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【摘要】 目的 探讨儿宝颗粒对小儿厌食症胃内SP、SS及外周血5-HT的调节作用。方法 饮食不当法复制小儿厌食症大鼠模型，通过测定外周血中5-HT，胃中SP、SS的含量变化，以及胃病理形态学改变，观察儿宝颗粒的作用效果。结果 儿宝颗粒可以改善厌食症大鼠外周5-HT、SP、SS含量改变，小剂量儿宝还可改善其病理形态学改变。结论 儿宝颗粒可改善厌食症大鼠黏膜及腺体，并对5-HT、SP、SS有调节作用。
【关键词】 儿宝颗粒；厌食症；5-HT；SP；SS
小儿厌食症（Pediatric Anorexia）是消化功能紊乱（disorders of digestive function）引起的疾病之一，小儿时期很常见；长期厌食可导致营养不良和体质减弱，并发缺铁性贫血、佝偻病、反复呼吸道感染等疾病。已证实，儿宝颗粒具有改善厌食症大鼠食欲并对胃泌素、CCK、β-EP等有调节作用［1，2］。本实验进一步研究了相关胃肠激素-P物质（SP）、生长抑制素（SS）水平，以及血液相关因子5-羟色胺（5-HT）含量，以深入探讨儿宝颗粒治疗小儿厌食症的作用机制。
1 材料与方法
1.1 试验药物与试剂 儿宝颗粒由南京中医药大学植物药深加工中心提供，根据给药量用蒸馏水稀释成大小两个剂量。特制饲料由奶粉、鱼粉、玉米粉、豆粉、鲜鸡蛋、鲜猪肉、白糖按一定比例（1：1：1：2：1.8：2：1）混合烧烤制成。SP、SS一抗与其检测系统均为北京中山生物技术有限公司提供，产品编号为ZA-0235、ZA-0232。5-HT测定试剂由南京建成生物工程研究所提供，批号20031130。
1.2 动物 健康清洁级SD大鼠48只，体重（83.91±8.11）g，雌雄各半，鼠龄40～45天。中科院上海实验动物中心提供。养殖在南京中医药大学动物中心清洁级实验室。
1.3 仪器 北航Cmias 98A图像分析仪；Olympus BX60系列显微镜显微摄片系统；岛津RF-5301荧光分光光度计。
1.4 方法
1.4.1 小儿厌食症大鼠模型的建立 按文献［3］采用病因模拟法，用特制饲料喂养1周。
1.4.2 分组及处理 动物48只随机分为4组，每组12只，分别是正常对照组（普通饲料喂养，每天给蒸馏水20ml）、模型组（造模，每天给蒸馏水20ml）、儿宝小剂量组［造模，一周后给药0.162g/（只·d），用蒸馏水配成20ml］、儿宝大剂量组［造模，一周后给药0.324g/（只·d），用蒸馏水配成20ml］。共喂养4周。各组均灌胃给药。儿宝颗粒小剂量为5岁儿童剂量按体表面积折换成大鼠临床等效剂量，大剂量为小剂量的2倍。
1.4.3 标本采集及检测 每周观察动物进食量及体重变化，在实验结束后，所有动物在同一时段去眼球采血，每例4ml，分离血清，低温冰箱（-40℃）保存待测。脱颈处死动物，取胃底组织面积为1.5cm×1cm，固定、包埋、切片，覆多聚赖氨酸，HE染色后待测。用免疫组化法将胃组织切片分别用SP、SS一抗染色后分析结果，由于SP、SS表达含量与其平均光密度值成正比，因此，我们用平均光密度值来比较各组中该物质表达含量的多少。血清中5-HT的含量检测用荧光分光光度法进行。
2 结果
2.1 儿宝颗粒对大鼠胃底病理形态改变的影响 模型组胃黏膜变薄，腺体有萎缩；儿宝小剂量组胃结构基本接近正常组织结构，未见明显病理形态学改变；大剂量组胃全层结构较薄，环行肌层的平滑肌细胞个数减少，部分腺体有萎缩。
2.2 儿宝颗粒对大鼠胃底组织中SP、SS表达的影响 儿宝应用后可使模型大鼠SP表达加深，使模型大鼠含SS细胞数减少，色泽加深。见图1、2。
2.3 儿宝颗粒对大鼠胃底组织中SP、SS表达含量以及血清中5-HT含量的影响 见表1。表1表明，儿宝颗粒治疗后可使血清中5-HT含量回升；胃底部SP表达含量均有上升趋势，而SS的表达则并不具有明显规律性。分析认为，SS阳性表达细胞的数量相差很大， 由于SS的表达含量不但与平均光密度有关，还与其阳性细胞个数有关。因此，每组取相同数目（50个）视野，可用每个视野SS平均光密度之和来表达SS含量。结果显示治疗后SS表达有减少趋势。表1 各组大鼠外周血5-HT含量及胃底组织中SS、VIP、SS平均光密度结果比较 注：与对照组比较，*P<0.05 ；与模型组比较，△P<0.05
3 讨论
小儿厌食症的发生以膳食结构不合理，损伤脾胃为主要病因，导致脾运失健。儿宝颗粒具有调理脾胃、扶助运化的作用，临床主要用于治疗小儿厌食症。
SP具有很强的刺激作用，可使胃肠道平滑肌协调收缩，促进胃肠运动，产生正常的胃肠动力。VIP运动神经元使胃肠及其括约肌舒张。SS可广泛抑制胃肠运动，包括胃排空、胃分节运动等；三者协同，以完成正常的生理性胃肠运动。5-HT对食管黏膜肌肉层有松弛作用，还能促进肠在消化期的蠕动反射［5］。本研究表明：小儿厌食症大鼠模型胃底部5-HT与SP减少， SS增加，这可能是导致厌食症动物模型胃肠动力下降的机理之一。应用儿宝颗粒，可以不同程度地扭转病理模型大鼠体内SP、SS、VIP、5-HT等胃肠激素的含量变化，从而改善胃肠动力，协助消化，起到“健脾助运”的作用。但大剂量和小剂量的疗效优劣，本实验尚不能得出明确的结论。
值得注意的是，由于SS每组阳性细胞数目差异过大，我们选择了平均光密度和每视野平均光密度总和来表示其含量变化。儿宝颗粒的应用可以使其平均光密度增高而阳性细胞数大大减少，也就是总量减少而每个细胞的分泌能力增加，提示临床等效剂量儿宝颗粒对于分泌细胞的功能恢复有一定促进作用。此外，病理形态学研究同时表明：儿宝颗粒小剂量对于胃底黏膜及组织的保护作用要优于大剂量。（本文图片见封三）
【参考文献】
1 杜永平，张月萍，汪受传，等．儿宝颗粒对小儿厌食症动物模型胃泌素的调节作用．成都中医药大学学报，2000，23（1）：44.
2 张月萍，杜永萍，汪受传,等．儿宝颗粒对小儿厌食症动物模型脑肠肽的调节作用．中国中西医结合杂志，2000,20（10）：764-766.
3 汪受传，张月萍，陶勇，等．特制饲料喂养幼龄大鼠建立小儿厌食症模型．南京中医药大学学报,1999,15（3）：140.
4 汪受传，尤汝娣，郁晓维，等．运脾方药治疗小儿厌食症的临床与实验研究．中国中西医结合杂志,1991，11（2）：75.
5 Takemura K, Talalla K, Mameya S,et al. Regional and functional differences of 5-hydroxytryotamine receptor subtypes in guinea pig stomach. Jpn J Pharmacol, 1999, 79（1）: 41-49.
作者单位：210029 江苏南京，南京中医药大学