检测妊娠相关蛋白A筛查不良妊娠的应用分析

【摘要】  目的 探讨确定不同孕周的孕妇其妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的正常参考值，分析PAPP-A水平与不良妊娠的关系。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定孕妇血清PAPP-A浓度，统计各孕周孕妇PAPP-A值，并讨论不良妊娠与PAPP-A的关系。结果 正常孕妇从第5周开始PAPP-A含量随孕周上升，39孕周达高峰（1 161 mg/L），而异常妊娠的PAPP-A明显低于同期妊娠的正常孕妇，其中以无脑儿、胎儿宫内发育迟缓（IUGR）、脑积水、宫内死胎及先兆流产的降低尤为明显。结论 PAPP-A可作为孕妇早期产前筛查的一个指标，对于PAPP-A低值的孕妇提示有不良妊娠结局的可能。

【关键词】  妊娠相关血浆蛋白A;产前筛查;不良妊娠

Maternal serum level of pregnancy-associated plasma protein A and its association with disadvantage pregnancies

    LI Ji-hong，JIANG Xing，MIN Xiang.Department of Obstetrics,the Women and Children Health Hospital of Zhuhai City in Guangdong province,Zhuhai 519000,China

    ［Abstract］  Objective  To establish our laboratory expected PAPP-A concentration values and to analyze the relationship between the serum level of PAPP-A and disadvantage pregnancies Methods  Blood samples from 10 450 pregnant women were assayed for PAPP-A by enzyme-linked immunosorbent assay-ELISA-kits SPSS 130 software was performed to obtain the expected PAPP-A values All of the disadvantage pregnancies in groups were analyzed about PAPP-A concentrationResults  PAPP-A content of normal gravidity rises from the fifth week of pregnancy untill reaching the peak（1 161 mg/L） at the 39th week But that of abnormal pregnancy was obviously lower,especially in cases of anencephaly,intrauterine growth retardation（IUGR）,hydrocephalus,Intrauteine fetal death and threatened abortion.Conclusions  PAPP-A is a very useful marker for prenatal screening in early pregnancy,and depressed levels also suggest a possible unfavorable outcome of the pregnacy.

    ［Key words］  pregnancy-associated plasma protein A;prenatal screening;disadvantage pregnancy

    1974年Lin等［1］首次从孕妇血清分离得到妊娠相关血浆蛋白A（pregnancy-associated plasma protein A,PAPP-A）以来，国内外学者对其进行了大量的研究［2,3］,随着对PAPP-A的生物学特性和功能的深入研究以及PAPP-A的检测方法的改进,发现PAPP-A与多种产科并发症和异常妊娠结局有密切联系,对异常妊娠的预测和监护具有重要的临床应用价值［4,5］。妊娠早期孕妇血清中PAPP-A水平的变化对异常妊娠的预测价值,引起了学者们的重视［6］。本研究通过检测各孕周孕妇PAPP-A浓度值,以探讨PAPP-A与不良妊娠的关系。

    1   资料与方法

    11   资料来源  选择2002年9月至2007年12月来我院产科和优生门诊就诊的9～14周孕龄的单胎孕妇,就诊时无糖尿病、妊高征等并发症，共计10 450例，年龄20～47岁,平均287岁。孕龄以末次月经计算,少数月经不规律者经超声定胎龄。

    12   样本采集及储存  抽取孕妇肘静脉血2 ml,置一次性采血管内,室温静置1～2 h后2 000 r/min,吸取血清,置-20℃保存备用,试验前放置室温充分解冻,测定之前需混合均匀,同时避免反复冻融。

    13  方法  采用ELISA双抗夹心法检测孕妇血清PAPP-A,试剂盒为芬兰PE公司产品。其具体操作步骤见试剂盒说明书。检测结果低于正常下限值的孕妇视为胎儿染色体异常高危人群,并对其进一步行羊水染色体检查及超声检查,每例受检的孕妇随访追踪到胎儿出生。

    14   统计学方法  所有数据输入SPSS 130 统计分析软件系统处理,采用t检验进行统计学处理。

    2  结果

    21  孕妇血清各孕周段PAPP-A浓度  见表1。表1  孕妇血清各孕周段PAPP-A浓度

    22   不良妊娠孕妇血浆PAPP-A含量变化  异常妊娠包括无脑儿、胎儿宫内发育迟缓（IUGR）、脑积水并发异常、宫内死胎及先兆流产等,其PAPP-A含量见表2。显示这些异常妊娠孕妇的PAPP-A血清值较同孕周正常孕妇有明显降低，差异有统计学意义。表2  各种异常妊娠的孕妇血清PAPP-A异常妊娠

