薄层色谱法对降糖类保健食品中添加化学药品的快速筛查

【摘要】  目的 探讨薄层色谱法(TLC)对降糖类保健食品中添加化学药品的快速检测。方法 采用薄层色谱法对部分降糖类保健食品(九参平糖雪尔胶囊、5.0平糖、雪常平、糖吉消渴胶囊、金蚁唐康、灵芝糖肽)中添加的格列本脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍进行定性鉴别。结果 此5种化学降糖药分离良好。结论 所建立的方法简便、快速、专属性好，可作为降糖类保健食品中添加化学药品的快速筛查。

【关键词】  降糖类保健食品; 化学药品;薄层色谱法

　目前，市场上销售的降糖类保健食品中有非法添加化学降糖药的现象，本文建立的薄层色谱初筛方法, 可同时检查磺酰脲及双胍类等多种化学降糖药, 为基层应用提供了便捷快速的筛查方法。

　　1 仪器与试剂

　　1.1 仪器

　　薄层层析硅胶GF254(青岛海洋化工有限公司制造)自制薄层板;铺板器(新乡市新华检测仪器厂);超声波清洗器(型号：DS2060，天津市东康科技有限公司制造);电子天平(型号：FA2004N， 上海民桥精密科学仪器有限公司制造); 电热恒温干燥箱(型号：DH64，上海跃进医疗器械一厂制造);三用紫外线分析仪(波长：365nm、254nm，江阴申港光电仪器厂制造);硅胶干燥器;层析缸。

　　1.2 试剂

　　试剂均为分析纯，供试品及阳性对照药品均为我县药品经营企业提供;阳性对照药品均经我所检验合格：格列本脲片，批号：080108，规格：2.5mg/片，厂家：天津太平洋制药有限公司;格列吡嗪片，批号：071015，规格：5mg/片，厂家：海南赞邦制药有限公司;甲苯磺丁脲片，批号：060116，规格：0.5g/片，厂家：广东清平制药有限公司;盐酸苯乙双胍片，批号：070907，规格：25mg/片;厂家：山东省莒南制药厂;盐酸二甲双胍片，批号：080303，规格：0.25g/片，厂家：上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂。供试品：九参平糖雪尔胶囊、5.0平糖、雪常平、糖吉消渴胶囊、金蚁唐康、灵芝糖肽。

　　2 方法

　　2.1 阳性对照品的薄层色谱

　　2.1.1 格列本脲阳性对照溶液的制备[1]

　　取格列本脲片4片(约含格列本脲10mg)，研细， 加氯仿-乙醇(1：2)溶液10ml使溶解，过滤，取滤液作为阳性对照溶液1。

　　2.1.2 盐酸苯乙双胍阳性对照溶液的制备[2]

　　取盐酸苯乙双胍片1片，研细，称取适量(约含盐酸苯乙双胍250mg)，加氯仿-乙醇(1：2)溶液25ml使溶解，过滤，取滤液作为阳性对照溶液2。

　　2.1.3 甲苯磺丁脲阳性对照溶液的制备[2]

　　取甲苯磺丁脲片1片，称重为0.510g，研细，精密称取0.0255g(约相当于甲苯磺丁脲25mg)，加氯仿-乙醇(1：2)溶液25ml使溶解，过滤，取滤液作为阳性对照溶液3。

　　2.1.4 格列吡嗪阳性对照溶液的制备[2]

　　取格列吡嗪片2片(约含格列吡嗪10mg)，研细，加氯仿-乙醇(1:2)溶液10ml使溶解，过滤，取滤液作为阳性对照品溶液4。

　　2.1.5 盐酸二甲双胍阳性对照溶液的制备[2]

　　取盐酸二甲双胍片2片，称重为0.596g，研细，精密称取0.0295g(约含盐酸二甲双胍25mg)，加氯仿-乙醇(1：2)溶液25ml使溶解，过滤，取滤液作为阳性对照溶液5。

