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首页医源资料库在线期刊中华实用医药杂志2008年第8卷第6期

HPLC法测定双黄消炎片中盐酸小檗碱的含量

来源:《中华实用医药杂志》
摘要:【摘要】目的用HPLC法测定双黄消炎片中盐酸小檗碱的含量。结果盐酸小檗碱在13。结论方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为双黄消炎片中盐酸小檗碱的定量分析提供了科学有效的方法。【关键词】双黄消炎片盐酸小檗碱HPLC【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordetemining......

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【摘要】  目的  用HPLC法测定双黄消炎片盐酸小檗碱的含量。方法  HPLC用外标一点法,Diamonsil ODS1 C18柱,乙腈- 0.033mol/L磷酸二氢钾溶液(35:65)为流动相,流速为1.0ml/min,λ=265nm。结果  盐酸小檗碱在13.525~108.20μg/ml范围内呈良好线性,回归方程为Y=63204.63X+4501.15,r=0.9993,平均加样回收率99.8%,RSD为1.59%(n=5)。结论  方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为双黄消炎片中盐酸小檗碱的定量分析提供了科学有效的方法。

【关键词】  双黄消炎片 盐酸小檗碱 HPLC

    【Abstract】  Objective  To establish the method for detemining the content of  Berberine hydrochloride  in shuanghuang xiaoyan Pian by HPLC.Methods  Using Diamonsil ODS1 C18 Column, acetonitrile- 0.033mol/L Potassium Phosphate Monobasic acid(35:65) as the mobile phase,detection wavelength as 265nm and flow rate was 1.0ml/min.Results  The calibration curve was linear at a range of 13.525~108.20μg/ml for the Berberine hydrochloride and linear equation was Y=63204.63X+4501.15  r=0.9993. The average  recovery was 99.8% and the related standard deviation(RSD) was 1.59%(n=5).Conclusion  This method was simple and accurate and proper,which can be provide for scientific quantitative analysis method of  Berberine hydrochloride in shuanghuang xiaoyan Pian and the reduplication of the result was good.

    【Key words】  shuanghuang xiaoyan Pian; Berberine hydrochloride; HPLC

        双黄消炎片收载于部颁药品标准中药成方制剂第二册中,功能主治:消炎,用于咽喉疼、腹泻痢疾、慢性痢疾。处方三颗针黄芩组成,原标准中只鉴别项检查,没有含量控制项。为了更好地控制双黄消炎片的质量,笔者对双黄消炎片处方进行了分析,本处方中的君药三颗针为小檗科植物,小檗碱为三颗针的主要成分之一。为更好控制产品质量,提高药品质量标准,参照文献资料与《中国药典》2005年版一部复方黄连素片项下含量测定方法,对双黄消炎片中盐酸小檗碱的含量测定进行了实验研究[1,2]。采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量,方法简便快速,稳定可靠,专属性强。

    1  仪器与试药

  仪器:高效液相谱仪:SPD-10A 日本岛津;紫外分光仪:上海康化生化仪器制造厂;超声波清洗器:SK3200H 上海科导超声仪器有限公司。试药:盐酸小檗碱对照品(批号110713-200208,供含量测定用)由中国生物制品检定所提供, 其他试剂均为分析纯;双黄消炎片(批号:20070501、20070502、20070503)由河南百年康鑫药业有限公司提供,上市药品:通化某药业有限公司。

    2  方法与结果

    2.1  色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈- 0.033mol/L磷酸二氢钾溶液(35:65)为流动相;检测波长为265nm;流速为1ml/min;柱温为室温。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。

    2.2  溶液的制备  对照品溶液的制备:取盐酸小檗碱对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含50μg的溶液,即得。供试品溶液的制备:取本品20片,研细,取0.5g,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇20ml,超声处理30min(功率:135W,频率:59kHz),放冷,加甲醇至刻度,混匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液1ml置5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜滤过,即得。

    2.3  阴性样品的测试  取缺三颗针的样品,按供试品制备法制备阴性样品后测定,在盐酸小檗碱相应位置无峰出现,说明阴性样品的其他成分无干扰。见图1~3。图1  盐酸小檗碱对照品色谱图 图2  双黄消炎片色谱图图3  阴性样品色谱图 2.4  线性关系的考察  取盐酸小檗碱对照品适量,加甲醇配制不同浓度的对照品溶液,分别为13.525μg/ml、27.05μg/ml、54.10μg/ml、81.15μg/ml、108.20μg/ml,照上述色谱条件各进样10μl测定峰面积(结果见表1),以峰面积积分值为纵坐标,以不同浓度为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程Y=63204.63X+4501.15  r=0.9993(n=5),表明盐酸小檗碱在13.525~108.20μg/ml之间呈良好的线性关系。表1  线性关系的考察

    2.5  精密度试验  精密吸取对照品溶液(54.1μg/ml)进样量10μl,连续进样6次,记录峰面积(结果见表2),测定结果RSD为1.26%,表明精密度良好。表2  精密度试验

    2.6  重现性试验  取本品(20070501)20片,称取平均处重,研细,取6份,每份0.5g,精密称定,照供试品溶液制备方法,制成供试品溶液,照上述色谱条件进行试验,进样10μl,测定每份盐酸小檗碱含量(结果见表3),结果RSD为1.54%,重现性良好。 表3  重现性试验

    2.7  稳定性试验  取同一供试品溶液(批号:20070501),分别在0、2、4、6、8h进样10μl,测定盐酸小檗碱峰面积(结果见表4),RSD为3.29%(n=5)。表明制备的供试品溶液在8h内稳定。表4  稳定性试验

    2.8  加样回收率试验  精密称取已知含量的同一批号供试品(批号:20070501)5份,取样量为0.25g,精密称定,分别加入浓度为2.861mg/ml的对照品溶液1ml,按照供试品溶液制备方法,制备供试品溶液,进样量10μl,测定盐酸小檗碱含量(结果见表5),平均回收率为98.2%,RSD为1.59%(n=6)。表5  加样回收率试验 

    2.9  样品测定      按照供试品溶液制备方法对3批产品进行测定,测定结果见表6。 表6  含量测定结果

    3  讨论

    3.1  样品每片含三颗针以盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)计,均不少于3.0mg,由于各地三颗针药材的差别较大,因此暂规定:本品每片含三颗针以盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)计,不得少于3.0mg。

    3.2  参考《中国药典》2005年版一部复方黄连素片项下含量测定方法所用的流动相,分别采用乙腈:0.033mol/L磷酸二氢钾(40:60、25:75、35:65)为流动相,进行试验,结果以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾(35:65)为流动相所得色谱图分离效果及出峰时间较为合适。因此选择流动相为乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾(35:65)。

【参考文献】
  1   孙雪妹,杨明华,戴影秋.良园枇杷叶膏盐酸麻黄碱的HPLC测定.中国医药工业杂志,2006,37(11):768-769.

2  国家药典委员会.中国药典,2005年版一部.北京:化学工业出版社, 2005, 534.


作者单位:477150 河南郸城,河南百年康鑫药业有限公司  

作者: 丁永志
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