸿利.血液学和血液学检验,第2版.北京:人民卫生出版社,1999:230-234.

  作者单位: 412004 湖南株洲,株洲市二医院检验科

  (编辑:齐  永)

作者: 陈先荣 2006-8-20
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