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法莫替丁（Famotidine）是一种抗酸药及胃黏膜保护药。临床上用于抑制胃酸分泌也可抑制胃蛋白酶的分泌。法莫替丁其检验方法 ［1～3］ 是采用非水滴定法测定含量，TLC法检查有关物质检查。本文尝试采用HPLC法，以甲醇为溶剂，可以同时测定含量、有关物质。其操作简便，重现性好，准确度高。
1 仪器与试剂
JASCO-900高效液相色谱仪（日本），JASCO UV-975uv/vis检测器。法莫替丁对照品（10305-0001，100%）由中检所提供;法莫替丁由日本某制药株式会社生产;乙腈为色谱纯;其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱:WatersC 18 （5μm，3.9×150mm）;流动相 ［1］ :0.2%庚烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调pH至3.0）-乙腈-甲醇（100:24:3）;柱温:室温;流速:0.8ml/min;进样:20μl;检测波长 ［1］ 为:254nm。理论板数按法莫替丁计算为2400。法莫替丁对照及样品色谱图见图1。
2.2 线性试验 精密称取法莫替丁对照品适量加甲醇溶解并稀释成1ml含1057.6μg的溶液，并取该液用流动相分别稀释成1ml含105.67、158.64、211.52、264.40、317.28μg/ml5个浓度梯度。在上述色谱条件下，分别进样20μl测定，记录色谱图，以样品浓度为横坐标X，以峰面积为纵坐标Y，进行线性回归分析。回归方程:Y=4.322×10 7 X-1.315×10 5 ，r=0.99994。结果表明，在106～317μg/ml范围内，线性关系良好。
图1 对照及样品色谱图（略）
2.3 回收率试验 精密称取法莫替丁对照品50mg共5份于50ml量瓶中，分别加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10.0ml置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀后进样20μl测定，按外标法以峰面积计算回收率，其平均回收率为99.77%，RSD=1.0%（n=3）。
2.4 稳定性试验 取线性关系试验溶液，于室温下分别放置1，4，8，12h后测定，其峰面积的RSD为0.9%。
2.5 精密度与重复性试验 配制5份样品溶液（FMTK0.15），连续6次进样测定，按峰面积计算精密度与重复性，其RSD分别为0.6%和0.9%。
2.6 专属性试验 称取法莫替丁约25mg5份，分别在碱溶液、酸溶液、30%H 2 O 2 溶液，高温（80℃）及光照条件下室温放置24h，按样品测定方法项下方法稀释，取20μl注入色谱仪，记录色谱图至法莫替丁峰保留时间的2倍。破坏条件下所产生的降解产物均能与主峰很好分离。
2.7 法莫替丁含量与有关物质测定 精称取法莫替丁100mg置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取5.0ml置50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，为供试品溶液;同时取该液1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为有关物质的对照溶液;分别进样20μl测定，记录色谱图，以外标法计算法莫替丁与有关物质测定的含量。同时将测定结果与非水滴定法比较。见表1。
表1 样品含量测定结果（略）
3 讨论
原标准中有关物质测定项下溶解样品所用溶剂是冰醋酸。实验中我们分别用甲醇和冰醋酸溶解样品作对比实验，其结果表明:（1）用甲醇作溶剂，其杂质峰面积较小;（2）用冰醋酸作溶剂，其杂质峰面积明显增大。采用甲醇作溶剂可避免在溶解样品时使其分解。此外，采用HPLC法来测定有关物质的含量，其色谱条件与含量测定项下的色谱条件相同，在含量测定的同时，即可对有关物质进行测定。方法准确可行。
【参考文献】
1 国家药典委员会.中国药典，2000年版（二部）.北京:化学工业出版社，2000，424-425.
2 British Pharmacopoeia Commission office.BP2004（Ⅲ）.London:Thestarionery office，2004，2408.
3 United States Pharmacopeial Convention，INC，USA28.NF23（I）.Asian Edition，2005，806.
作者单位:
1 116021辽宁大连，大连市药品检验所
2 312030中国医科大学华宇医院
（编辑:卉 梅）