茶树油的研究概况

    茶树油（Tea Tree Oil）是一个商业名称 ［1］ ，按照植物学上的正确定义，它应该被称为互叶白千层油，因为它主要来自桃金娘科（Myrtaceae）白千层属（Melaleucal.）的数种植物，其最主要的一种称为互叶白千层（Melabeuca alternifolia），次要的植物有包鳞白千层（Melaleuca bracteata）、石南叶白千层（Melaleuca ericifolia）、白油树（Melabeuca quinqunervia）、绿花白千层（Melaleuca Viridiflora）等。互叶白千层原生于澳大利亚，主产于澳大利亚东南沿海（沿新南威尔市州的北部沿海），互叶白千层的新鲜枝叶经水蒸汽蒸馏可得无色至淡黄色的精油，该精油称澳洲茶树油。澳大利亚茶树油2002年被成功列入欧洲药典，是澳大利亚纳入欧洲药典的第2种产品。虽然人们知道茶树油作为药物使用已有很长的历史 ［2，3］ ，但对它作科学的研究始于上世纪20年代。在第二次世界大战期间将茶树油发给澳大利亚战士用于皮肤伤害的治疗。研究表明 ［4～6］ 茶树油具有消毒剂性质，能有效地抑制许多普遍存在的致病细菌和霉菌。对于许多疾病、创伤有很大的帮助。如切伤、擦伤、被昆虫咬伤、粉刺、烧伤、阴道感染、癣等。它也被用于控制空调系统中的细菌和霉菌。目前澳大利亚茶树油被广泛地应用于化妆品、洗用品和兽医用品。因其优异的疗效，目前全世界其他地方也有引种，在与新南威尔市沿海地区气候相似的广西、云南、海南等地区，这种作物已引种成功，有较大的开发利用前景。本文就茶树油的化学成分、定性定量鉴别方法、药理学研究作一综述，以便于进一步开发利用茶树油。 1 茶树油的化学成分研究 ［7］ 对其化学成分进行研究，鉴定出近60个挥发性成分，其精油组成基本为单萜烯，醇类及倍半萜类化合物，占总油含量的99%以上，主要成分为萜品-4-醇和1，8-桉叶油素。欧洲药典 ［8］ 规定了萜品-4-醇、1，8-桉叶油素、α-蒎烯、桧烯、α-萜品烯、γ-萜品烯、柠檬油精、伞花烯、香橙烯、松油烯和α-萜品醇的含量。其中有开发价值的主要有两类:一类以1，8-桉叶油素为主，其含量最高可达76.75%;另一类以萜品-4-醇为主，其含量可达41.51%以上。

     2 茶树油的提取方法 ［7］

     茶树油是一种无色至淡黄色的液体，有特征性的芳香，带芳香萜类气息。工业上常采用水蒸汽蒸馏法，但其他方法也有其使用价值。一般来说不管采用水蒸气蒸馏、水蒸馏法还是溶剂萃取法、微波辅助的溶剂萃取法，对于新鲜或干燥的互叶白千层枝叶原料，精油的得率无明显的差异。溶剂萃取法（以乙醇为溶剂）的得油率往往高于水蒸汽蒸馏法（高10%～20%）。单萜化合物的得率可提高4%～6%，倍半萜化合物的得率提高更为明显。因而溶剂萃取法常用于植物品种的比较和筛选（如用于品种选育）。

     3 茶树油的定性定量鉴别

     3.1 茶树油的药典鉴别方法 欧洲药典 ［8］ 2002年版分别用薄层色谱法和气相色谱法定性鉴别。薄层色谱采用TLC硅胶板，乙酸乙酯:正己烷（20:80）为展开剂，展开约10cm，茴香醛为显色剂。气相色谱法采用聚乙二醇20000的熔融硅胶色谱柱，柱长为30～60m，液膜厚度为1μm，柱内径为0.25～0.53mm。载气为色谱纯氦气，流速1.3ml/min，分流比为1:50，程序升温为:50℃保持1min，以5℃/min的升温速率升至230℃，在230℃保持8min，进样口温度为240℃，检测器温度为240℃，检测器为FID火焰离子化检测器，进样量为1μl。

    3.2 茶树油的含量测定方法及含量规定 欧洲药典 ［8］ 2002年版采用气相色谱法对茶树油中11种成分进行了含量测定。气相色谱条件同鉴别方法。各组分百分含量范围见表1。

