甘草提取工艺的优化

　　甘草为豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch）、胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Bat）或光果甘草（Glycyrrhiza glabra L）的干燥根及根茎。在中成药制剂的处方中，甘草的使用频率非常高。笔者以甘草为研究对象，甘草酸为考察指标，为优化最佳工艺条件提供实验数据，药物有效成分的提取受溶剂种类、用量、煎煮时间、pH值等因素影响，我们以采用正交设计进行提取工艺研究。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器 离心机（北京医用离心机厂），UV-160紫外-可见分光光度计（日本岛津）。

　　1.2 试药 甘草（产地:内蒙古），聚酰胺，氨水（分析纯），浓H 2 SO 4 （分析纯）。

　　2 实验方法与结果

　　2.1 正交设计 甘草主要成分甘草酸在甘草中含量为7%～10%，甘草酸在甘草中以钾盐、钙盐的形式存在，其盐较易溶于水，其水溶液中加酸即可析出游离的甘草酸。根据这个原理本文采用水提酸沉法来提取甘草酸。制定因素水平表（见表1），按L9（3 4 ）正交表安排试验，取甘草药材，称取50g，浸润0.5h，按正交实验各项要求的加水量，煎煮时间次数、酸沉pH值，进行煎煮提取，沉淀干燥，得甘草酸。

　　2.2 甘草酸的紫外分光光度测定法 紫外分光光度法测定，甘草酸的紫外吸光度值样品的制备:取各次实验所得的甘草酸粗品0.5g，溶解定容至25ml，静置。取各上清液0.2 ml过聚酰胺层析柱，得待测样品溶液。测定:取各待测样品溶液，用UV-160型紫外可见分光光度计于250nm±1nm处测定吸光度值 ［1］  。

　　2.3 实验设计与数据分析 见表1～3。

　　表1 因素水平（略）

　　表2 提取工艺正交试验结果（略）
    
　　表3 收率方差分析表（略）
   
　　注:F 0.05  （2，2）=19.0，F 0.01  （2，2）=99.0
     
　　结果表明以收率为考察指标时，各因素对甘草酸收率影响大小为:pH值差异有极显著性，加水总量差异有显著性。即:C>A>B。

　　表4 吸收度值的方差分析（略）
   
　　注:F 0.05  （2.2）=19.0，F 0.01  （2.2）=99.0  

　　结果表明三因素间对吸光度值差异无显著性。

　　2.4 甘草提取工艺的优选 根据上述结果分析:结果表明以收率为考察指标时，对甘草提取工艺影响因素次序依次为pH值（C）>总加水量（A）>煎煮时间及次数（B），而以吸光度值为考察指标时，三因素各水平间差异均无显著性，最佳组合为C1A3B3，即取甘草药材，总加水量25倍量，煎煮3次（10倍，1.5h;8倍，1h;7倍，1h），酸沉时pH值为1。

　　3 讨论

　　3.1 甘草主要成分甘草酸，甘草酸在甘草中以钙盐、钾盐等存在，其极性都较大，适用于甲醇、乙醇、水等溶剂提取，笔者用水作为溶剂，提取液通过调节pH值，可以使甘草酸游离沉淀。其最佳提取工艺为:第一次加10倍量水，煎煮1.5h;第二次加8倍量水，煎煮1h;第三次加7倍量水，煎煮1h，将提取液合并浓缩至200ml左右，待冷却后，边搅拌边滴加50%的H 2 SO 4 ，调节pH值为1，沉淀干燥，得甘草酸粗品。

　　3.2 甘草酸收率与甘草的粉碎程度也有一定的关系，这有待于我们进一步考察。

　　参考文献
    
　　1 国家药典委员会.中华人民共和国药典，2000年版.北京:化学工业出版社，2000，一部.
　　作者单位:137100吉林敖东洮南药业股份有限公司