点击显示 收起
【摘要】 目的 建立盐酸莫西沙星葡萄糖注射液含量的HPLC测定法。方法 采用C18色谱柱，以甲醇-溶液A (28：72)为流动相，柱温45℃，流速1.3ml/min，检测波长293nm。结果 盐酸莫西沙星在0.4～2.0μg范围内线性关系良好，方法平均回收率为100.1%(RSD=0.68%)。结论 采用HPLC法测定盐酸莫西沙星的含量，该法专属性强，重现性好。
【关键词】 盐酸莫西沙星；HPLC；测定
盐酸莫西沙星（moxifloxacin hydrochloride）系Bayer公司近年来研制的新型氟喹诺酮类抗生素，可有效地作用于革兰阳性菌和革兰阴性菌，对金葡球菌、链球菌和肠球菌的活性比环丙沙星强，对结核杆菌也有较强的作用。由于莫西沙星在8位引入了甲氧基，使得其光毒性得以降低［1，2］。本公司研制的盐酸莫西沙星葡萄糖注射液质量稳定可控，已完成临床前各项研究工作。本实验采用反相高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星的含量，该法专属性强，重现性好。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪；METTLER AG245电子天平（精度十万分之一）。
1.2 试药 盐酸莫西沙星葡萄糖注射液（扬子江药业集团有限公司试制，规格：250ml：莫西沙星0.4g与葡萄糖12.5g。批号：08122601、08122701、08122801）；甲醇：色谱纯(MERCK公司)；四丁基硫酸氢铵：离子对试剂（苏州市澄湖化工厂）；磷酸二氢钾、磷酸、无水亚硫酸钠均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱Diamonsil(钻石)C18柱(4.6mm×250mm，5um)；以甲醇-溶液A(28：72)(溶液A：将0.5g四丁基硫酸氢铵及1.0g磷酸二氢钾溶于500ml纯化水中，加入2ml磷酸及0.5g无水亚硫酸钠，搅拌溶解后，加纯化水稀释至1000ml)为流动相，柱温45℃，流速1.3ml/min，检测波长293nm，进样量10μl。在上述色谱条件下，按盐酸莫西沙星峰计算理论板数不低于3000。
2.2 线性试验 取盐酸莫西沙星对照品适量，精密称定，用溶液A分别制成每1ml含0.04、0.08、0.12、0.16、0.20mg的溶液。在上述色谱条件下分别进行测定，记录色谱图，以对照品进样量(X)与峰面积(Y)进行线性回归，得回归方程Y=4628.47X-102.62（r=0.9999）。结果表明，盐酸莫西沙星在0.4～2.0μg范围内，进样量与峰面积线性关系良好。
2.3 空白试验 按处方配比制备盐酸莫西沙星葡萄糖注射液的阴性溶液，取阴性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明辅料不干扰测定。
2.4 供试品溶液稳定性 取同一批号样品(批号：08122601)的供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、12及16h进样，测得其峰面积分别为4749.4、4747.4、4747.0、4735.6、4748.8、4738.1及4726.9，平均值为4741.9（RSD=0.18%），结果表明，供试品溶液在16h内稳定。
2.5 重复性试验 取同一批号样品(批号：08122601)的供试品溶液，重复测定6次，测得的含量分别为100.6、99.8、100.0、99.6、100.1、100.3，平均值为100.1，RSD为0.36%。
2.6 回收率试验 取盐酸莫西沙星对照品各约40、50、60mg，分别置于50ml量瓶中，按处方比例加入辅料，制成3个浓度的模拟样品，每个浓度各3份，取供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算回收率，结果分别为100.6、100.1、99.8、99.5、101.3、100.8、99.5、99.8、99.3，平均值为100.1%，RSD为0.68%。
2.7 样品测定 精密量取本品适量，加溶液A稀释成每1ml中含莫西沙星0.1mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪。另取盐酸莫西沙星对照品适量，精密称定，加溶液A稀释制成每1ml中含莫西沙星0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。3批样品的含量分别为100.1%、100.2%及100.0%。
3 讨论
在选择色谱条件时，笔者用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，比较了1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至2.5)－甲醇(83：17)，柱温为40℃；1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至4.5)－乙腈(84：16)，柱温为40℃［3］等流动相系统，最终确定本文色谱条件，分离效果较好。
本色谱条件同时可用于盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中的有关物质检查，系统适用性试验表明盐酸莫西沙星与8-氟莫西沙星、6，8-二甲氧基莫西沙星、6-甲氧基-8-氟莫西沙星及8-乙氧基莫西沙星的分离度都大于1.5。
【参考文献】
1 Woodcock JM，Andrews JM，Boswell FJ.et al.In vitro activity of BAY 12-8039，a new fluoroquinolone.Antimicrob Agents Chemother，1997，41：1101.
2 Hoogkamp-Korstanje JA，Roelofs-Willemse J. Comparative in vitro activity of moxifloxacin against Gram-positive clinical isolates.J Antimicrob Chemother，2000，45（1）：31.
3 朱斌，胡昌勤，蒋爱军，等.高效液相色谱法测定莫西沙星制剂含量.中国抗生素杂志，2002，27（8）：462-464.