重组人生长激素对化疗大鼠外周血象的影响

    【摘要】  目的  探讨重组人生长激素（rhGH）对化疗大鼠外周血细胞学指标的影响。方法  实验分空白对照组、生理盐水组、rhGH组、化疗组和化疗+rhGH组。给药后第7天、14天、21天和28天应用血液自动分析仪检测实验各组大鼠外周血中各系细胞的变化。结果  给药后第7天rhGH组网织红细胞绝对数较其他各组明显增加（P<0.05）；化疗组和化疗+rhGH组外周血液中的白细胞（WBC）、血红蛋白（Hb）和网织红细胞数较其他各组明显降低（P<0.01），但化疗+rhGH组WBC数和网织红细胞绝对数减少程度明显低于化疗组（P<0.05）。给药后第14天化疗组和化疗+rhGH组外周血中红细胞数（RBC）和Hb与其他各组比较明显降低（P<0.05），但化疗+rhGH组减少程度明显低于化疗组（P<0.05）；化疗+rhGH组网织红细胞绝对数较其他各组明显增加（P<0.05）；各组间WBC比较差异无显著性（P>0.05）。给药后第21天，化疗组RBC、Hb计数低于对照组（P<0.05），而化疗+rhGH组WBC、RBC、Hb计数与对照组比较差异无显著性（P>0.05），网织红细胞绝对数高于其他各组（P<0.05）。结论  rhGH对化疗大鼠的造血功能有一定的保护作用。

    【关键词】  重组人生长激素；化疗；外周血

      The effect of recombinant human growth hormone on peripheral blood in intraperitoneal chemotherapy rats

    ZHANG Yi,LIANG Daoming,ZHAO Hui,et al.The Emergency Department of The 2nd Affiliated Hospital of Kunming Medical College,Kunming 650101,China

    【Abstract】  Objective  To investigate the effect of recombinant human growth hormone (rhGH) on peripheral blood in chemotherapy rats.Methods  In the experiment rats were randomized into normal group,control group,rhGH group,chemotherapy group and chemotherapy plus rhGH group. On day 7,14,21,28 after administration,peripheral blood was analyzed by automatic blood cell counter.Results  Day 7 after administration,reticulocyte count had obviously increased in rhGH group (P＜0.05),while the white blood cell (WBC) count,hemoglobin and reticulocyte count was decreased distinctly (P＜0.05) in chemotherapy group and chemotherapy+ rhGH group,however,the decreased degree in chemotherapy+ rhGH group was less than that in chemotherapy group (P＜0.05). Day 14,the counts of red blood cell (RBC) and hemoglobin were dropped distinctly in chemotherapy group and chemotherapy+ rhGH group (P＜0.05),but the decreased degree in chemotherapy group was more than that in chemotherapy+ rhGH group (P＜0.05). Reticulocyte count of chemotherapy+rhGH group was higher than others (P＜0.05). There was no statistical significance in WBC count (P＞0.05). Day 21,RBC and hemoglobin count in chemotherapy group was less than control group and rhGH group (P＜0.05),and in chemotherapy+ rhGH group the counts of RBC was lower than rhGH group (P＜0.05),while reticulocyte count was higher than others still (P＜0.05).Conclusion  rhGH has a protective effect on myeloid hematopoietic function in intraperitoneal chemotherapy rats.

    【Key words】  recombinant human growth hormone;chemotherapy;peripheral blood

    化疗是治疗肿瘤的一个重要方法，特别在中晚期恶性肿瘤治疗中的地位更不可低估。但绝大多数化疗药物在抑制瘤细胞生长或杀灭瘤细胞的同时，对正常组织、器官不可避免地产生损害或毒性作用，

    尤其是对骨髓造血细胞和胃肠黏膜上皮细胞，常成为增加剂量、提高疗效的主要障碍。同时，肿瘤病人的代谢存在异常，表现为葡萄糖生成和利用异常，脂肪和蛋白分解均增加，瘦肉组织群大量丢失，营养不良、消瘦等癌性恶病质。重组人生长激素（rhGH）具有促进蛋白质合成、维持正氮平衡、调节免疫功能、促进切口愈合、减少术后并发症等特点［1］。作为一种正性生长因子的生长激素，能促进正常细胞的增殖分裂，但能否促进化疗所导致的骨髓抑制的造血细胞的增生，本研究通过腹腔化疗大鼠模型，探讨重组rhGH对正常大鼠骨髓或化疗大鼠骨髓造血功能的影响。

