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【摘要】 目的 探讨血酶学测定的标本处理因素对结果的影响。方法 对10例正常人和10例肝病患者血液标本分别做不同的处理后测定SOD。结果 测定的SOD值有较大差别，其CV值有较大变化。结论 其影响因素从大到小分别为溶血＞血清贮存温度和时间不当＞血浆＞血清分离时间。
【关键词】 酶学测定；处理因素；标本
血酶学测定的标本处理因素不同，经常对结果产生较大的误差而影响临床诊断。本文以超氧化物歧化酶（SOD）为例，探讨SOD测定的一些影响因素，报告如下。
1 材料和方法
1.1 材料 Cu/Zn、SOD RIA kit：由第二军医大学提供。
1.2 方法 10例正常人和10例肝病患者均空腹抽血，1h内分离血清。溶血血清为抽血后迅速于-20℃冻融离心而成。0.5h、1h和3h分离的血清在15～25℃条件下进行。血浆均按常规抗凝剂浓度抗凝。
2 结果
SOD RIA测定的影响因素见表1。分为(1)血清与溶血血清：表中CV为同1份血清作3管的平均变异（批内）；(2)血清与血浆：表中CV为同1份血清或血浆4种情况的平均变异（批内）；(3)血清分离时间：表中CV为同1份血清3种情况的平均变异（批内）；(4)血清贮存温度与时间：表中CV为同1份血清3周贮存的平均变异（批间）。
表1 SOD RIA测定的影响因素 略
3 讨论
影响SOD RIA的测定结果除试剂盒因素外，对标本处理不当更为重要。实验结果显示同份血清的批内变异为5.8%，原血清和-20℃贮存血清的批间变异为10.3%，说明试剂和操作过程是基本可靠的。溶血标本的SOD活力3～15倍于无溶血标本，病理情况下变化更大，其升高幅度因溶血程度而异，因此血清SOD活力测定要绝对避免溶血。抗凝血对SOD测定均有不同程度的影响，可能血浆中的抗凝剂能直接或间接地抑制酶的活性，因此SOD测定最好用血清。室温条件下不能保持SOD活力，20℃第2周后的酶活力将大部分失活，因此抽血分离血清后要及时将标本存放于冰箱中。标本于4℃及-20℃条件下贮存两周均可保持SOD活力，但4℃3周比-20℃3周的酶活力明显下降，其CV值亦增大，因此2周内测定，标本于4℃贮存即可，如遇特殊情况需要保存2～3周，则要-20℃贮存，以免失活。同时贮存血清或其他标本（4℃或室温）如果长菌，则不宜测定SOD，因需氧菌生长时不但能产生O-2,而且可产生SOD，其测定结果不能真正代表体内SOD活力。至于血清分离时间，笔者认为以1h内为好，既要保持SOD活力，又要避免半小时内血样高速离心或3h后暴露过久以及温度过高所造成的溶血或失活而影响测定结果。本实验除t（或t’）检验有差异的7组对测定结果的影响最明显外，其余组虽差异无显著性（P均＞0.05），但其CV值多数>15%（批内或批间），不符合RIA二抗夹心沉淀法的要求。其影响因素可概括为，溶血（P＜0.01）＞血清贮存温度和时间不当（P<0.05）＞血浆＞血清分离时间。
作者单位： 435001 湖北黄石，黄石市第一医院检验科
(编辑：齐 永)