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母婴传播是我国乙肝传播的主要方式之一，其途径较为复杂，除宫内感染和分娩过程中感染外，产后母婴密切接触也可传播乙肝病毒（HBV），哺乳是可能的途径之一。了解母乳的传染性如何，对指导HBsAg阳性产妇的哺乳具有现实意义。
1 资料与方法
1.1 研究对象 2000年1月～2004年5月我院妇产科HBsAg阳性产妇81例为研究对象，产妇年龄分布见表1。初产妇64例，经产妇17例。于产后3天内取初乳5ml，置于经硅化处理过的Eppendorf管中以12000r/min，离心30min，取上清层-20℃保存。同时采静脉血5ml分离血清-20℃保存。
表1 产妇年龄分布（略）
1.2 方法
1.2.1 HBVM检测 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清与乳汁中HBV标志物，试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司生产，按说明书操作。
1.2.2 HBV-DNA数量检测 HBV引物序列为P1:5′-ATCCTGCTGCTATGCCTCATCTT-3′，P2:5′-ACAGTGGGGGAAAGCCCTACGAA-3′;荧光探针序列为5′-TGGCTCAGTTTACTAGTGCCATTTG-3′。引物及探针由中山大学达安基因股份有限公司合成。采用常规的碱裂解法从血清与乳汁中提取标本DNA，荧光探针定量HBV-DNA试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供，按说明书操作，各反应管放入全自动实时荧光定量基因扩增仪（FQD-33A型杭州大河热磁电子有限公司生产）上93℃3min预变性，然后93℃30s，55℃1min，共40个循环。反应结束后由全自动电脑分析仪计算出HBV-DNA的拷贝数。
2 结果
81例HBsAg阳性产妇的血液和乳汁中HBVM与HBV-DNA的检测结果见表2。
表2 血液和乳汁HBVM及HBV-DNA的检测结果（略）
由表2可知，81例HBsAg阳性产妇中，血液中HBV-DNA阳性41例，占50.6%;乳汁中HBV-DNA阳性10例，占12.3%，且全部为血液HBV-DNA阳性，占血液HBV-DNA阳性的24.4%（10/41），阳性率与文献报道相近 ［1］ 。随着血液中HBV-DNA含量的增加，乳汁中HBV-DNA检出率随之增加，分别为1.0×10 3 ～9.9×10 5 copies/ml19例中3例，占15.8%（3/19）;1.0×10 6 ～9.9×10 7 copies/ml14例中3例，占21.4%（3/14）;1.0×10 8 ～4.5×10 9 copies/ml8例中4例，占50.0%（4/8）。可能由于病例数较少，三组间差异无显著性。
3 讨论
荧光定量PCR技术是一种新的基因定量检测技术，能准确反映HBV在体内感染和复制情况。随着科学的进步，母乳喂养越来越得到提倡，HBsAg阳性产妇的母乳喂养问题应引起人们的重视。我们用荧光定量PCR技术从母乳中检出HBV-DNA，为HBsAg阳性产妇母乳喂养传播HBV提供了证据。 HBsAg阳性产妇一般不愿意母乳喂养。本研究表明，血液HBV-DNA阳性产妇，特别是HBV-DNA数量高，乳汁HBV-DNA阳性的产妇，应尽量避免哺乳;而血液和乳汁HBV-DNA阴性的产妇，在其婴儿接受主被动联合免疫后，仍可母乳喂养 ［2］ 。理论上说，HBsAg阳性妇女怀孕前检测血HBV-DNA，复制活跃者采取避孕措施，待血中病毒含量降低或抗病毒治疗后病毒滴度下降后再考虑妊娠 ［3］ ，以尽量减少母婴传播的危险。建议HBsAg阳性产妇常规检查血液和乳汁HBVM及HBV-DNA。
参考文献
1 张颖，刘连生.HBsAg携带者母乳喂养传染性探讨.中华传染病杂志，1997，15（2）:112-113.
2 马玉燕，王磊一，刘锡梅，等.用荧光探针定量PCR技术检测孕妇和胎儿乙肝病毒感染的研究.现代妇产科进展，2001，10（6）:433-437.
3 王建设，朱启.阻断乙型肝炎病毒母婴传播的研究进展.中华肝脏病杂志，2002，10（4）:308-310.
（收稿日期:2004-09-15）
（编辑含 秋）
作者单位:224200江苏省东台市人民医院