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Ge Erning
Analytical Testing Center，Zhejiang College Traditional Chinese Medicine，Hangzhou310053.
【Abstract】 Objective To establish HPLC method for distinguish between Rhizoma Pinellia cordata and Rhiˉzoma Pinelliae ternatae.Methods The HPLC was conducted on a EuroBond C 18 column（5μm，125×4.0mm），the mobile phase A:methanol-water solution（40:60）（adjusted to pH3.5with phosphoric acid），B:methanol solution，with gradient elution，The detective wavelength was280nm and column temperature at50℃.Results There was a group of special peaks in the extract of Rhizoma Pinellia cordata detected under the optimized experimental condition.Conclusion The method was simple，accurate and good reproducible，under this experimental condition，a group of special peaks in the Rhizoma Pinellia cordata can be separated vary well and determined in accurately.
Key words rhizoma pinellia cordata phizoma pinelliae ternatae HPLC
中药滴水珠为天南星科半夏属草本植物心叶半夏的块茎，具有解毒、止痛、行瘀消肿的功能，常用于毒蛇咬伤、胃痛、头痛、腰痛等，临床上又常用于对肿瘤病人的消肿止痛，效果甚佳。本品为野生药材，外形酷似未去皮的同科植物半夏，但两者的性状、功效不同，药价也相差甚远，时有以价格低十几倍的小个未去皮生半夏来冒充滴水珠。现有的一些权威书籍如《中药志》等所记载的有关药材鉴别资料表明，两者的切面显微图相似，薄层图斑点对应，因此很难对两者进行有效的鉴别。笔者至今未见有关文献有更新的报道。本文以目前通用的高效液相色谱仪作为分析检测工具，用图谱比较法来鉴别滴水珠的真伪。结果发现经有效成分提取和处理后的滴水珠样品在280nm处有较多分离较好的、稳定的吸收峰。而经同样提取和处理的半夏样品在此波长下无明显的吸收峰。
1 仪器和试药
Waters高效液相色谱仪，包括510泵，484紫外检测器，680梯度控制器。EuroBond C 18柱（5μm，125×4.0mm）。定量管20μl。浙江大学N2000色谱工作站。
滴水珠和半夏样品购于华东医药股份公司中药材分公司。甲醇为色谱醇，磷酸、氨水、乙醚、乙醇均为分析醇。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 EuroBond C 18 柱（5μm，250×4.60mm）;流动相A:甲醇-水（40:60），加磷酸调pH至3.5，流动相B:甲醇;梯度淋洗;（0～4min/A液，4～11min/A液线性至B液，11～17min/B液，17～22min/B液快速非线性至A液，流速均为:1ml/min）检测波长为280nm;柱温50℃。
2.2 样品处理 分取滴水珠样品5份，每份5g，半夏样品1份5g，碾磨成粉，置平底瓶中，加水80ml，加热回流1h，离心，取上清液，加入氨水0.5ml，用乙醚萃取5次，合并乙醚液，在水浴蒸干，用氯仿溶解，定容至2ml，待进样。
3 检测波长选择
在波长为210～320nm范围内，每相差10nm做1次检测，至测得较理想图谱的波长区域时，再每相差5nm做1次检测，最后确定检测波长为280nm。
4 样品检测
精密吸取待进样的滴水珠和半夏样品及样品稀释液氯仿各10ml进样，测得色谱图如图1所示，清晰可见滴水珠图谱中的7个具代表性的特征峰。
表1 各特征峰的RSD列表 （略）
5 重现性测试
精密吸取上述5份滴水珠待进样品，各重复测定5次，记录出峰时间、峰高及峰面积，各特征峰的RSD列表如下，由表1可见，本法具良好重现性。
图1 色谱图（略）
注:A.滴水珠;B.半夏;C.氯仿
6 密度及稳定性测试
精密吸取同一供试样品10μl，连续进样5次，测得峰面积积分值的RSD为0.37%。每隔12h分别精密吸取同一供试样品10μl进样，连续5次，测得峰面积积分值的RSD为0.45%。
7 讨论
滴水珠在临床上的应用日见增多，且效果颇佳。由于价格较高（华东医药的批发价为:912.02元/kg），所以常有伪品冒充，其中尤以小个未去皮半夏为甚，且很难用肉眼、显微观察、薄层层析等传统方法进行可靠的鉴别。本文采用HPLC法对滴水珠样品进行了测试实验，在不断优化实验条件后，最终获取如图所示颇具代表性的滴水珠样品波谱图。由图1可见，其与同样实验条件下测得的半夏波谱图区别明显。这一全新的中药资源鉴别法为滴水珠药材的质量控制提供了参考依据。且波谱图中的7强峰亦构成了滴水珠药材的高效液相相对保留值指纹图谱。
参考文献
1 郑虎占，董泽宏，余靖，等.中药现代研究与应用，北京:学苑出版社，1998，1936.
2 孙毓庆，阮婧华，马欣.中药的毛细管电泳指纹图谱研究.色谱，2003，21（4）:303.
4 张雯洁，张华，李忠琼，等.三七中皂苷类成分的液相图谱研究.药学分析杂志，2003，23（4）:328.
作者单位:310053江苏杭州浙江中医学院中心测试室