    1  材料与方法

    1.1  材料  健康成年SD大鼠136只，体重（200±50）g，标准鼠食喂养，自由饮水。实验动物随机分为5组，正常对照（空白对照）组8只；溶剂对照（NS）组32只；rhGH组32只；化疗组32只和化疗+rhGH组32只。主要试剂：重组（rhGH，Saizen，瑞士Sernono公司），卡铂（CBP，齐鲁制药厂），氟尿嘧啶（5-FU，上海旭东海普药业有限公司）。

    1.2  给药方法  溶剂对照组：皮下和腹腔分别注射等体积溶剂（生理盐水），每日1次，共6天；rhGH组：皮下注射rhGH 1IU/（kg·d），共6天；化疗组：腹腔注射，第1天给予CBP 70mg/（kg·d），第2、3天每日腹腔注射5-FU，50mg/kg。rhGH+化疗组按上述方法给药。分别于给药后第7天、14天、21天、28天处死大鼠，每组每次8只，取股血管血约0.5ml，用自动分析仪检测WBC、RBC、Hb和网织红细胞计数（RET）。

    1.3  统计学方法  所得数据采用SPSS10.0和PEMS2.0统计软件包进行方差分析、t检验和q检验，检验标准α=0.05。

    2  结果

    见表1，由表1可见：给药后第7天，rhGH治疗组网织红细胞绝对数较各组明显增加（P＜0.05）；化疗组和化疗+rhGH组分别与其他各组比较，WBC数和网织红细胞数明显降低（P<0.01，P<0.05），但化疗+rhGH组WBC数和网织红细胞数减少程度较化疗组低（P<0.05）。给药后第14天，化疗+rhGH组网织红细胞绝对数较其他各组明显增加（P<0.05），化疗组和化疗+rhGH组RBC数和Hb较其他各组明显减少（P<0.05），但化疗+rhGH组较化疗组下降程度低（P<0.05）；WBC数各组间比较差异无显著性（P>0.05）。给药后第21天，化疗组RBC、Hb计数低于对照组（P<0.05）；化疗+rhGH组WBC、RBC、Hb计数与对照组比较，差异无显著性（P>0.05），而RET高于其他各组（P<0.05）。给药后第28天，除化疗+rhGH组网织红细胞绝对数高于其他各组外（P<0.05），余各项指标各组间比较差异无显著性（P>0.05）。表1  外周血WBC、RBC、Hb和RET的变化  注：与空白组和NS组比较，*P＜0.05；与rhGH组比较，#P＜0.05；与化疗组比较，△P＜0.05

    3  讨论

    大多数化疗药物选择性不高，在体内广泛分布，这是化疗药毒副作用较严重的原因。一般来说，化疗药在迅速增殖的组织中含量较高，损伤也较明显。因此骨髓造血细胞对化疗较敏感，常常是导致化疗终止的原因，所以保护造血功能一直是化疗防护的重点。