    而ISO/TC54在1996年制订的茶树油国际标准 ［9］ 采用的也是气相色谱法定量，对茶树油中14种成分的含量进行了测定。气相色谱条件是以OVI-101作为固定相，石英毛细管柱长50m，内径0.2mm，柱温从70℃上升至220℃，升温速率为2℃/min。各组分百分含量范围见表1。

     表1 茶树油成分含量测定比较（表略）
    
     4.1  抗炎作用 ［10］  茶树油能够通过激活单核细胞来抑制炎症介质的产生。在含有10%小牛血清的玻璃试管中将茶树油超声乳化，当茶树油的浓度为0.016%v/v时会对单核细胞产生一定的毒性。可是，当水溶性成分的浓度为0.125%时，就足以抑制40h后LPS诱导产生的TNFα、IL-β，IL10和PEG 2 、GC-MS图谱中表明萜品-4-醇（42%），α萜品醇（3%），1，8-桉叶素（2%）是茶树油水溶性成分，当分别测定这几种成分时，只有萜品-4-醇能够抑制40h后LPS诱导产生的TNF-α、IL-β、IL-10和PEG 2 。我们可以得出以下结论:茶树油中溶性成分能够通过激活单核细胞来抑制炎症介质的产生。

    4.2 对酵母菌和真菌的作用 ［11～14］  萜品-4-醇，α-萜品醇对酵母菌的活性最强，而后是1，8-桉叶油素，而α-松油烯，γ-松油烯，对异丙基甲苯，异松油烯即便在浓度高达8%时也几乎对酵母菌不起作用。

    萜品-4-醇，α-松油醇，α-蒎烯对皮肤病及丝状真菌作用最强。1，8-桉叶油素，松油烯有温和作用，α-松油烯，γ-松油烯对异丙基甲苯几乎没有作用，以上是通过broth microdilution assay测得。

    茶树油杀灭真菌的速度和浓度的关系:0.5%和1.0%的茶树油杀菌速度最快，其次是0.25%浓度，0.12%浓度的作用甚微。萜品-4-醇、1，8-桉叶油素、异松油烯在0.5%的浓度杀菌速度就相当快，而α-松油烯，γ-松油烯，对异丙基甲苯在1.0%的浓度时仅有温和的杀菌效力。用药24h后，没有微生物可以复活过来。

    茶树油作用于真菌的机制:茶树油可以改变微生物膜的通透性，意味着微生物的细胞膜被破坏。茶树油中的成分作用10min或30min后，膜的流动性增加，除了γ-松油烯。另外，1，8-桉叶油素仅作用10min后膜的流动性就有显著的提高。这表明脂分子和质膜间的分子作用力减小，可能是因为茶树油中的成分插入到脂膜的缘故。

    4.3 对细胞的作用 ［15，16］  在1991～1996年间，众多的独立机构均证实茶树油具有广泛的灭菌特性。它能以低浓度的剂量（0.25%～2%）消灭具有抗药性的金黄葡萄球菌（Staphyl-ococcys aureus）、大肠杆菌（Escherichia Coli）和白色念珠菌（Candida albicans）、肺炎球菌等。

    4.4 杀螨作用 ［17］  澳洲Darvin学院的细胞试验初步研究结果显示，茶树油可望用于治疗疥疮，其活性成分萜品-4-醇可有效降低螨的存活期。以含5%茶树油的25%苯甲基安息香酸局部涂抹于患处，并辅以口服杀螨剂，对病患者具疗效:在5%茶树油组，所有的螨在3h内死光，而单独施用萜品-4-醇则需11.5h;另外，单独投予萜品-4-醇及合并投予α-萜品醇及1，8-桉叶素时，对于螨的杀伤力影响相似;这显示，萜品-4-醇本身已是所谓的活性成分;而以5%防蛀剂及杀螨剂给药1h后，只杀死10%螨类。

     5 茶树油的用途

     茶树油目前主要用于化妆品和食品中，分别作为精油和香料，茶树油作为食品香料使用早已获得美国FDA的批准。国内外有一些关于茶树油作为药物的治疗应用 ［18～20］ ，如用于肌肉松弛和麻醉、治疗烧伤、治疗疱疹、防汗、抗皮肤刺激、治疗指甲真菌、抗齿斑和抗龈炎、治疗痤疮、皮肤疖疮、脚癣、体癣、股癣、细菌性或霉菌性阴道炎。一般来说对100%的茶树油，被试验者中出现皮肤刺激过敏的比例在3.4%以下，对于浓度低于25%的茶树油几乎无人过敏。引起过敏的成分主要是对甲基异丙苯和1，4-过氧对孟烯（ascridole）。 澳大利亚的医药商店和超市中常见到零售的茶树油，它的浓度约为15%，供消费者直接作消毒剂使用。已经使用和有潜在使用价值的产品有:农用杀真菌剂、卫生消毒剂、防腐剂、空气清新剂、空调杀菌剂、防痤疮（粉刺）清洁膏、霜、水、浴用清洁剂、汽车清洁剂、地毯除臭剂、清新剂、餐具清洁剂、脸用、体用、足用清洁剂、清新剂、保湿剂、除臭剂、香波、宠物用卫生用品等。

