鹿鞭补酒中淫羊藿苷的含量测定

【摘要】  目的 用HPLC测定鹿鞭补酒中淫羊藿苷的含量。方法 色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶 ,流动相为乙腈 -水。结果 淫羊藿苷在0.1654～1.654μg 之间呈良好的线性关系 ；淫羊藿苷的平均回收率为90.78% (n=5）, RSD为2.20％ (n=5）。结论 该方法简便、准确、分离效果好 ,无干扰 ,可用于鹿鞭补酒的质量评价。

【关键词】  鹿鞭补酒 淫羊藿苷

    【Abstract】  Objective  To establish the quantitative method of Piperine in penis cervi reinforce liquor by HPLC. Methods  The column was packed with 5 μm Diamonsil C18 stationary phase. The mobile phase consisted of acetonitrile -water.Result  The linear ranges  were 0.1654～1.654μg ；The average recoveries were 90.78%(n=5） ,rsd were 2.20%.Conclusion  ought to Method convenient accurate separation effect fine; non-interference,to approve  use for  penis cervi reinforce liquor quality evaluation.

    【Key words】  penis cervi reinforce liquor;icariin

    鹿鞭补酒系鹿鞭、淫羊藿等18味药材经生产工艺生产后制成。具有补肾壮阳，益气补虚，填精益髓，健步轻身的功能。用于肾阳虚衰，腰膝冷痛，阳痿早泄，梦遗滑精，神疲气怯，四肢无力。为有效控制鹿鞭补酒的质量，用高效液相色谱法对鹿鞭补酒中的淫羊藿苷进行了含量测定研究。

    1  仪器、试剂与对照品

    仪器：日本岛津高效液相色谱仪；检测器：Agilent-1100紫外检测器；乙腈：色谱纯，迪马公司生产；水：娃哈哈超纯水；对照品：淫羊藿苷（批号110737-200312）为中国药品生物制品检定所提供。样品：哈药集团世一堂制药厂、哈尔滨蒲公英药业。

    2  方法与结果

    2.1  检测波长的确定  取淫羊藿苷对照品溶液和供试品溶液在200～400nm 紫外波长扫描，结果在270nm处有最大吸收，故选择270nm 为检测波长。

    2.2  色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；Z0RBAX-SB-C18（5μm，250mm×4.6mm）。流动相：乙腈-水（25：75）

    2.3  对照品溶液的制备  精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，即得。

    2.4  供试品溶液的制备  精密量取鹿鞭补酒20ml，蒸干，加水30ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取4次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，色谱分离图见图1。

    2.5  空白试验  取厂家提供药材，除去淫羊藿后，其他按处方量投料，并按生产工艺生产，按供试品溶液方法制备，结果证明空白试验无干扰，此方法可行。

    2.6  精密度  取淫羊藿苷对照品溶液，连续进样5次，结果峰面积值的RSD＝0.91%，说明本方法的精密度良好。

    2.7  线性  精密量取淫羊藿苷对照品16.54mg，置100ml容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀,备用。分别精密吸取上述溶液适量，加甲醇分别配成浓度依次为0.1654、0.3308、0.827、1.3232、1.654mg/10ml的溶液。取上述对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=2208.4X+21.367, r=0.99995, 证明淫羊藿苷在0.1654～1.654μg浓度范围内呈良好的线性关系。

    2.8  稳定性试验  取上述供试品溶液，室温放置，分别在0、2.5、5、18、21、24、27h进样测定，峰面积积分值的RSD为0.71%，结果表明样品溶液中的淫羊藿苷在27h内基本稳定。

    2.9  重复性试验  取批号20052251鹿鞭补酒6份各20.00ml，按供试品溶液制备项下的方法制备，按正文方法进行测定，计算含量，结果含量平均值的RSD＝1.61％(n=6）。

    2.10  回收率试验  取批号20052251鹿鞭补酒5份，每份10.00ml , 精密称定，分别精密加入一定量的淫羊藿苷对照品，按供试品溶液的制备进行测定，结果见表1。平均回收率为90.78% (n=5）, RSD为2.20％ (n=5），表明回收率良好。

    2.11  样品测定结果  取七批样品，按含量测定方法进行试验，结果见表2。表2  样品测定结果注：以上样品（4、5、6、7）来源于哈药集团世一堂制药厂，（1、2、3）来源于哈尔滨蒲公英药业。

    3  讨论

    由于鹿鞭补酒的质量标准无相应含量测定，而其中淫羊藿苷为成方中的主药。因此，选择淫羊藿苷为指标成分。《中国药典》2005年版一部淫羊藿［1］品种项下采用外标法控制了淫羊藿苷的含量，故本次研究将淫羊藿苷的含量测定方法确定为外标法。

【参考文献】
  1 国家药典委员会.中国药典(一部），2005年版.北京：化学工业出版社，2005，168.

作者单位：150001 黑龙江哈尔滨，黑龙江省药品检验所中药室