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【摘要】 目的 研究不同溶血程度对甲状腺激素放射免疫测定结果的影响。方法 配制5个项目(FT3、FT4、T3、T4、RT3)相同待测物浓度的未溶血、轻度、中度、重度溶血标本并对其进行检测,用检验比较溶血标本与未溶血标本结果差异的显著性。结果 FT3、T3、T4、RT3等这些项目溶血对放免测定结果无明显影响,FT4中度、重度溶血组P<0.05,说明溶血对该项目测定结果有影响,但中度、重度溶血组均值与未溶血组均值相差不大,其误差分别为7.36%、5.69%,中、重度溶血组批内变异也不大,分别为7.94%、8.45%。结论 溶血对放射免疫测定结果基本无影响,其测定结果对临床仍有参考价值。
【关键词】 溶血;甲状腺激素;放射免疫
在临床科室送的标本中,时常有不同程度溶血标本,溶血对放射免疫测定结果有否影响?影响程度如何?这些标本能否检测,对临床有无参考价值?为此,我们做了如下试验,观察不同项目(FT3、FT4、T3、T4、RT3)3个血红蛋白(HGB)浓度的溶血标本与未溶血标本测定结果,经统计分析,了解溶血对放射免疫测定结果的影响,报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 血液标本
健康人空腹静脉血3ml,用西斯美康3500型血液自动分析仪测其HGB为175g/L备用。
1.1.2 仪器
XH6020放射免疫计数器,西安市国营二六二厂生产。
1.1.3 试剂 FT4、
FT4试剂由天津九鼎医学生物工程有限公司提供,采用液相平衡竞争放射免疫分析法。T3、T4、RT3试剂由北京北方生物技术研究所提供,采用竞争抑制法。
1.2 方法
1.2.1 确定轻、中、重度溶血的血红蛋白浓度
将抗凝全血混匀,用蒸馏水做1∶10、1∶20、1∶40到1∶320、1∶640、1∶1280稀释,混匀,观察溶血程度,经实验室多人观察确定1∶320、1∶160、1∶80稀释度分别为轻度(HGB 0.55g/L)、中度(HGB 1.1g/L)、重度(HGB 2.19g/L)溶血。
1.2.2 不含血浆175g/L血红蛋白浓度血细胞混悬液的配制
取1ml抗凝全血,加生理盐水适量混匀,1000rpm离心5min,弃上清,如此洗涤红细胞3次,最后加生理盐水补足1ml。
1.2.3 配制1∶20稀释度溶血液
取不含血浆175g/L HGB血细胞混悬液0.1ml加蒸馏水1.9ml,混匀,使红细胞充分破坏,备用。
1.2.4 配制相同待测物浓度的未溶血、轻、中、重度溶血标本
根据各项目测定范围,选取该范围内适当浓度的多份血清混匀,分别加混合血清1ml于未溶血、轻、中、重度溶血管中,按表1加1∶20稀释度溶血液、生理盐水,这样配制的每组溶血及未溶血标本若溶血对测定结果无影响,理论上测定结果应相同,经t检验,结果应差异无显著性。表1 不同程度溶血标本配制表 (略)
、
2 结果
将上述各项目相同待测物浓度的未溶血、轻、中、重度溶血标本设10支复管,各测得10个浓度值,分别计算均值(x)、标准差(s),结果见表2,经轻度、中度、重度溶血组结果与未溶血组做t检验,除了FT4中度和重度溶血组外,其他项目P>0.05,差异无显著性,该试验结果表明FT3、T3、T4、RT3等这些项目溶血对放免测定结果无明显影响,FT4中度、重度溶血组P<0.05,说明溶血对该项目测定结果有影响,但中度、重度溶血组均值与未溶血组均值相差不大,其误差分别为7.36%、5.69%,中、重度溶血组批内变异也不大,分别为7.94%、8.45%,说明溶血对测定结果影响不大,测得结果对临床仍有很大参考价值。表2 不同程度溶血标本测定与统计处理结果(略)
3 讨论
本次试验考察溶血对测定结果的影响,所用放免检验方法包括了目前较常用的方法,试剂厂家有天津九鼎医学生物工程有限公司、中国北京北方生物技术研究所,项目有甲功系列,试验结果应该有一定普遍性,溶血对放射免疫测定结果基本无影响,若有,影响也不大,测定结果对临床仍有参考价值。特异性是放射免疫分析方法的两大优点(特异性和敏感性)之一,抗原抗体反应可以分辨大分子物质一个原子的差别(例如T3和T4),虽然组成红细胞的化学成分复杂,但只要红细胞成分不引起交叉反应及反应体系pH没有较大变化,理论上溶血应对放免测定结果没有影响。另外,本次试验的设计没有考虑溶血对待测标本血清体积的影响,如果溶血对待测血清的稀释作用大到使测定结果明显降低,那溶血一定非常严重。那样的标本当然不可用。本次试验消除了笔者在放免工作中的许多疑虑,较详尽全面的试验数据对放免工作有一定指导作用。
作者单位: 830000 新疆乌鲁木齐,兰州军区乌鲁木齐总医院核医学科
(编辑:唐 城)