     6 小结

     综上所述，茶树油具有多种化学成分，不仅具有很强的天然抗菌消炎功能，且对皮肤刺激性小。目前我国和印度也在生产茶树油，我国的主要产区在广西、海南等，年产量约为数十吨，主要用于出口，但产量上远不及澳大利亚，在油的质量上（主要指1，8-桉叶素和萜品-4-醇）也不及澳大利亚茶树油。虽然我国已有制药企业将茶树油用于药品生产，但使用面并不广，因而对茶树油作为药物的研究和开发仍值得我国有关部门重视。

     参考文献

     1 Altman PM.Australian tea tree oil.Aust J Pharm，1988，69:276-278.

     2 Altman PM.Australina tea tree oil-a natural antiseptic.Aust J Biotech- nol，1989，3:247-248.

     3 Carson CF，Riley TV.The antimicrobial activity of tea tree oil.Med J Aust，1994，160:236.

    4 Carson CF，Riley TV.Susceptibility of propionibacterium acnes to the essential oil of Melaleuca alternifolia.Lett Appl Microbiol，1994，19:24 -25.

    5 Carson CF，Riley TV.Antimicrobial susceptibility of the major compo-nents of the essential oil of Melaleuca alternifolia.J Appl Bacteriol，1995，78:264-269.

    6 Carson CF，RileyTV.Toxicity of the essential oil of Melaleuca alternifo-lia or tea tree oil.J Toxicol Clin Toxicol，1995，33:193-194.

    7 J.C.Doran，G.R.Baker，E.R.Williams.Improving Australian Tea Tree.Report for the Rural Industries Research and Development Corpo-ration，2002.

    8 欧洲药典2002版（EP2002），2002，2451-2452.

    9 Essential oils-oil of Melabeuca，terpinen-4-ol（tea tree oil）.ISO-4730（1996）International Organisation for Standardisation，Geneva，Switzerland.

    10 Ocete MA，Risco S，Zarzuelo A，Jimenez J.Pharmacological activity of the essential oil of Bupleurum gibraltaricum:anti-inflammatory activi-ty and effects on isolated rat urter.J Ethnopharmacol，1989，25:305- 313.

    11 Carson CF，Cookson BD，Farrelly HD，et al.Susceptibility of methicillin -resistant Staphylococcus aureus to the essential oil of Meladeuca al-ternifolia.J Antimicrob Chemother，1995，35:421-424.

    12 Hammer KA，Carson CF，RileyTV.Susceptibility of transient and com- mensal skin flora to the essential oil of Melaleuca alternifolia.Am J In-fect Control，1996，24:186-189.

    13 Soderberg TA，Johansson A，Gref R.Toxic effects of some conifer resin acids and tea tree oil on human epithelial and fibroblast cells.Toxicolo-gy，1996，107:99-109.

    14 Hayes AJ，Leach DN，Markham JL.In vitro cytotoxicity of Australian tea tree oil using human cell lines.J Essent Oil Res，1997，9:575- 582.

    15 Juergens UR，Stober M，Vetter H.Inhibition of cytokine production and arachidonic acid metabolism by eucalyptol（1，8-cineole）in human monocytes in vitro.Eur J Med Res，1998，3:508-510.

    16 Williams LR，Clonal production of tea tree oil high in terpinen-4-ol for use informulation for the treatment of thrush.ComplementTher Nurs Midwif，1998，4:133-136.

    18 Ferrante A，Thong YH.Arapid one-step procedure for purification of  monomuclear and polymorphonuclear leukocytes from human blood us-ing a modification of the Hypaque-Ficoll technique.J Immunol Meth- ods，1978，24:389-393.

     19 Pippin MA，Pabst KM，Pabst MJ，et al.Superoxide release by neu-    trophils is inhibited by tea tree oil.J Dent Res，1994，73:259.

    20 Santos FA，Rao VSN.Mast cell involvement in the rat paw oedema re-sponse to1，8-cineole，the main constitutent of eucalyptus and rose- mary oils.Eur J Pharm，1997，331:253-258.

    
     作者单位:100050北京中国药品生物制品检定所