    3  讨论

    无创伤性产前诊断越来越引起人们的重视。近年来，测定孕妇血浆PAPP-A含量变化在筛查异常胎儿方面得到国内外学者的证实和重视。PAPP-A是与妊娠相关联的一种大分子糖蛋白,于妊娠第5周开始在孕妇血清中即可检出，孕早期血清浓度上升比HCG显著,随孕周增加其含量逐渐升高,直至孕末期达高峰,产后开始下降,半衰期约3～4天，至产后6周血清中即测不到。孕期PAPP-A变化不同于其他胎盘蛋白如人胎盘生乳素（HPL）,妊娠特异糖蛋白1（SP1）,孕34～36周胎盘生长停止后PAPP-A含量持续升高，且发现胎盘后血管内PAPP-A含量低于子宫静脉血内PAPP-A含量，孕末期蜕膜组织中PAPP-A含量比滋养层组织内PAPP-A含量高3倍［7］。

    Lin等［8］研究发现，在孕4～6周孕妇血清中即可检出PAPP-A，且随着孕周增加而上升，直至足月分娩达高峰，用抗PAPP-A抗体测定足月妊娠血PAPP-A含量约为50 mg/L，产后开始下降，至产后6周血清中即测不到。张为远等［9］用单向免疫扩散法测定妊娠晚期PAPP-A可高达（324±87）mg/L，羊水中PAPP-A含量的增加与母体血中浓度平行，足月分娩时母血中PAPP-A浓度是羊水的10倍。该蛋白在孕妇尿中、胎儿体内、脐血均未测出，推测PAPP-A可能不分泌到尿液中，同时因分子量大不能通过胎盘屏障进入胎儿血液循环。其机制尚待研究。

    本研究采用双抗体夹心酶联免疫法检测10 450例不同孕周正常孕妇PAPP-A含量变化,与国内采用酶免疫法正常参考值相同。结果发现早期正常妊娠孕妇血清PAPP-A的水平表现为：孕周大的孕妇其血清PAPP-A水平显著高于孕周小孕妇。本结果与其他研究基本一致［9］。PAPP-A是产生于胎盘滋养层合体细胞和蜕膜细胞的一种与妊娠有关的胎盘蛋白，随妊娠进展，胎儿逐渐发育，胎盘逐渐增大，产生的以PAPP-A逐渐增多，PAPP-A水平可能与胎盘发育成熟有关。PAPP-A有可能作为早孕诊断指标及孕期胎儿健康状况的检测指标。

    本实验共筛查出高危孕妇312例，其中无脑儿21例，脑积水并发育异常45例，宫内死胎68例，羊水过多106例，先兆流产34例，胎儿宫内发育迟缓38例，各组的PAPP-A值与相应的正常孕妇组相比差异有显著性，笔者认为对于PAPP-A低值的孕妇提示有不良妊娠结局的可能；本试验提示在PAPP-A浓度值降低孕妇有不良妊娠结局的可能；在孕9～14周都可进行PAPP-A的检测，对于不良妊娠结局具有重要的意义。该项检测取材方便安全，操作简单，成本较低，在提高我国人口素质的过程中值得推广应用。

    总之，PAPP-A作为一种无创性产前诊断的新趋势，可用于妇产科临床，其优点是对胎儿无创，尤其在预测流产、宫外孕及胎儿畸形等方面有较大的价值和意义，对孕期多种合并症进行筛查监护，有效地降低异常新生儿的出生，值得临床推广和研究。

【参考文献】
  1 Lin TM,Halbert SP,Kiefer D.Qrantitative analysis of pregnancy associated plasma protein in human placenta.Clin lnvest,1976,57: 466-468.

2 Wald NJ,Ggorge L,Smith D,et al.Serum screening for Down,s syndrome between 8 and 14 weeks of pregnancy. Brish Journal of Obstertrics and Gynaecology,1996,103:407-410.

3 Roberts D,Walkinshaw SA,Mccormack MJ,et al. Prenatal detection of trisomy 21:combined experience of two British hospitals.Prenat Diagn,2000,20:17-22.

4 Yaron Y,Ochshorn Y,Tsabari S,et al.First-trimester nuchal translucency and maternal serum free beta-hCG and PAPP-A can detect triploidy and determine the parental origin.Obstet Gynecol.2004,104（1）:30-36.

5 龚颖萍，王华，方超英，等.妊娠相关蛋白A测定筛查胎儿先天缺陷的临床应用.医学临床研究，2003，20（3）：171-175.

6 吴忠琴，杨雪，郭敬芝，等.孕妇血清妊娠相关蛋白A检测及意义.放射免疫学杂志，2004，17（1）：76-77.

7 秦桂萍，刘惠喜.PAPP-A及其在妇产科临床的应用价值.国外医学:妇幼保健分册，2000，11（1）：31-35.

8 Lin TM,Galbert SP,Kiefer D,et al.Charaeterization of for human pregnaney-assoeiated plasma proteins.Am J Obstet Gyneeol,1974,118 （2）:223-236.

9 张为远，滕红.正常和异常妊娠孕妇妊娠相关血浆蛋白A水平的探讨.中华妇产科杂志，1995，30（3）：164-166.

（本文编辑：李晓言）

作者单位：519000 广东，珠海市妇幼保健院产科