　　2.1.6 上述5种阳性对照混合溶液的制备

　　取上述5种药品细粉(约含各药品15mg)，混合后加氯仿-乙醇(1:2)溶液15ml使溶解，过滤，滤液作为阳性对照混合液6。

　　2.1.7 吸取上述

　　6种阳性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上(硅胶GF254薄层板预先在110℃干燥30min后置干燥器中备用)，以醋酸乙酯-氯仿-乙醇-20%氢氧化钠溶液(54：23：18：5)为展开剂[2]，展开，取出晾干，置三用紫外线分析仪(254nm)下检视。在色谱图中可见到5种阳性对照混合液所显的斑点清晰，均互相分离，互不干扰，且与5种阳性对照色谱相应的位置上所显荧光斑点颜色相同。

　　由以上试验可知：格列本脲、甲苯磺丁脲的Rf值过大，而盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍的Rf值过小。故将格列本脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲的展开剂改变为：醋酸乙酯-氯仿-乙醇-NaOH(1mol/L)溶液(54：23：18：3)，盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍的展开剂改变为：醋酸乙酯-乙醇- NaOH(1mol/L)溶液(6：3：1)。重复上述试验，结果Rf值良好。

　　2.2 样品的薄层色谱检测

　　2.2.1 九参平糖胶囊的薄层色谱检测

　　取本品2粒，倾出内容物。加氯仿-乙醇(1：2)溶液5ml，超声处理30min，滤过，取滤液2ml，作供试品溶液。另取盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍阳性对照品的混合品，同供试品制作方法，制成每1ml中含盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍各1mg的溶液，作为对照溶液(阳性对照1)。再取格列本脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲阳性对照品的混合品，同阳性对照1的制作方法，制成每1ml中含格列本脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲各1mg的溶液，作为对照溶液(阳性对照2);再取九参平糖胶囊处方中的中草药依法制成胶囊，并取4粒，依照供试品溶液制法，制成阴性对照溶液。再取“1.2”中的5种阳性对照药品适量(约含每种阳性对照药品5mg)，加该供试品的阴性对照溶液5ml，溶解，滤过，滤液作为阳性对照与阴性对照混合溶液。参照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述5种溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上，同时点两块薄层板，两块薄层板分别以醋酸乙酯-无水乙醇-氢氧化钠(1mol/L)溶液(6：3：1)和醋酸乙酯-氯仿-无水乙醇-氢氧化钠(1mol/L)溶液(54：23：18：3)为展开剂，展开，取出晾干，置三用紫外线分析仪(254nm)下检视。供试品色谱中，在与盐酸二甲双胍、格列本脲对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。 证明该供试品中含有盐酸二甲双胍、格列本脲化学药品。

　　2.2.2 5.0平糖、雪常平、糖吉消渴胶囊、金蚁唐康、灵芝糖肽的薄层色谱

　　此6种降糖类保健食品的薄层色谱的检测方法同“2.2.1”。

　　3 结果

　　采用上述薄层检查方法,对降糖类保健食品九参平糖雪尔胶囊、5.0平糖、雪常平、糖吉消渴胶囊、金蚁唐康、灵芝糖肽检测结果见表1。表1 6种降糖类保健食品的检测结果

　　4 讨论

　　拟鉴别的5种化学药品成分极性差别较大, 经试验,需采用2 个薄层系统分别检查。其中, 格列本脲、格列吡嗪、甲苯磺丁脲的展开剂为醋酸乙酯-氯仿-乙醇- NaOH(1mol/L)溶液(54：23：18：3); 而盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍的展开剂为醋酸乙酯-乙醇- NaOH(1mol/L)溶液(6：3：1)。通过上述方法的研究，充分证明，该方法灵敏度高，专属性强，仪器操作简便，试剂价廉易得，结果准确可靠，可以作为降糖类保健食品中非法添加化学药品的检验标准来推广使用。

【参考文献】
  　1 国家药典委员会.中国药典，二部，2005年版.北京:化学工业出版社，2005,115;457;527;594;596.

　　2 国家典委员会.中国卫生部药品标准中药成方制剂，第十八册.北京:中国医药科技出版社，1998，278.