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Department of Brain Neurosurgery，The People's Hos-pital of Dongguan，Guangdong523018，China
【Abstract】 Objective To study the antithrombotic effect of BLE in this paper.Methods Thrombin time（TT），prothrombin time（PT），KPTT in rabbits and clotting time in mice，Platelet aggregation induced by ADP in the rab-bits were studied in this paper.Results Thrombin time（TT），prothrombin time（PT），KPTT in rabbits and clotting time in mice were prolonged significintly.Platelet aggregation induced by ADP in the rabbits was inhibited.Conclu-sion BLE significantly inhibited the formation of arteris thrombus in the rabbits.
【Key words】 BLE;XDIJ;antithrombotic;platelet aggregation;clotting time
竹叶作为传统中药在中国已有上千年的历史。银杏叶是一类天然的抗氧化剂和自由基清除剂，竹叶具有抗自由基的活性并与银杏叶具有可比性 ［1］ 。据《药品化义》中记载，竹叶治温以清，专清心气，味淡利窍，使心经热血分解。目前竹叶已用作心脑血管疾病的保健品，笔者旨在从抗心肌缺血缺氧作用方面探讨竹叶提取物改善心血管的作用，为其在心血管方面的临床应用提供基础实验研究依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 昆明种小白鼠，18～22g，大耳白家兔2.0～2.5kg，雌雄兼有，以上动物均由中国医科大学动物室提供，合格证号:辽实动字033号。
1.2 药品与试剂 竹叶提取物由广东省中药研究所提供（总黄酮含量为85.2%，批号200006，用时以0.9%生理盐水配成相应的浓度）;香丹注射液为市售，广州白云山制药总厂中药厂产品，批号:950905。白陶土部分凝血活酶时间试剂盒及凝血酶试剂盒均购自天津普利生企业有限公司，批号:990902;二磷酸腺苷二钠（ADP），上海伯奥生物科技有限公司产品，批号981001。
1.3 实验仪器 PAM-3型双通道血小板聚集仪，80-Ⅱ型离心沉淀器，电热恒温水浴锅。
2 方法与结果
2.1 对小白鼠体外凝血时间的影响 取小白鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。分别为竹叶提取物22.5mg/kg，45mg/kg，90mg/kg组，香丹注射液4.8ml/kg组，0.9%等容积的生理盐水组。尾静脉注射给药20min后用眼科镊子迅速摘去小白鼠右眼球，在载玻片上滴1滴血，直径约5mm，立即用秒表计时，当有血丝被挑起时停止计时，记录时间 ［2］ 。见表1。
Tab.1 The effect of BLE on cruor time in mice Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
2.2 对家兔血浆凝血酶原时间（PT）的影响 取家兔50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。分别连续灌胃3天，每天1次，灌胃1%CMC-Na.竹叶提取物提取物150、300、600mg/kg及阳性对照药香丹注射液100mg/kg，末次给药1h后依文献 ［2］ 的方法从家兔耳缘静脉取血，以3.8%拘橼酸钠抗凝（9:1）3000r/min离心10min，取血浆。取试管3只，每管加入血浆、0.025mol/L的CaCl 2 及兔脑浸出粉各0.1ml，37℃恒温水浴，同时开始计时，记录液面不再流动的时间，取3管时间平均值，计算凝血酶原时间。见表2。
2.3 对家兔血浆白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）的影响 取“2.2”方法制备的抗凝血的血浆，按试剂盒说明书的方法测白陶土部分凝血活酶时间。见表3。
2.4 对家兔血浆凝血酶时间（Thrombin Time）的影响 取“2.2”方法制备的抗凝血的血浆，按试剂盒说明书的方法测凝血酶时间。见表4。
Tab.2 The effect of BLE on PT in rabbits Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
Tab.3 The effect of BLE on KPTT in rabbits Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
Tab.4 The effect of BLE on thrombin time in rabbits Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
2.5 对ADP诱导的家兔血小板聚集的作用 取大耳白家兔40只，依“2.2”的方法分组给药，末次给药1h后依文献 ［3］ 方法耳缘静脉取血，按体外实验方法制备PPP，PRP，测定血小板聚集并记录药物对ADP（1μmol/L）诱导血小板聚集的影响。见表5。
Tab.5 The effect of BLE on platelet aggregation in rabbits Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
2.6 竹叶提取物对家兔优球蛋白溶解时间（ELT）的影响 取大耳白家兔50只，按“2.2”的方法分组给药，末次给药1h后按文献 ［4］ 的方法耳缘静脉采血1.8ml，3.8%的枸橼酸钠1:9抗凝。3000r/min离心10min，取血浆。取10ml的离心管，先加入0.5ml血浆和9ml蒸馏水，再加入1%醋酸液0.1ml。4℃冰箱保存19min，3000r/min离心5min，取沉淀，加硼酸缓冲液0.5ml，玻璃棒轻搅5min，然后置于37℃水浴中 加0.025mol/L CaCl 2 0.5ml，待其凝固，观察凝块完全溶解所需时间。见表6。
Tab.6 The effect of BLE on ELT in rabbits Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
2.7 竹叶提取物对小鼠全血凝块溶解实验的影响 取小白鼠50只，按“2.1”的方法分组给药，末次给药1h后按文献 ［5］ 的方法眼眶静脉（采用毛细管法）取血1ml置塑料小试管中，37℃水浴保存8h，取血凝块吸干余血，分别称重。见表7。
Tab.7 The effect of BLE on bleed clot in vitro Group Dose（略）
注: * P<0.05; ** P<0.01compared with control group
3 讨论
本实验中，竹叶提取物提取物能显著延长小白鼠凝血时间及家兔白陶土活化部分凝血活酶时间，提示该物质通过干扰内源性凝血系统因子的活性，从而使纤维蛋白的生成受到抑制。竹叶提取物提取物还能显著延长家兔凝血酶原时间，提示该物质是通过干扰外源凝血系统因子的活性，而抑制凝血酶原向凝血酶的转变，从而使纤维蛋白原向纤维蛋白的转变受到抑制。竹叶提取物提取物能显著延长凝血酶时间，抑制纤维蛋白原向纤维蛋白的转变。竹叶提取物提取物能显著抑制ADP引起的家兔血小板聚集，从而具有抑制动脉血栓形成的作用。竹叶提取物提取物不能缩短优球蛋白溶解时间，也不能减轻全血凝块的重量，说明竹叶提取物提取物不具有纤溶活性。竹叶提取物提取物具有活血化瘀作用，它的活血化瘀作用将成为其临床预防及治疗脑血管疾病的药理学基础之一。
【参考文献】
1 周本宏，罗顺德，蔡鸿生.竹叶提取物的药理及临床应用研究进展.中成药，1991，13（11）:38.
2 陈奇.中药药理研究方法学，北京:人民卫生出版社，1993，9:481;615.
3 Born GVR.Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its Reversal.Nature，1962，194:927.
4 徐淑云.药理实验方法学，北京:人民卫生出版社，1991，838.
5 刘威，周重楚，师海波.脑栓通对血液系统的影响.中成药，1993，15（3）:26-28.
作者单位:523018广东东莞，东莞市人民医院神经外科
110016辽宁沈阳，中国医科大学第二临床学院神经外科