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【摘要】 目的 探讨肺炎衣原体（CPn）血清抗体滴度升高与缺血性脑卒中的关系。
方法 应用微量免疫荧光法（MIF）检测70例缺血性脑卒中患者与70例正常对照者CPn血清特异性IgG和IgM抗体滴度，滴度>/=1:16为阳性。结果 病例组IgG抗体阳性率为95.6%，对照组为73.5%;IgM抗体阳性率均为2.9%;两组IgG抗体阳性率差异有非常显著性（P<0.01）;IgG滴度几何均数分别为84.6±2.78;30.7±2.32。缺血性脑卒中患者血清CPn慢性感染率及其抗体滴度几何均数均高于对照组。而两组IgM抗体阳性率无差异性。结论 CPn慢性感染可增加缺血性脑卒中发病的危险性。
关键词 肺炎衣原体 血清抗体 缺血性脑卒中
肺炎衣原体（CPn）主要引起人的非典型性肺炎，同时还可侵犯身体许多器官及组织，流行病学和病原学研究认为，CPn感染与心血管疾病相关。近年来感染与动脉粥样硬化的关系越来越受到重视，但与缺血性脑卒中关系的研究资料有限，本研究通过对缺血性脑卒中患者检测CPn血清特异性抗体 来说明两者的关系。
1 资料与方法
1.1 研究对象 病例组:2002～2003年连续在我科住院的缺血性脑卒中患者70例，其中腔隙性脑梗塞28例;脑血栓形成42例。缺血性脑卒中诊断及分类均符合WHO脑血管病的临床诊断标准，经颅脑CT或MRI证实，其中男49例，女21例。对照组:同时期来我院门诊体检的健康者及志愿者70例，年龄与病例组相似，其性别相匹配，均由数字随机抽取。排除对象:心源性脑栓塞、深部静脉栓塞、肿瘤及自身免疫性疾病;以及近期有急性上呼吸道感染、急性支气管炎和肺炎等呼吸道疾病的患者。
1.2 测定方法 所有观察对象均于早上6～9时空腹抽肘静脉血（病例组为入院后第二天清晨），取3ml离心后血清保存于-20℃冰箱，直至用于微量免疫荧光抗体检测法（MIF）测定，用来检测CPn血清特异性IgG和IgM抗体滴度。
1.3 MIF的诊断标准 ［1］ 为 （1）急性感染:IgM>/=1:16或IgG>/=1:512;（2）慢性感染:1:16</=IgG<1:512;（3）未感染过:IgG<1:16。
1.4 统计学方法 采用卡方检验和t检验，使用 SPSS11.0软件包。
2 结果
两组CPn-IgG与IgM抗体阳性率及抗体滴度见表1。本研究病例组70例，平均年龄为59.9±4.7岁，男性70%;女性30%。CPn-IgG>/=1:16阳性70例，说明CPn感染的总阳性率为95.6%;其中CPn急性感染（CPn-IgG>/=1:512或IgM阳性）8例;CPn慢性感染57例;CPn-IgG与IgM均阴性者3例。对照组68例，其中男48例，女20例，平均年龄54.7±2.6岁。CPn-IgG总阳性50例;其中CPn急性感染2例;未感染者17例;CPn慢性感染（1:16</=IgG<1:512）有49例。 表1 两组CPn-IgG及IgM抗体阳性率及抗体滴度 （略）总数注:病例组与对照组慢性感染阳性率比较，P<0.01;急性感染阳性率比较，两组差异无显著性，P>0.05两组IgG抗体几何平均滴度（GMT）比较，P<0.01;两组IgM抗体阳性率比较，两组无差别，P>0.05。
3 讨论
近年来，国内外不少研究通过对病变血管进行病理学、分子生物学、免疫化学等方面的研究，找到了CPn存在的证据，从而提出CPn与动脉粥样硬化、缺血性心脏病有关。一般在临床上证实CPn感染大多靠血清学检查。检测CPn最常用的血清学方法是微量免疫荧光抗体检测法（MIF）。人类感染CPn后会出现抗CPn血清抗体。初次感染时，大约在发病3周后出现IgM抗体，6～8周出现IgG抗体，再次感染或重复感染后，常在1～2周内出现较高水平的IgG抗体。目前诊断CPn既往或慢性感染的标准有:1:16≤IgG滴度<1:512（即≤1:256）;有人认为1:256≥IgG滴度应≥1:64;本资料是以前者为标准。有学者把既往感染与慢性感染分开，把慢性感染标准定为:IgA滴度≥1:8;由于IgA抗体的半衰期短，对它是否作为诊断的有用指标还有争议，也有人认为IgA抗体对判断慢性感染不是一个有用的指标，现多认为，判断CPn慢性感染的指标是IgG水平的增高。判断急性感染标准均比较认同为:（1）双份 血清IgG和/或IgM滴度升高4倍以上;（2）IgM滴度 ≥1:32;（3）IgG滴度≥1:512;上述3项符合1项即可诊断。也有人认为急性感染中IgM滴度≥1:16即可，本资料也以此作标准。因此两组都有观察对象显示阳性。不同的文献研究的方法即使都采用MIF检测，但诊断标准不同，得出的结论也有差别，这与使用的试剂及测定步骤不尽相同外，IgM本身也易受类风湿因子的影响有关。
