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【摘要】 目的 研究脐血与成人外周静脉血超氧化物歧化酶(SOD)活性及与红细胞免疫功能(C 3 b-RR)的相关性。 方法 采用黄嘌呤氧化酶法检测脐血和健康成人静脉血中SOD(Cu-Zn)含量,用红细胞免疫黏附实验检测脐血和健康成人红细胞上的C 3 b活性。 结果 脐血SOD含量及C 3 b活性显著高于健康成人(P>0.05)。 结论 胎儿期红细胞免疫功能高于成人,SOD值与红细胞免疫功能呈正相关性。
关键词 脐血 超氧化物歧化酶 红细胞免疫功能
SOD是一种重要的氧自由基(O -2 ·)清除剂,它是一种金属酶,广泛存在于生物体内,不仅在清除(O -2 ·)方面有独特的作用,并与红细胞免疫密切相关。笔者对脐血与健康成人SOD含量及红细胞免疫功能(C 3 b-RR)进行测定,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本采集 选择健康20例足月顺产,无各种传染病,在胎儿娩出胎盘未剥时,距胎儿端5cm处断脐,在脐带上静脉穿刺采血(肝素100u/ml),外周血采自健康成人新鲜静脉血。
1.2 试剂与方法
1.2.1 脐血及正常成人红细胞SOD抽提 取脐血及成人红细胞(肝素抗凝血)0.1ml加入4~8ml生理盐水中,2000r/3min离心,剩余血同时测血红蛋白浓度。吸去上清,加入冰双蒸水0.4ml,混匀。加入95%乙醇0.2ml,置旋涡振荡器振荡混匀90s;再加入三氯甲烷(氯仿)0.2ml,置旋涡器上混匀3~5min,3000r/min离心,离心后上述液体分3层:上层为SOD抽提液,中层为血红蛋白沉淀物,下层为三氯甲烷层,记录上清液体积,取10~20μl分别做SOD测定。
1.2.2 RBC-SOD(Cu-Zn)活性测定 采用南京建成生物工程研究所提供的黄嘌呤氧化酶试剂盒,结果用日本岛津分光光度计比色。
1.2.3 红细胞C 3 b活性测定 参照郭峰法 [1] 。
2 结果
脐血及成人外周血SOD及红细胞免疫功能检测结果见表1。
表1 脐血与成人外周血SOD酶及红细胞免疫功能结果比较 (略)
脐血组与对照组比较:经统计学处理,二组间差异显示:脐血SOD、红细胞免疫功能(C 3 b-RR)均明显高于成人组(P<0.05)。
3 讨论
氧是生物体内重要的电子受体,参与生物的化学反应,红细胞的重要功能之一是携带氧,供给组织呼吸利用。氧合血红蛋白在组织中分解为血红蛋白和氧。如发生自动氧化,则生成高铁血红蛋白(O -2 ·),因此,细胞中常有少量(O -2 ·)生成。(O -2 ·)是生物体内重要的超氧化物阴离子自由基,在很多情况下,对机体是有害的,是导致炎症、衰老及癌变等原因之一。红细胞属于需氧代谢细胞,富含SOD酶,该酶是一类重要的氧自由基清除剂,它能使细胞和组织免受损伤,保护和增强免疫细胞(T、B、NK、K、LAK、吞噬细胞)的作用 [2] 参与机体复杂的免疫调控作用,是体内红细胞免疫功能的重要物质之一。其含量与CR1活性有关,当红细胞发生免疫黏附时,SOD含量增加,有利于清除炎症反应中生成的氧自由基,且RBC-C 3 b与SOD酶二者有显著的正相关 [3,4] 。本文对脐血及成人红细胞SOD酶、C 3 b-RR的测定结果显示:脐血组明显高于成人静脉血组,且二者呈明显的正相关性,与文献报道相一致。胎儿期红细胞特征与成人有所不同,胎儿血红蛋白类型不同于成人,胚胎型Hb最早出现在第5周,胎儿血中至12周可检出由胚外造血器官中的原始成红细胞,成人型Hb在妊娠8~10周可检出Hb。含量一般不超过Hb总量的20%。胎儿HbA虽上升,但仅占30%~40%,胎儿型Hb和成人HbA结构的不同决定了他们理化性质的差异,HbF对2、3-DPG亲合力高,故与氧亲合性强 [5] 加之脐血红细胞数量及体积均大于成人。推测,脐血RBC携氧能力强,SOD生成较成人高。曾有学者报道:SOD生成是(O -2 ·)诱导所致,通常情况下其生成与体内(O -2 ·)水平相适应 [6] 。提示可能在新生儿期,吞噬系统尚未成熟,白细胞免疫功能处于低下状态,红细胞免疫对清除体内有害物质维持胎儿体内的生理平衡可能有重要意义。
参考文献
1 郭峰,郭健.肿瘤红细胞免疫学研究.济南:山东科学技术出版社,1997,102-103.
2 刘景田,张洁.红细胞免疫学.西安:陕西科学技术出版社,1995,10.
3 郭峰,络永珍,凌昌全,等.红细胞免疫学新探.南京:南京大学出版社.1993,5:161.
4 于爱莲,王学勤,张丰雪.血栓闭塞性脉管炎患者红细胞免疫功能与SOD和LPOUD关系的研究.红细胞免疫学新探,1993,5:199.
5 沈柏均,隋星卫.人类脐血基础临床.天津:天津科学技术出版社,1995,41.
6 王文波,刘景昌,郭峰,等.高压氧对SOD大鼠红细胞免疫功能和SOD的影响.中国免疫学杂志,1995,8(11)增:177.
(编辑子 善)
作者单位:154007黑龙江省佳木斯市红十字中心血站