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【摘要】 目的 提高健胃消食片的质量标准。方法 采用高效液相色谱法对方中陈皮的橙皮苷成分进行含量测定。结果 橙皮苷HPLC含量测定方法可行。结论 该方法可用于控制产品质量。
【关键词】 健胃消食片；高效液相色谱法；橙皮苷
健胃消食片由太子参、陈皮、山药、麦芽、山楂组成，滋阴补肾，功能健胃消食，用于脾胃虚弱，消化不良。原质量标准里对山楂、陈皮进行TLC的鉴别，无含量测定，在质量控制方面较为欠缺。为了更好地控制本产品的内在质量，笔者增加了HPLC法测定橙皮苷的含量项。
1 试验条件
高效液相色谱仪：Agilent HP1100；色谱条件：色谱柱：C18，5μm；流动相：乙腈-0.4％磷酸溶液(20：80)； 流速：1ml/min；检测波长：283nm［1］；橙皮苷对照品：中国药品生物制品检定所；乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯；健胃消食片由广州白云山和记黄浦中药有限公司提供。
2 方法与结果
2.1 提取方式比较
分别比较超声15min、超声30min、回流1h、回流2h，以及参照中国药典陈皮中橙皮苷含量测定项下方法：样品置索氏提取器中，以石油醚脱脂，后以甲醇回流至无色，定容，如法测定，结果见表1。表1 不同提取方法的陈皮中橙皮苷含量 (略)
从表1中结果可以看出，回流1h与回流2h提取效率相当，而参考药典方法含量偏低，估计为提取过程中损失，为节约能源与时间，选用回流1h，因此，确定橙皮苷的提取方式为回流1h。
2.2 测定方法
2.2.1 对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品制成每1ml含20μg的对照品溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备
取本品10片，研细，精密称取1g，精密加入甲醇25ml，称定重量，回流1h，放冷，用甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性对照溶液的制备
取陈皮阴性对照1g，按供试品溶液的制备方法制备，即得。
2.2.4 测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果表明：在与橙皮苷对照品色谱的相应位置上无干扰出现，说明方中其他成分对测定结果无影响。图谱见图1～3。
2.3 方法学试验
2.3.1 线性
以橙皮苷对照液(浓度为24.8μg/ml)分别进样5μl、10μl、15μl、20μl、30μl，按试验方法测定，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明，橙皮苷在0.124～0.744mg的范围内，其进样量与峰面积呈良好的线性关系，Y＝1665.1X+7.75，R＝0.9992。
2.3.2 精密度
取橙皮苷对照液(浓度为24.80μg/ml)，进样5次，按上述试验方法项下的色谱条件测定，其RSD=1.6%，符合要求。
2.3.3 稳定性试验
取健胃消食片按含量测定项下条件测定其峰面积，每隔1h测定1次，连续8次，其RSD=3.7%。结果表明：样品在8h内稳定，符合要求。
2.3.4 重现性试验
取同批健胃消食片按上述条件提取6份，按含量测定项下的方法分别制备供试液并测定，其RSD=1.4%。结果表明：本法检测橙皮苷具有良好的重现性。
2.3.5 回收率试验
取已知橙皮苷含量（0.293mg/g）的健胃消食片约0.5g，精密称定，精密加入等量的橙皮苷对照品，按上述供试品的制备方法制备，一式5份，结果见表2。表2 橙皮苷回收率考察表（略）
结果表明：本方法橙皮苷平均回收率为99.2％，符合规定。
2.3.6 样品的测定
取3批健胃消食片测定其橙皮苷含量，每份样品测定3次取均值。结果分别为：0.21mg/片（批号040501）、0.24mg/片（批号040502）、0.26mg/片（批号040503）。
3 讨论
3.1 橙皮苷的提取是影响其含量测定的关键之一。利用橙皮苷溶于热甲醇的特性，采用甲醇回流1h的提取方法，基本能将橙皮苷提取完全。
3.2 选择乙腈-0.4％磷酸溶液(20：80) 为流动相，橙皮苷主峰与其他组分完全分离。
3.3 通过HPLC法测定橙皮苷的含量测定考察，结果表明：结果准确，重现性好，可较好地控制产品的质量。
【参考文献】
1 国家药典委员会.中华人民共和国药典.2000版一部，北京：化学工业出版社，2000.
2 崔丽华.HPLC法测定陈皮中橙皮苷的含量.中国药事，2000，14（2）：601.
作者单位： 510515 广东广州，白云山和记黄埔中药有限公司
(编辑：邓锋)