从病例组发现绝大多数为老年患者，支持脑血管病发病率随年龄增加而增加的规律。由于其中男性占多数，也可能是男性动脉硬化发生率较高的反映。有研究对无症状性CPn感染的健康成人进行血清学检查，结果发现老年男性CPn抗体的阳性率高于女性，这与男性易患动脉粥样硬化的结论相一致，并随访6个月，认为CPn感染组的事件发生率高于非感染者（P<0.05），而本研究发现男性与女性患者CPn抗体阳性率构成比有差异。有报告在健康人群所做的CPn血清学检查中，约50%以上成年人可以有CPn抗体，发现CPn感染非常普遍 ［2］。本组研究中正常对照者CPn感染率超过50%，也证明了这一点。
缺血性脑血管病已知的危险因素主要有高血压、糖尿病、高胆固醇血症及吸烟等，目前认为CPn是最可能致动脉粥样硬化的感染物，而且CPn感染还可能协同其他的危险因素共同对心脑血管起致病作用。现陆续有文献报道CPn感染与脑血管病的关系。Kawanoto ［3］等观察40例缺血性脑血管病的老年患者与85例无脑卒中病史老年对照者，用酶-联免疫分析法检测CPn-IgG滴度，87.0%动脉粥样硬化性血栓形成及66.7%腔隙性脑梗塞、50.0%其他类型脑便死患者显示阳性，对照组阳性率为61.2%。在多重回归分析中，CPn血清阳性是脑卒中独立危险因素（P=0.017），并与动脉血栓性脑梗塞相关。说明CPn感染也是缺血性脑血管病的一个重要危险因素。Chiu-B ［4］ 等用免疫组织化学法检测颈动脉粥样硬化斑块中CPn阳性率为71%。Virok ［5］ 用电镜检测5例CPn-PCR阳性的粥样化大脑中动脉斑块，有4例见到典型CPn原体，说明病变组织中有活的CPn存在，而对照者均阴性。本组研究发现脑梗塞患者血清CPn-IgG抗体阳性率（P<0.01）及抗体滴度几何均数明显高于对照组（P<0.05），大多数患者含高滴度的IgG抗体，不仅说明了观察组大多数患者处于CPn慢性感染期，也证实了持续性、高滴度的IgG抗体是判断CPn慢性感染的一个重要指标，并提示CPn可能参与动脉粥样硬化的发病机制和病理过程。而两组CPn-IgM抗体阳性率无差异，说明CPn急性感染相关性弱。
脑梗塞不同的病灶能否可以找到存活的CPn，以及它与病变严重程度的关系，或CPn如何参与炎症活动，其发生机理尚未完全清楚，可能CPn作为 缺血性脑血管病的一个加速因素。它大多经呼吸道 传播，入血后释放脂多糖，脂多糖与低密度脂蛋白结合，使脂蛋白产生抗原性或对内皮细胞产生毒性，经修饰的或与抗体结合的低密度脂蛋白可导致泡沫细胞的形成 ［6］ ，从而影响脂质代谢。另外，CPn感染还引起白细胞介素-1、6和肿瘤坏死因子（INF）、热休克蛋白60等多种介质产生和释放 ［7］ ，共同参与炎症反应;如白细胞介素-1引起胶原产生，刺激成纤维细胞和平滑肌细胞增殖;INF可抑制脂蛋白酯酶活性 ［8］ 。这些均可促进动脉粥样硬化的发生和发展。至今CPn感染与缺血性脑血管病的相关性尚未完全证实，我们的研究显示这种相关性，随后我们继续进行抗生素应用与CPn血清学变化的研究，以了解抗生素是否有效地预防脑血管病再发或复发。
参考文献
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8 Kawakami M，Pekala PH，Lane MD，et al.Proc Natl Acad Sci USA，1982，79（3）:912-916.
（收稿日期:2004-07-06）
作者单位:518033深圳广东医学院附属福田医院神经科（ ˇ 心血管 病实验室） （编辑李 木）