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【摘要】 目的 建立用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定杏荷止咳糖浆中芍药苷含量的方法。方法 采用Kromasil C18柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)为流动相，检测波长为230nm。结果 芍药苷在0.4016～2.008μg范围内与色谱峰面积呈线性关系；回归方程：Y=477820.2X-1799.4,r=0.9999；平均加样回收率及RSD分别为99.66%和0.80%。结论 该法简便、快速，测定结果重现性好，可用于该药质量控制。
【关键词】 RP-HPLC；杏荷止咳糖浆；芍药苷；含量测定
【Abstract】 Objective To establish the method for determining the content of Paeoniflorin in Xinghe Zhike Tangjiang by RP-HPLC.Methods Using Kromasil C18 Column,acetonitrile 0.1% Phosphoric acid Solution(14:86) as the mobile phase and detection wavelength at 230nm.Results The Calibration Curve was linear at a range of 0.4016～2.008μg for the Paeoniflorin and the linear equation was Y=477820.2X-1799.4,r=0.9999.The average recovery was 99.66% and the related standard deviation(RSD) was 0.80%.Conclusion This method was simple and convenient and quick,can be used to dominate the quality of Xing-he Zhike Tangjiang,and the duplicate of the result was good.
【Key words】 RP-HPLC；Xing-he Zhike Tangjiang；paeoniflorin；content
杏荷止咳糖浆［药品批准文号：国药准字Z20050825］由白芍、桑叶、制苦杏仁、青黛、玄参等制成，具有解表清肺、润燥止咳功能，用于咳嗽属燥热伤肺证，症见：干咳无痰，或咯痰不爽，鼻干咽燥，口渴便干，舌边尖红，苔薄少津等。方中白芍为君药。本实验采用反相高效液相色谱法测定其君药白芍中芍药苷含量。该法专属性强，简便，快速，重现性好，可作为控制杏荷止咳糖浆质量的一项指标。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1100系列高效液相色谱仪，METTLERAG 245型电子天平(精确度十万分之一)。
1.2 试药 杏荷止咳糖浆(扬子江药业集团有限公司试制)；芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，样品批号：110736-200424)；乙腈(色谱纯)，甲醇、无水乙醇、磷酸均为分析纯，重蒸馏水(自制)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为Kromasil C18柱，50μm(250mm×4.6mm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(14：86)，使用前用0.45μm孔径有机滤膜抽滤脱气；滤速1.0ml/min；检测波长230nm；进样量10μl。外标峰面积法计算含量。
2.2 可行性试验 精密称取芍药苷对照品10.04mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成100.4μg/ml的芍药苷对照品溶液。按处方配比制备不含白芍的杏荷止咳糖浆阴性样品。称取杏荷止咳糖浆及白芍阴性样品适量，按样品测定项下方法制备供试品溶液及白芍阴性对照溶液。吸取对照品溶液、供试品溶液及白芍阴性对照溶液分别进样，芍药苷峰保留时间为10.6min，样品分离效果良好，阴性不干扰，具体结果见图1，图2，图3。
2.3 线性关系 精密称取芍药苷对照品20.08mg，用甲醇溶解并定容至10ml，摇匀，作为储备液。分别取上述储备液0.2、0.4、0.6、0.8和1.0ml，用甲醇定容至10ml，制得40.16、80.32、120.48、160.64及200.8μg/ml的对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测得峰面积积分值分别为188253，380228，581252，763658和956001。以芍药苷峰面积积分值对芍药苷进样量进行线性回归，得回归方程：Y=477820.2X-1799.4,r=0.9999。
2.4 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液(100.4μg/ml)10μl，重复进样6次，求得芍药苷峰面积积分值的相对标准偏差为RSD=0.61%(x=477826.3)，表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验 取同一供试品溶液，在相同色谱条件下，于0、2、4、6、8、12、24和48h重复进样，测得芍药苷峰面积积分值的RSD为0.93%，表明供试品溶液在48h内稳定。
2.6 重复性试验 按样品测定项下方法，对同一批号样品，分别取样平行测定5次，所测得含量的RSD为1.29%。
2.7 加样回收试验 精密称取已测知含量的样品约10g，置50ml量瓶中，分别精密加入芍药苷对照品溶液(无水乙醇溶解、浓度为0.506mg/ml)10ml，再加无水乙醇(边加边振摇)至刻度，再振摇5min，静置过滤，弃去初滤液，收集续滤液，按样品测定项下方法依次操作，计算回收率，结果见表1。表1 回收率测定结果
2.8 样品测定 取本品约10g，精密称定，置50ml量瓶中，加无水乙醇(边加边振摇)至刻度，再振摇5min，静置过滤，弃去初滤液，收集续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(100.4μg/ml)与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，按外标峰面积法计算含量，测定了10批样品，结果见表2。表2 样品测定结果
3 讨论
本法采用高效液相色谱法测定杏荷止咳糖浆中的芍药苷含量，方法专属性较强，操作简便快速，重现性好，10批样品中的芍药苷含量都在0.40～0.55mg/g之间，故规定本品每克含芍药苷不得低于0.40mg，作为本品含量测定限度指标，该指标能够较好地控制成品的质量。
作者单位： 225321 江苏泰州，扬子江药业集团有限公司
(编辑：汪 洋)