    3.1  化疗对骨髓的影响［2,3］  骨髓是贮存造血干细胞的器官，骨髓抑制是肿瘤化疗十分常见的毒性反应，约90%以上的化疗可以出现此反应。大多数化疗药物仅对增殖活跃的细胞产生较强的抑制作用，但某些药物无论对静止的还是增殖的造血干细胞都具有直接抑制作用。骨髓抑制的临床表现主要是化疗药物对特定干细胞动力学的影响，它对骨髓中特定的干细胞的损伤将减少周围血液中成熟的、有功能的血细胞数，其减少程度与外周血液中血细胞的生存期有关：红细胞的半衰期是120天，血小板5～7天，粒细胞6～8h，因此化疗对粒细胞的影响最大，往往是被迫减量或停药的最常见原因。5-氟尿嘧啶（5-FU）是胃肠道肿瘤术后常用化疗药物之一，它是一种脱氧胸苷酸合成酶抑制剂。5-FU在体内代谢后主要产生两种活性物质，分别干扰RNA功能及抑制胸苷酸合成酶而阻止DNA合成［4］。5-FU不仅是作用于S期的周期性特异药物，且对增殖细胞均有一定影响，因而其药物毒性较大，骨髓抑制主要表现为白细胞减少，大多在用药后10～14天明显减少，一般停药后2～3周即可恢复。卡铂（CBP）是第二代铂类化合物，是细胞周期非特异性药物。它主要作用于DNA的鸟嘌呤的N1和O6原子上，引起DNA链间及链内交联，破坏DNA分子，阻止其螺旋解链，干扰DNA合成而产生细胞毒作用。其毒性作用较第一代铂类低。其骨髓抑制表现为血小板、血红蛋白、白细胞的减少，一般发生在用药后的14～21天，停药后3～4周恢复。在本研究中可明显观察到：化疗组和化疗+rhGH组分别与空白组、rhGH组比较，在给药后的第7天外周血液中的白细胞（WBC）数明显降低（P<0.01），网织红细胞数也显著下降（P<0.05）；在给药后的第14天外周血中红细胞数（RBC）和血红蛋白减少（P<0.05）。外周血细胞和网织红细胞计数提示：腹腔注射化疗可明显抑制大鼠骨髓的正常造血功能。

    3.2  生长激素对骨髓造血功能的影响  rhGH作为代谢调理素具有明显的促进蛋白合成、纠正负氮平衡、改善营养状况、提高机体的细胞免疫和体液免疫功能。文献报道肿瘤患者术后短期应用rhGH不会促进肿瘤细胞的增殖和增加肿瘤复发的危险性［5～8］，我们的研究结果亦提示短期使用rhGH不会促进胃、直肠癌的生长，与化疗药物同时应用有更好的安全性［9，10］。胃肠道肿瘤患者术后使用rhGH进行代谢调理的同时，能否对术后早期腹腔灌注化疗导致的骨髓抑制有保护作用，我们的实验结果显示：rhGH治疗组在用药后的第7天其网织红细胞绝对数较其他各组明显增加（P<0.05）；而化疗+rhGH组与化疗组相比，虽然都出现了骨髓抑制，但抑制程度较化疗组明显减轻。用药后第1周，化疗+rhGH组WBC数减少程度低于化疗组（P<0.05），网织红细胞绝对数明显高于化疗组。用药后第14天，RBC计数化疗+rhGH组高于化疗组（P<0.05）；而Hb化疗+rhGH组较化疗组下降的程度低，但无统计学意义；网织红细胞绝对数，化疗+rhGH组较其他各组明显增多（P<0.05）。用药后第21天，化疗+rhGH组外周血网织红细胞绝对数高于各组（P<0.05），其他指标与NS组和GH组比较差异无显著性（P>0.05）；化疗组RBC、Hb低于NS组和rhGH组。用药后第28天，化疗+rhGH组网织红细胞绝对数仍高于各组（P<0.05）。研究提示：rhGH对化疗造成的骨髓抑制有一定的保护作用，在体内能促进造血细胞的增生。

    rhGH促进造血的机制仍不清楚。目前认为可能有以下几方面的原因：（1）rhGH可能直接刺激骨髓造血干细胞增殖。Golde和Merchav的实验研究发现rhGH在体外可促进红系细胞和粒系细胞成熟［11,12］。（2）rhGH可能通过提高骨髓细胞对促生长因子的敏感性或rhGH与特有的生长激素受体结合产生的活性作用［13］。（3）rhGH本身可通过组织细胞的生长激素受体直接起作用，但绝大部分作用是通过胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor,IGF）介导［14］，IGF-1在体内同样也可促进造血［15］。因此，rhGH可能通过诱导IGF-1的释放来促进骨髓细胞的增殖。（4）rhGH有明显的促进蛋白合成、纠正负氮平衡、改善营养状况、提高机体的细胞免疫和体液免疫功能，保存了宿主身体成分，从而提高了宿主对化疗的耐受性，部分中和了化疗的毒副作用［16,17］。

    综上所述，合理应用rhGH可改善化疗宿主代谢状况，提高宿主对化疗的耐受性，同时能减轻化疗对骨髓的毒副作用。

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    作者单位： 650101 云南昆明,昆明医学院第二附属医院急诊科（△通讯作者）

　　 (编辑：杨  熠)