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【摘要】 目的 验证拨云滴眼剂的体外抑菌和杀菌作用。方法 测定拨云滴眼剂对8种细菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果 拨云滴眼剂对金葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌和乙型链球菌的最小抑菌浓度分别为1.06、4.25、8.50、8.50、0.03和0.03g/L。对金葡萄球菌、白葡萄球菌、甲型链球菌和乙型链球菌最小杀菌浓度分别为2.13、8.50、0.07、0.07g/L。结论 拨云滴眼剂在体外对一些细菌有抑菌和杀菌作用。
【关键词】 拨云滴眼剂；最小抑菌浓度；最小杀菌浓度
Boyun eye drops inhibition on bacteria in vitro
LIU Hong-wei,Peng Shu-ling.
Department of Pharmacology,Beijing Institute of Ophthmology,Beijing Tongren Hospital,Capital University of Medical Sciences,Beijing 100005,China
【Abstract】 Objective To determine the inhibition of bacteria by boyun eye drops in vitro.Methods We measure the minimal inhibitory concentration(MIC) and minimal bactericidal concentration(MBC) to 8 bacteria by bayun eye drops.Results The MIC to Staph aureus,Staph albicans,bacillus subitilis,E coli,streptococci group A and B were 1.06,4.25,8.50,8.50,0.03 and 0.03g/L,The MBC to Staph aureus,Staph albicans,streptococci group A and B were 2.13,8.50,0.07,0.07g/L.Conclusion Boyun eye drops had the inhibitive and killing effects on some bacteria in vitro.
【Key words】 boyun eye drop；minimal inhibitory concentration；minimal bactericidal concentration
拨云滴眼剂是根据传统药物拨云锭的组方，按照现代制剂学的新技术研制而成治疗眼病的眼用混悬液，笔者对其的体外抑菌和杀菌作用进行研究。
1 材料与方法
1.1 菌种来源 实验菌株由北京同仁医院细菌室提供，其中有质控菌株金葡萄球菌ATCC25925、大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853，临床分离菌白葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、变形杆菌和枯草杆菌共8种。
1.2 药物来源 拨云滴眼剂由昆明老拨云堂药业有限公司提供，规格为8ml(0.34g)。
1.3 实验方法
1.3.1 培养基 M-H培养基用于此次实验。
1.3.2 细菌准备 将培养的细菌定标为108，将其稀释为105备用。
1.3.3 实验过程 将拨云滴眼剂分别稀释为1/5、1/10、1/20、1/40、1/80、1/160、1/320、1/640、1/1280和1/2560。将上述药物0.5ml加入0.5ml的细菌液中，37℃培养24h，并做阳性及阴性对照。阳性对照：0.5ml营养液+0.5ml细菌液；阴性对照：0.5ml稀释为1/5的拨云滴眼剂+0.5ml营养液。每种浓度2管。
1.4 实验观察
1.4.1 最小抑菌浓度(MIC) 试管二倍稀释法测定，无细菌生长(37℃、24h、5%CO2)所含抗生素最小浓度为最小抑菌浓度。
1.4.2 最小杀菌浓度(MBC) 采用肉汤对倍稀释平板活菌计数法测定最小杀菌浓度，将MIC未见细菌生长各管培养分别吸取0.1ml倾倒于平皿中，37℃，培养18h，平皿上菌落数＜5个的最小稀释度的药物浓度为最小杀菌浓度。
2 结果
2.1 最小抑菌浓度 阳性对照有菌生长，而阴性对照无菌生长。金葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌和乙型链球菌的最小抑菌浓度分别为1.06、4.25、8.50、8.50、0.03和0.03g/L，绿脓杆菌和变型杆菌的都大于8.50g/L，见表1。
2.2 最小杀菌浓度 金葡萄球菌、白葡萄球菌、甲型链球菌和乙型链球菌最小杀菌浓度分别为2.13、8.50、0.07和0.07g/L，见表2。
3 讨论
拨云滴眼剂在体外可抑制金葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌和乙型链球菌的繁殖。对金葡萄球菌、白葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌有一定的杀菌作用。
拨云锭的主要成分为炉甘石、冰片、龙胆浸膏、没药、麝香等、拨云锭治疗眼病时，需患者用水与锭剂混和，增加污染的机会。拨云滴眼剂是根据拨云锭的组成，利用现代药剂学的技术，制成的滴眼混悬液，它为无菌制剂，减少了人为的污染。
文献报道，拨云锭体外对9种菌的实验中，对金葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌和乙型链球菌的最小抑菌浓度分别0.78、1.56、6.25、12.5、1.56和1.56g/L，对绿脓杆菌和变型杆菌的最小抑菌浓度分别为25.0和50.0g/L［1］。我们的实验结果显示，对金葡萄球菌、白葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌和乙型链球菌的最小抑菌浓度分别为1.06、4.25、8.50、0.03和0.03g/L，对绿脓杆菌和变型杆菌的MIC都大于8.50g/L。
表1 最小抑菌浓度(略)
表2 最小杀菌浓度(略)
氧氟沙星对金葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的MIC为0.0005～0.004g/L［2］，对耐药的绿脓杆菌，氧氟沙星的MIC为0.064g/L［3］。中药不同于化学药，中药的MIC较大，其值指生药浓度，如能找出其中的有效成分，其MIC可能较小。
【参考文献】
1 王迪，郑英，陈金秀.拨云锭眼药对9种常见致病菌的体外抗菌作用观察.眼科研究，2002，20，365-366.
2 Seifert H.Comparative in-vitro activities of trovafloxacin,ciproflaxacin,ofloxacin,and broad-spectrum beta-lactams against aerobe blood culture isolates.Zentralbl Bakteriol,1998,288(4):509-518.
3 Felmingham D,Foxall P,O’Hare MD,et al.Resistance studies with ofloxacin.J Antimicrob Chemother,1988,22(Suppl C):27-34.
作者单位： 100005 北京，首都医科大学附属北京同仁医院、北京市眼科研究所药理室
(编辑：罗 彬)